| 中文摘要 | 第1-13页 |
| ABSTRACT | 第13-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-43页 |
| 引言 | 第15页 |
| 1.生物类黄酮的结构及功能分析 | 第15-32页 |
| ·生物类黄酮的结构及分布 | 第15-17页 |
| ·类黄酮的生理功能 | 第17-24页 |
| ·生物类黄酮的药用功效 | 第17-20页 |
| ·类黄酮具有清除自由基、抗氧化作用 | 第17-18页 |
| ·类黄酮具有抗血栓、保护心脑血管作用 | 第18页 |
| ·类黄酮具有抗癌抗肿瘤作用 | 第18-19页 |
| ·类黄酮具有消炎镇痛功效 | 第19页 |
| ·类黄酮具有调节免疫力的作用 | 第19-20页 |
| ·类黄酮的其他药用功效 | 第20页 |
| ·生物类黄酮的生理作用 | 第20-24页 |
| ·类黄酮可以作为信号分子 | 第20-21页 |
| ·类黄酮与植物的防御反应相关 | 第21-24页 |
| ·类黄酮的合成代谢途径 | 第24-29页 |
| ·基因调控引起类黄酮的积累 | 第24-25页 |
| ·能量代谢过程中类黄酮的合成 | 第25-27页 |
| ·在植物生长与防御相关的代谢中的物质交换 | 第27-28页 |
| ·UV 辐射引起类黄酮的积累 | 第28-29页 |
| ·类黄酮中的重要组分芦丁 | 第29-30页 |
| ·类黄酮中的重要组分槲皮素 | 第30-31页 |
| ·类黄酮中的重要组分咖啡酰奎尼酸 | 第31-32页 |
| 2.类黄酮的特异性调控因子 AtMyb12 的研究进展 | 第32-35页 |
| 3. 果实中的特异性启动子（E4, 2A12, PG）的研究进展 | 第35-38页 |
| ·番茄果实特异性启动子 E4 | 第35-36页 |
| ·番茄果实特异性启动子 2A12 | 第36页 |
| ·番茄果实特异性启动子 PG | 第36-37页 |
| ·番茄果实特异性启动子的应用 | 第37-38页 |
| 4.生物反应器的研究进展 | 第38-40页 |
| ·番茄作为生物反应器的研究进展 | 第39-40页 |
| ·烟草作为生物反应器的研究进展 | 第40页 |
| 5.激发子诱导植物防御反应 | 第40-42页 |
| ·植物激发子（内源激发子）的种类 | 第41-42页 |
| ·激发子引起的信号传导 | 第42页 |
| 6.本研究的目的和意义 | 第42-43页 |
| 第二章 高含类黄酮转基因植株的培育 | 第43-86页 |
| 1.材料与方法 | 第43-56页 |
| ·材料 | 第43-45页 |
| ·供试植物材料 | 第43页 |
| ·菌株和载体 | 第43页 |
| ·常用酶与生化试剂 | 第43页 |
| ·常用仪器 | 第43页 |
| ·溶液及培养基的配制 | 第43-45页 |
| ·实验方法 | 第45-56页 |
| ·PCR 引物设计 | 第45-47页 |
| ·总 RNA 的抽提 | 第47-48页 |
| ·RT-PCR | 第48页 |
| ·目的基因的克隆 | 第48-49页 |
| ·目的片段与质粒 DNA 的酶切 | 第49页 |
| ·载体去磷酸化 | 第49-50页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第50-51页 |
| ·序列测定 | 第51页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第51页 |
| ·热激转化大肠杆菌（DH5α） | 第51-52页 |
| ·电转化农杆菌感受态细胞（AGL I 或 LBA4404） | 第52页 |
| ·转化菌落的阳性鉴定 | 第52页 |
| ·质粒 DNA 的提取 | 第52-53页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第53页 |
| ·农杆菌介导的番茄遗传转化 | 第53页 |
| ·农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第53-54页 |
| ·植物总 DNA 的提取 | 第54页 |
| ·转基因植株的阳性检测 | 第54页 |
| ·样品制备、转基因烟草和番茄中类黄酮和咖啡酰奎尼酸含量测定 | 第54-55页 |
| ·转基因植株的基因表达量鉴定（qRT-PCR） | 第55-56页 |
| 2.结果与分析 | 第56-82页 |
| ·AtMYB12 基因植物表达载体的构建 | 第56-62页 |
| ·拟南芥 AtMYB12 基因 cDNA 的克隆 | 第56-57页 |
| ·果实特异性启动子 PG、2A12、E4 的克隆 | 第57-58页 |
| ·过渡载体 pX6-PG、pX6-2A12 和 pX6-E4 的构建 | 第58-59页 |
| ·番茄表达载体的构建 | 第59-61页 |
| ·番茄表达载体转化农杆菌（AGL1） | 第61-62页 |
| ·农杆菌介导的番茄遗传转化 | 第62-65页 |
| ·番茄果实类黄酮和咖啡酰奎尼酸含量 HPLC 分析 | 第65-70页 |
| ·烟草表达载体的构建 | 第70-77页 |
| ·烟草表达载体 pBin19::AtMYB11 的构建 | 第70-71页 |
| ·烟草表达载体的构建 | 第71-74页 |
| ·烟草表达载体转化农杆菌（LBA4404） | 第74-77页 |
| ·农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第77-80页 |
| ·烟草类黄酮含量 HPLC 分析 | 第80-82页 |
| 3 讨论 | 第82-85页 |
| ·拟南芥转录因子 AtMYB12 基因和 AtMYB11 基因参与调控类黄酮类物质的合成 | 第82-83页 |
| ·E4、PG、2A12 调控 AtMYB12 基因表达的能力弱于 E8 启动子 | 第83-84页 |
| ·AtMYB12 基因弱的上调表达未激活类黄酮合成下游基因的表达，而只引起柚皮素查尔酮的富集 | 第84页 |
| ·烟草中单独超量表达与咖啡酰奎尼酸合成相关的基因没有提高咖啡酰奎尼酸的含量 | 第84-85页 |
| 4 结论 | 第85-86页 |
| 第三章 转基因烟草对病害的抗性分析 | 第86-110页 |
| 1.材料与方法 | 第86-90页 |
| ·材料 | 第86-87页 |
| ·供试植物材料 | 第86页 |
| ·供试病原菌 | 第86页 |
| ·病原菌的培养和保存 | 第86-87页 |
| ·生化试剂 | 第87页 |
| ·常用仪器 | 第87页 |
| ·培养基的配制 | 第87页 |
| ·实验方法 | 第87-90页 |
| ·烟草次生代谢物的提取 | 第87页 |
| ·平板抑菌试验 | 第87-88页 |
| ·病原菌接种 | 第88-89页 |
| ·烟草总 RNA 的抽提 | 第89页 |
| ·RT-PCR | 第89页 |
| ·抗病相关基因表达量测定（qRT-PCR） | 第89页 |
| ·活性氧检测 | 第89页 |
| ·过氧化氢检测 | 第89页 |
| ·NO 检测 | 第89-90页 |
| ·接菌后叶片中孢子形态观察 | 第90页 |
| 2 结果与分析 | 第90-106页 |
| ·转基因烟草对多种病虫害提高了抗性 | 第90-102页 |
| ·转基因烟草中类黄酮类物质的测定 | 第90页 |
| ·转基因烟草抗虫效果检测 | 第90-92页 |
| ·转基因烟草对细菌病害的敏感性 | 第92-98页 |
| ·转基因烟草对真菌病害的敏感性 | 第98-100页 |
| ·转基因烟草对马铃薯 Y 病毒（PVY）的敏感性 | 第100-102页 |
| ·转基因番茄对番茄灰霉病的敏感性 | 第102页 |
| ·烟草提取物对病原菌生长的影响 | 第102-106页 |
| ·烟草提取物对山东青枯病菌生长的影响 | 第102-103页 |
| ·烟草提取物对真菌生长的影响 | 第103-106页 |
| 3.讨论 | 第106-109页 |
| ·AtMYB12 基因能够调控转基因烟草中芦丁的合成和积累 | 第106-107页 |
| ·芦丁含量提高的转基因烟草对多种病害表现抗性 | 第107页 |
| ·转基因烟草激发的抗病反应机制 | 第107-108页 |
| ·芦丁作为激发子诱导植物抗病性 | 第108-109页 |
| 4.结论 | 第109-110页 |
| 参考文献 | 第110-128页 |
| 致谢 | 第128-129页 |
| 附录Ⅰ | 第129-131页 |
| 附录Ⅱ | 第131-133页 |
| 附录Ⅲ | 第133-136页 |
| 附件 | 第136页 |
