小鼠精原干细胞长链非编码RNA鉴定及其功能的初步研究
| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-23页 |
| ·精原干细胞研究综述 | 第11-14页 |
| ·精原干细胞生物学 | 第11页 |
| ·精原干细胞研究内容 | 第11-13页 |
| ·精原干细胞的自我更新、增殖与分化 | 第13-14页 |
| ·精原干细胞的应用 | 第14页 |
| ·精原干细胞与非编码RNA | 第14页 |
| ·长链非编码RNA研究综述 | 第14-21页 |
| ·长链非编码RNA简介 | 第15页 |
| ·长链非编码RNA分类 | 第15-16页 |
| ·长链非编码RNA功能研究 | 第16-18页 |
| ·长链非编码RNA作用模式 | 第18-21页 |
| ·长链非编码RNA与疾病 | 第21页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第21-23页 |
| 第二章 长链非编码RNA的筛选与鉴定 | 第23-33页 |
| ·材料与方法 | 第23-25页 |
| ·试验材料 | 第23页 |
| ·试验试剂 | 第23-24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24页 |
| ·RNA提取 | 第24页 |
| ·反转录PCR | 第24-25页 |
| ·实时定量PCR | 第25页 |
| ·维甲酸体外诱导SSCs分化 | 第25页 |
| ·结果 | 第25-31页 |
| ·检测候选长链非编码RNA的表达 | 第25-28页 |
| ·AK005183生物信息学分析 | 第28-29页 |
| ·AK005183在不同组织中的表达检测 | 第29页 |
| ·AK005183在不同睾丸发育阶段中的表达检测 | 第29-30页 |
| ·维甲酸诱导分化过程中AK005183表达变化 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31-32页 |
| ·在睾丸中表达的lncRNA | 第31页 |
| ·与AK005183的同源的转录本 | 第31页 |
| ·GDNF对SSCs中AK005183表达的影响 | 第31-32页 |
| ·维甲酸诱导干细胞分化 | 第32页 |
| ·小结 | 第32-33页 |
| 第三章 AK005183干扰载体构建及慢病毒包装 | 第33-44页 |
| ·材料与方法 | 第33-37页 |
| ·试验材料 | 第33页 |
| ·慢病毒系统 | 第33页 |
| ·试验试剂 | 第33页 |
| ·慢病毒载体构建 | 第33-37页 |
| ·shRNA干扰效果鉴定 | 第37页 |
| ·慢病毒包装 | 第37页 |
| ·慢病毒滴度测定 | 第37页 |
| ·结果 | 第37-41页 |
| ·成功构建AK005183及对照的干扰载体 | 第37-40页 |
| ·成功筛选出一个干扰效果好的载体 | 第40页 |
| ·成功包装慢病毒并测定其滴度 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| ·shRNA序列的设计与筛选 | 第41页 |
| ·干扰序列效果检测 | 第41-42页 |
| ·慢病毒包装系统 | 第42页 |
| ·慢病毒滴度测定 | 第42-43页 |
| ·长链非编码RNA的干扰方法 | 第43页 |
| ·小结 | 第43-44页 |
| 第四章 AK005183的功能研究 | 第44-49页 |
| ·材料与方法 | 第44-45页 |
| ·试验材料 | 第44页 |
| ·试验试剂 | 第44页 |
| ·细胞增殖检测 | 第44页 |
| ·RNA提取,反转录,PCR,实时定量PCR | 第44页 |
| ·病毒转导流程 | 第44-45页 |
| ·结果 | 第45-47页 |
| ·AK005183干扰效果检测 | 第45-46页 |
| ·细胞增殖检测 | 第46-47页 |
| ·功能基因检测 | 第47页 |
| ·讨论 | 第47-48页 |
| ·BrdU检测细胞增殖 | 第47页 |
| ·与SSCs自我更新、增殖与分化相关的基因 | 第47-48页 |
| ·AK005183与干细胞自我更新 | 第48页 |
| ·小结 | 第48-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-57页 |
| 缩略词表 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简介 | 第59页 |
