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不同禽源Ⅰ型副粘病毒的生物学特性研究

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一章 引言第13-20页
   ·禽Ⅰ型副粘病毒概述第13页
   ·禽Ⅰ型副粘病毒的分子生物学特性研究进展第13-16页
     ·APMV-1的基因组与结构蛋白特征第13-15页
     ·生物学活性第15-16页
     ·培养特性第16页
   ·禽Ⅰ型副粘病毒的分型第16-17页
   ·APMV-1致病力分子机制的研究进展第17-18页
     ·APMV-1的致病性第17页
     ·APMV-1致病性的分子基础第17-18页
   ·不同禽源APMV-1的研究进展和意义第18-20页
第二章 材料和方法第20-30页
   ·实验材料第20-23页
     ·毒株来源第20页
     ·SPF鸡胚、SPF鸡和鸡外周血红细胞第20页
     ·主要仪器设备第20页
     ·主要试剂第20-21页
     ·引物第21-23页
   ·实验方法第23-30页
     ·病毒的分离鉴定第23页
     ·血凝和血凝抑制试验第23-24页
     ·原代鸡胚成纤维细胞(CEF)的制备和传代第24页
     ·不同来源APMV-1的纯化第24-25页
     ·病毒的繁殖第25页
     ·提取病毒的RNA以及反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)第25页
     ·RT-PCR产物纯化及回收第25-26页
     ·目的片段与pMD-18T的连接第26页
     ·连接产物的转化第26页
     ·重组质粒的提取及鉴定第26-27页
     ·全基因组序列的拼接及系统进化树分析第27页
     ·致病性指数以及EID_(50)的测定第27页
     ·病毒在SPF鸡中阳性血清的制备第27-28页
     ·病毒对SPF鸡的感染试验第28页
     ·实时荧光定量RT-qPCR对组织样品中病毒载量的监测第28-29页
     ·交叉血凝抑制试验第29页
     ·交叉中和试验第29-30页
第三章 试验结果第30-51页
   ·病毒的分离鉴定第30页
   ·分离株的纯化第30-31页
     ·蚀斑纯化的毒株第30-31页
     ·鸡胚有限稀释法纯化的毒株第31页
   ·测序结果分析第31-41页
     ·各毒株的基因组分析第31-32页
     ·各毒株的基因分析第32-41页
   ·系统进化关系分析第41-45页
     ·全基因组的系统进化关系分析第41页
     ·F基因高变区的系统进化关系分析第41页
     ·F基因的系统进化关系分析第41-45页
   ·APMV-1的EID_(50)及致病力指数测定第45-46页
     ·APMV-1的MDT及EID_(50)测定结果第45页
     ·APMV-1的ICPI测定结果第45-46页
   ·动物试验第46-49页
     ·感染鸡的临床症状第46页
     ·感染鸡的剖检病变第46-47页
     ·检测各组织中的病毒载量第47-49页
     ·鸡体内的抗体水平第49页
   ·交叉血凝抑制试验第49页
   ·交叉中和反应第49-51页
第四章 讨论第51-55页
   ·APMV-1的分离与鉴定第51页
   ·不同来源的APMV-1的基因组分析第51-53页
   ·不同来源APMV-1的系统进化关系分析第53页
   ·天鹅源毒株对SPF鸡的致病性第53页
   ·APMV-1在鸡体内的抗体水平分析第53-54页
   ·APMV-1之间的交叉血凝抑制和交叉中和试验第54-55页
第五章 结论第55-56页
参考文献第56-62页
致谢第62-63页
作者简历第63页

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