| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一篇 人Ap_4A水解酶的结构生物学研究 | 第10-38页 |
| 第一章 综述：Ap_4A水解酶的研究进展 | 第10-18页 |
| ·Ap_nA的生物学功能 | 第10-11页 |
| ·Ap_4A代谢 | 第11-12页 |
| ·Ap_4A水解酶的研究进展 | 第12-18页 |
| ·Ap_4A水解酶的基本性质 | 第12-14页 |
| ·Ap_4A水解酶的结构研究进展 | 第14-18页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第18-23页 |
| ·实验材料与设备 | 第18-20页 |
| ·菌株、质粒、培养基和实验试剂 | 第18-19页 |
| ·实验仪器设备 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20-23页 |
| ·质粒构建 | 第20页 |
| ·目的蛋白的表达纯化 | 第20-21页 |
| ·结晶条件初筛和数据收集 | 第21-22页 |
| ·结构确定和修正 | 第22页 |
| ·序列分析和结构展示 | 第22-23页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第23-33页 |
| ·突变体E58A的表达纯化 | 第23-25页 |
| ·突变体E58A的晶体生长 | 第25-26页 |
| ·突变体E58A晶体和E58A-DPO晶体X-射线衍射数据的收集与处理 | 第26-29页 |
| ·人源Ap4A水解酶、突变体E58A和E58A-DPO晶体结构分析 | 第29-33页 |
| 本篇小结 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-38页 |
| 第二篇 嗜肺军团菌RpoS的克隆、表达、纯化及初步晶体学研究 | 第38-63页 |
| 第一章 研究背景概述 | 第38-48页 |
| ·嗜肺军团菌与军团病 | 第38-39页 |
| ·L.pneumophila感染宿主并在胞内增殖的生物学过程 | 第39-40页 |
| ·L.pneumophila RpoS的功能研究进展 | 第40-44页 |
| ·原核生物RNA聚合酶 | 第40-41页 |
| ·L.pneumophila RpoS的功能 | 第41-44页 |
| ·细菌RNAP启动子特异性σ亚基的结构分析 | 第44-47页 |
| ·研究L.Pneumophila RpoS的意义 | 第47-48页 |
| 第二章 实验方法、结果与分析 | 第48-58页 |
| ·实验材料与设备 | 第48页 |
| ·质粒构建 | 第48页 |
| ·蛋白表达与纯化 | 第48-53页 |
| ·小量检测目的蛋白是否表达 | 第48-49页 |
| ·目的蛋白大量表达和纯化 | 第49-53页 |
| ·RpoS结晶条件初筛 | 第53-54页 |
| ·RpoS结晶片段N-端测序 | 第54-56页 |
| ·RpoS晶体X-射线衍射数据的收集与处理 | 第56-57页 |
| ·后续研究计划 | 第57-58页 |
| 本篇小结 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 附录一 MutanBEST kit(TaKaRa,Japan)中的PCR方法 | 第63-64页 |
| 附录二 凝胶过滤层析柱(分子筛)处理和使用步骤 | 第64-65页 |
| 附录三 BCA法测蛋白浓度 | 第65-67页 |
| 附录四 硕士期间发表的论文 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
