腺苷酸脱氨酶基因的克隆与重组表达
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-17页 |
| ·呈味核苷酸概述 | 第8-13页 |
| ·呈味核苷酸的发展历史 | 第8页 |
| ·呈味核苷酸的性质 | 第8-10页 |
| ·呈味核苷酸的应用 | 第10页 |
| ·呈味核苷酸的生产方法 | 第10-13页 |
| ·AMP脱氨酶概述 | 第13-15页 |
| ·AMP 脱氨酶基因家族简介 | 第13页 |
| ·AMP 脱氨酶基因的结构与特性 | 第13-14页 |
| ·AMP 脱氨酶基因与人类疾病 | 第14页 |
| ·AMP 脱氨酶基因与肉质风味的关系 | 第14-15页 |
| ·AMP 脱氨酶的生产开发现状 | 第15页 |
| ·本课题的研究意义与研究内容 | 第15-17页 |
| ·本课题的研究意义 | 第15-16页 |
| ·本课题的研究内容 | 第16-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-27页 |
| ·实验材料 | 第17-20页 |
| ·菌株和质粒 | 第17页 |
| ·引物 | 第17-18页 |
| ·工具酶与各种试剂 | 第18页 |
| ·培养基 | 第18页 |
| ·常用实验溶液的配制 | 第18-19页 |
| ·实验仪器 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20-27页 |
| ·曲霉染色体基因组的提取 | 第20页 |
| ·曲霉总 RNA 的提取(硅藻土-苯酚法) | 第20页 |
| ·鼠灰链霉菌染色体基因组的提取 | 第20-21页 |
| ·酵母染色体基因组的提取 | 第21页 |
| ·感受态细胞的制备以及转化 | 第21-22页 |
| ·质粒小量快速提取法 | 第22-23页 |
| ·其它分子生物学操作 | 第23页 |
| ·AMP 脱氨酶活性测定 | 第23页 |
| ·AMP 脱氨酶基因的重组表达 | 第23-24页 |
| ·重组毕赤酵母菌株的发酵条件优化 | 第24页 |
| ·AMP 脱氨酶的纯化及酶学性质研究 | 第24页 |
| ·PCR 扩增条件 | 第24-27页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第27-49页 |
| ·AMP 脱氨酶基因的克隆 | 第27-31页 |
| ·蜂蜜曲霉 AMP 脱氨酶基因的克隆 | 第27-29页 |
| ·米曲霉 AMP 脱氨酶基因克隆 | 第29-30页 |
| ·鼠灰链霉菌 AMP 脱氨酶基因的克隆 | 第30-31页 |
| ·AMP 脱氨酶基因的重组表达 | 第31-39页 |
| ·AMP 脱氨酶基因在原核系统中的表达 | 第31-35页 |
| ·AMP 脱氨酶基因在真核系统中的表达 | 第35-39页 |
| ·重组毕赤酵母菌株的发酵初步优化 | 第39-45页 |
| ·重组毕赤酵母菌生长曲线的测定 | 第39-40页 |
| ·重组毕赤酵母菌发酵培养基的优化 | 第40-42页 |
| ·重组毕赤酵母菌发酵条件的优化 | 第42-44页 |
| ·正交实验 | 第44-45页 |
| ·重组 AMP 脱氨酶的纯化及酶学性质研究 | 第45-49页 |
| ·重组 AMP 脱氨酶的纯化 | 第45页 |
| ·重组 AMP 脱氨酶酶学性质的研究 | 第45-49页 |
| 主要结论与展望 | 第49-50页 |
| 主要结论 | 第49页 |
| 展望 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 附录：作者在攻读硕士论文期间发表的论文 | 第55-56页 |
| 附录A：蜂蜜曲霉 AMP 脱氨酶基因完整序列 | 第56-57页 |
