| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 第一章 综述 | 第13-25页 |
| ·前言 | 第13页 |
| ·叉头框转录因子2(Foxl2) | 第13-16页 |
| ·Foxl2基因概述 | 第13-14页 |
| ·Foxl2与脊椎动物的性别决定 | 第14-16页 |
| ·Foxl2基因在鱼类中的功能 | 第16页 |
| ·内分泌干扰物及其与Foxl2的关系 | 第16-21页 |
| ·内分泌干扰物概述 | 第16-17页 |
| ·内分泌干扰物的危害 | 第17-18页 |
| ·内分泌干扰物的作用机制 | 第18页 |
| ·内分泌干扰物对鱼类的影响 | 第18-19页 |
| ·内分泌干扰物与Foxl2的关系 | 第19-20页 |
| ·内分泌干扰物的筛选方法 | 第20-21页 |
| ·实验材料的选择 | 第21-24页 |
| ·本实验中用到的内分泌干扰物 | 第21-22页 |
| ·实验动物 | 第22-24页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
| 第二章 Foxl2基因cDNA全长的克隆及组织表达 | 第25-45页 |
| ·前言 | 第25页 |
| ·实验材料及试剂 | 第25-26页 |
| ·主要仪器 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·实验用鱼 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-36页 |
| ·总RNA的提取 | 第26页 |
| ·Foxl2基因中间片段克隆 | 第26-28页 |
| ·Foxl2基因cDNA末端序列的快速扩增 | 第28-33页 |
| ·Foxl2基因3’RACE克隆 | 第28-30页 |
| ·Foxl2 基因 5’RACE 克隆 | 第30-33页 |
| ·DNA片段的纯化回收 | 第33页 |
| ·连接反应 | 第33页 |
| ·连接产物的转化实验 | 第33-34页 |
| ·阳性克隆的筛选及测序 | 第34-35页 |
| ·测序结果的生物信息学分析 | 第35页 |
| ·Foxl2基因的组织表达 | 第35-36页 |
| ·结果与分析 | 第36-42页 |
| ·总RNA的检测 | 第36页 |
| ·稀有鮈鲫Foxl2基因全长cDNA的序列分析 | 第36-40页 |
| ·稀有鮈鲫Foxl2基因的组织表达 | 第40-42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| ·小结 | 第43-45页 |
| 第三章 EDCs对稀有鮈鲫幼鱼Foxl2基因mRNA表达的影响 | 第45-49页 |
| ·前言 | 第45页 |
| ·实验材料及试剂 | 第45页 |
| ·主要仪器 | 第45页 |
| ·主要试剂 | 第45页 |
| ·EDCs暴露实验 | 第45页 |
| ·实验方法 | 第45-46页 |
| ·总RNA的提取及其反转 | 第45-46页 |
| ·实时定量PCR | 第46页 |
| ·数据分析 | 第46页 |
| ·结果与分析 | 第46-47页 |
| ·雌二醇(EE2)对Foxl2基因表达的影响 | 第46-47页 |
| ·壬基酚(NP)对Foxl2基因表达的影响 | 第47页 |
| ·双酚A(BPA)对Foxl2基因表达的影响 | 第47页 |
| ·讨论 | 第47-48页 |
| ·小结 | 第48-49页 |
| 第四章 结论 | 第49-51页 |
| ·结论 | 第49页 |
| ·本研究的创新点 | 第49-50页 |
| ·展望 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 附录 | 第58-63页 |
| 附录1：实验试剂的配置方法 | 第58-59页 |
| 附录2：pMD18-T载体的结构及使用说明 | 第59页 |
| 附录3：3'RACE试剂盒(invitrogen)操作说明 | 第59-60页 |
| 附录4：5'RACE试剂盒(invitrogen)操作说明 | 第60-61页 |
| 附录5：DNA片段的纯化回收 | 第61页 |
| 附录6：感受态细胞的制备 | 第61-63页 |
| 缩略词 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-66页 |
| 作者简介 | 第66页 |
