| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-18页 |
| ·猪α干扰素简介 | 第7页 |
| ·干扰素的分类 | 第7-8页 |
| ·猪α干扰素生物学特性及应用 | 第7页 |
| ·猪α干扰素的研究进展 | 第7-8页 |
| ·毕赤酵母表达系统简介 | 第8-9页 |
| ·传统发酵条件及参数对外源蛋白表达的影响 | 第9-12页 |
| ·发酵培养基对外源蛋白表达的影响 | 第9-10页 |
| ·诱导温度对外源蛋白表达的影响 | 第10页 |
| ·pH 对外源蛋白表达的影响 | 第10页 |
| ·DO 对外源蛋白表达的影响 | 第10-11页 |
| ·甲醇浓度对外源蛋白表达的影响 | 第11页 |
| ·代谢副产物对外源蛋白表达的影响 | 第11-12页 |
| ·高密度细胞培养条件下的甘油流加策略 | 第12-13页 |
| ·恒速流加和指数流加 | 第12页 |
| ·DO-Stat 流加策略和人工神经网络流加策略 | 第12-13页 |
| ·诱导期甲醇流加策略 | 第13-15页 |
| ·通过甲醇利用率和比生长速率来控制甲醇的流加 | 第13-14页 |
| ·通过溶氧的变化来控制甲醇的流加 | 第14页 |
| ·利用甲醇电极在线测量甲醇浓度来控制甲醇的流加 | 第14页 |
| ·甲醇与其它碳源混合流加 | 第14-15页 |
| ·二维平面多变量聚类分析预判甲醇诱导期的发酵性能 | 第15-16页 |
| ·本论文研究背景及内容 | 第16-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-24页 |
| ·供试菌株 | 第18页 |
| ·实验仪器 | 第18-19页 |
| ·培养基 | 第19页 |
| ·培养方法 | 第19-20页 |
| ·种子培养 | 第19页 |
| ·发酵培养 | 第19-20页 |
| ·分析方法 | 第20-22页 |
| ·细胞浓度测定 | 第20页 |
| ·甲醇浓度测定 | 第20页 |
| ·乙醇浓度测定 | 第20页 |
| ·酶活力测定 | 第20-21页 |
| ·转录水平的测定 | 第21页 |
| ·总蛋白浓度测定 | 第21-22页 |
| ·猪α干扰素浓度测定 | 第22页 |
| ·OUR,CER,RQ 的测定 | 第22页 |
| ·培养基流加策略 | 第22-24页 |
| ·甘油流加策略 | 第22-23页 |
| ·甲醇流加策略 | 第23-24页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第24-41页 |
| ·利用基于乙醇在线测量的甘油流加策略稳定 pIFN-α发酵性能 | 第24-32页 |
| ·使用传统 DO-Stat 法流加甘油时 pIFN-α发酵性能 | 第24-26页 |
| ·利用甲醇电极在线测量细胞培养期的乙醇浓度 | 第26-27页 |
| ·甘油流加培养阶段乙醇的生成积累对 pIFN-α表达的影响 | 第27-28页 |
| ·细胞培养期内利用改良型 DO-Stat 甘油流加策略稳定 pIFN-α的生产性能 | 第28-31页 |
| ·不同甘油流加策略对 pIFN-α表达系统关键酶基因转录水平以及酶活性的影响 | 第31-32页 |
| ·根据细胞培养期乙醇浓度及乙醇环境维持时间预判最终发酵性能 | 第32-33页 |
| ·不同细胞密度条件下 DO 对猪α干扰素发酵性能的影响 | 第33-35页 |
| ·高细胞密度条件下甲醇浓度和 DO 对猪α干扰素发酵性能的影响 | 第35-41页 |
| ·甲醇浓度和 DO 对毕赤酵母发酵生产猪α干扰素表达量的影响 | 第35-37页 |
| ·甲醇浓度和 DO 对毕赤酵母呼吸代谢特征的影响 | 第37-39页 |
| ·甲醇浓度和 DO 对毕赤酵母细胞内甲醇代谢关键酶活性的影响 | 第39-41页 |
| 主要结论与展望 | 第41-43页 |
| 主要结论 | 第41页 |
| 展望 | 第41-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| 附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第48页 |