摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
文献综述 | 第10-20页 |
第一章 microRNA研究进展 | 第10-16页 |
·miRNA的发现 | 第10页 |
·miRNA形成过程和作用机制 | 第10-12页 |
·miRNA的生物学特性 | 第12页 |
·miRNA的生物学功能 | 第12-16页 |
·miRNA与发育时序 | 第12页 |
·miRNA与胚胎发育 | 第12-13页 |
·miRNA与器官形成 | 第13-14页 |
·miRNA调节细胞增殖、分化和凋亡 | 第14页 |
·人类疾病 | 第14-16页 |
第二章 miRNA调节脂肪细胞分化和脂质代谢 | 第16-18页 |
·miRNA调节脂肪细胞分化 | 第16-17页 |
·miRNA调节脂质代谢 | 第17-18页 |
第三章 miR-128的研究进展 | 第18-20页 |
·miR-128的生物学信息 | 第18页 |
·miR-128a的生物学功能 | 第18-20页 |
·miR-128a参与神经瘤发育 | 第19页 |
·miR-128a参与肌侧群细胞的静息 | 第19-20页 |
实验研究 | 第20-45页 |
第四章 miR-128a腺病毒过表达载体的构建 | 第20-31页 |
·实验材料与方法 | 第20-26页 |
·实验动物与细胞 | 第20页 |
·实验仪器 | 第20页 |
·试剂和配方 | 第20页 |
·实验方法 | 第20-26页 |
·结果 | 第26-30页 |
·miR-128a序列的同源性比较 | 第26-27页 |
·构建pre-miR-128a腺病毒过表达载体 | 第27-29页 |
·腺病毒包装与扩繁 | 第29页 |
·miR-128a过表达效率检测 | 第29-30页 |
·讨论 | 第30-31页 |
第五章 过表达miR-128a对大鼠脂肪细胞分化的影响 | 第31-36页 |
·材料 | 第31页 |
·实验材料 | 第31页 |
·主要试剂和详细配方 | 第31页 |
·方法 | 第31-33页 |
·脂肪细胞分化过程中miR-128a的时序表达 | 第31页 |
·过表达miR-128a后成脂标志基因mRNA水平变化 | 第31-32页 |
·过表达miR-128a后成脂标记基因蛋白水平变化 | 第32页 |
·油红O染色 | 第32页 |
·统计学分析 | 第32-33页 |
·结果 | 第33-34页 |
·脂肪细胞分化过程中miR-128a的时序表达 | 第33页 |
·成脂标记基因mRNA表达变化 | 第33-34页 |
·成脂标记基因蛋白表达量变化 | 第34页 |
·油红O染色 | 第34页 |
·讨论 | 第34-36页 |
第六章 miR-128a靶基因预测及初步验证 | 第36-45页 |
·材料与方法 | 第37-40页 |
·生物信息学预测miRNA靶基因 | 第37页 |
·RNA提取和反转录PCR | 第37页 |
·靶基因3'UTR的扩增与回收 | 第37-38页 |
·PCR产物与T载体连接及测序 | 第38页 |
·靶基因与pGL-3 control载体的连接 | 第38-39页 |
·靶基因验证 | 第39-40页 |
·统计分析 | 第40页 |
·结果 | 第40-44页 |
·搜索miR-128a靶基因 | 第40-41页 |
·构建荧光素酶报告基因载体 | 第41-43页 |
·靶基因验证 | 第43-44页 |
·讨论 | 第44-45页 |
结论 | 第45页 |
创新点 | 第45页 |
有待进一步研究的问题 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-52页 |
附录 | 第52-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
作者简介 | 第66页 |