RT-LAMP技术快速检测禽流感病毒的研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 引言 | 第13-37页 |
| 1. 禽流感的概述 | 第13-24页 |
| ·禽流感病毒的发现及流行历史 | 第13-14页 |
| ·禽流感病毒的分类及命名 | 第14-15页 |
| ·禽流感病毒粒子的结构特点 | 第15-17页 |
| ·禽流感病毒基因组的特点 | 第17页 |
| ·禽流感病毒基因组编码蛋白的结构与生物学功能 | 第17-20页 |
| ·禽流感病毒的复制与变异 | 第20-22页 |
| ·禽流感病毒的感染途径和传播方式 | 第22页 |
| ·H5亚型禽流感病毒的流行现状 | 第22-23页 |
| ·H7亚型禽流感病毒的流行现状 | 第23-24页 |
| 2. 禽流感病毒的诊断方法 | 第24-28页 |
| ·病毒的分离鉴定 | 第24页 |
| ·血清学诊断方法 | 第24页 |
| ·分子生物学诊断方法 | 第24-28页 |
| 3. 环介导等温扩增技术(LAMP) | 第28-35页 |
| ·LAMP概述 | 第28页 |
| ·LAMP技术反应原理 | 第28-31页 |
| ·LAMP引物的设计 | 第31-32页 |
| ·LAMP扩增产物的判断方法 | 第32-35页 |
| 4. 本课题的研究意义 | 第35-37页 |
| 材料方法 | 第37-49页 |
| 1. 实验材料 | 第37-38页 |
| ·病毒分离鉴定相关材料 | 第37页 |
| ·细胞实验相关材料 | 第37页 |
| ·RT-PCR实验相关材料 | 第37-38页 |
| ·RT-LAMP实验相关材料 | 第38页 |
| 2. 实验方法 | 第38-49页 |
| ·禽流感病毒在SPF鸡胚中的扩大培养 | 第38-39页 |
| ·血球凝集试验(HA) | 第39页 |
| ·TCID_(50)测定 | 第39-40页 |
| ·禽流感病毒的RNA提取 | 第40-41页 |
| ·禽流感病毒RNA的cDNA链合成 | 第41-42页 |
| ·禽流感病毒的PCR反应 | 第42页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳实验 | 第42-43页 |
| ·RT-LAMP引物的设计与稀释 | 第43-45页 |
| ·RT-LAMP引物有效性的验证 | 第45-46页 |
| ·RT-LAMP反应体系的优化 | 第46-47页 |
| ·RT-LAMP反应的特异性检测 | 第47页 |
| ·RT-LAMP反应的灵敏性检测 | 第47-48页 |
| ·RT-LAMP反应体系的稳定性研究 | 第48页 |
| ·RT-LAMP反应的临床样品检测 | 第48-49页 |
| 结果与分析 | 第49-59页 |
| 1. RT-LAMP反应的有效引物 | 第49-50页 |
| ·H5-RT-LAMP反应的有效引物 | 第49页 |
| ·H7-RT-LAMP反应的有效引物 | 第49-50页 |
| ·M-RT-LAMP反应的有效引物 | 第50页 |
| 2. AIV-RT-LAMP反应体系的优化结果 | 第50-52页 |
| ·H5-RT-LAMP的最优反应体系 | 第50-51页 |
| ·H7-RT-LAMP的最优反应体系 | 第51页 |
| ·M-RT-LAMP的最优反应体系 | 第51-52页 |
| 3 RT-LAMP反应的特异性检测结果 | 第52-54页 |
| ·H5-RT-LAMP试验的特异性检测结果 | 第52-53页 |
| ·H7-RT-LAMP试验的特异性检测结果 | 第53-54页 |
| ·M-RT-LAMP试验的特异性检测结果 | 第54页 |
| 4. RT-LAMP反应的灵敏性检测结果 | 第54-57页 |
| ·H5-RT-LAMP试验的灵敏性结果 | 第54-55页 |
| ·H7-RT-LAMP试验的灵敏性结果 | 第55-56页 |
| ·M-RT-LAMP试验的灵敏性结果 | 第56-57页 |
| 5. RT-LAMP反应体系的重复性验证结果 | 第57-58页 |
| ·H5-RT-LAMP反应体系的重复性验证 | 第57页 |
| ·H7-RT-LAMP反应体系的重复性验证 | 第57页 |
| ·M-RT-LAMP反应体系的重复性验证 | 第57-58页 |
| 6. RT-LAMP反应的临床样品检测结果 | 第58-59页 |
| ·H5-RT-LAMP试验的临床样品检测结果 | 第58页 |
| ·H7-RT-LAMP试验的临床样品检测结果 | 第58页 |
| ·M-RT-LAMP试验的临床样品检测结果 | 第58-59页 |
| 讨论 | 第59-63页 |
| 结论 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-79页 |
| 致谢 | 第79-81页 |
| 硕士期间发表论文 | 第81页 |
