| 摘要 | 第1-10页 |
| 文献综述 | 第10-17页 |
| 1 犬细小病毒 | 第10-11页 |
| ·病原性 | 第10页 |
| ·临床症状与病理变化 | 第10-11页 |
| ·诊断、预防及治疗 | 第11页 |
| 2 羊驼抗体结构及研究意义 | 第11-15页 |
| ·一般抗体的分子结构特征 | 第11-12页 |
| ·羊驼重链抗体的分子结构特征 | 第12-14页 |
| ·单域抗体 | 第14页 |
| ·VHH抗体的优势 | 第14页 |
| ·VHH抗体的应用 | 第14-15页 |
| 3 噬菌体展示技术 | 第15-17页 |
| ·噬菌体展示技术原理 | 第15页 |
| ·噬菌体展示系统种类 | 第15页 |
| ·M13噬菌体展示技术系统 | 第15-17页 |
| 实验材料 | 第17-20页 |
| ·材料 | 第17页 |
| ·质粒、菌株与酶类 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17页 |
| ·主要药物 | 第17页 |
| ·培养基、缓冲液与试剂配制 | 第17-18页 |
| ·SDS-PAGE电泳试剂配制 | 第18-19页 |
| ·Western-blot试剂配制 | 第19页 |
| ·引物 | 第19页 |
| ·主要仪器 | 第19-20页 |
| 实验方法 | 第20-27页 |
| 1 噬菌体抗体库复苏 | 第20-21页 |
| ·大肠杆菌TG_1活化 | 第20页 |
| ·噬菌体抗体库复苏 | 第20-21页 |
| ·噬菌体抗体库滴度测定 | 第20-21页 |
| ·抗体库阳性率检测 | 第21页 |
| 2 特异性抗体库富集与筛选 | 第21-22页 |
| 3 犬细小病毒单域抗体诱导表达 | 第22-24页 |
| ·E.coli HB2151感受态细胞制备(CaCl_2法) | 第22-23页 |
| ·pCANTAB5E-VHH-HB2151制备及鉴定 | 第23页 |
| ·pCANTAB-5E-VHH噬菌粒提取鉴定 | 第23页 |
| ·Sfi Ⅰ/Not Ⅰ双酶切pCANTAB-5E-VHH噬菌粒鉴定 | 第23页 |
| ·pCANTAB-5E-VHH菌液PCR鉴定 | 第23-24页 |
| ·犬细小病毒单域抗体诱导表达及初步鉴定 | 第24页 |
| 4 犬细小病毒单域抗体生物活性检测 | 第24-26页 |
| ·犬细小病毒单域抗体western-blot检测 | 第24-25页 |
| ·犬细小病毒单域抗体活性检测 | 第25页 |
| ·犬细小病毒单域抗体灵敏度检测 | 第25-26页 |
| 5 犬细小病毒单域抗体对犬细小病的治疗作用观察 | 第26-27页 |
| ·犬细小病毒毒液 | 第26页 |
| ·犬细小病毒单域抗体分装与保存 | 第26页 |
| ·动物分组及治疗 | 第26页 |
| ·第一组常规治疗方法 | 第26页 |
| ·第二组犬细小病毒单域抗体治疗 | 第26页 |
| ·临床观察 | 第26-27页 |
| 实验结果与分析 | 第27-38页 |
| 1 噬菌体抗体库复苏 | 第27-28页 |
| ·大肠杆菌TG_1活化 | 第27页 |
| ·噬菌体抗体库复苏 | 第27页 |
| ·抗体库阳性率检测 | 第27-28页 |
| 2 特异性抗体库富集与筛选 | 第28-31页 |
| ·噬菌体抗体库五次富集 | 第28-30页 |
| ·抗体库五次富集库容比较 | 第30页 |
| ·抗体库第五次富集后阳性率检测 | 第30-31页 |
| ·犬细小病毒单域抗体基因序列分析 | 第31页 |
| 3 犬细小病毒单域抗体诱导表达 | 第31-33页 |
| ·5E-VHH-HB2151制备及鉴定 | 第31-32页 |
| ·犬细小病毒单域抗体在HB2151菌中诱导表达 | 第32-33页 |
| 4 犬细小病毒单域抗体生物活性检测 | 第33-35页 |
| ·犬细小病毒单域抗体western-blot检测 | 第33-34页 |
| ·犬细小病毒单域抗体活性和灵敏性检测 | 第34-35页 |
| 5 犬细小病毒单域抗体对犬细小病的治疗作用观察 | 第35-38页 |
| ·犬细小病毒单域抗体分装与保存 | 第35-36页 |
| ·实验动物临床观察与治疗 | 第36页 |
| ·费用预算 | 第36-38页 |
| 讨论 | 第38-43页 |
| 1 单域抗体及其制备 | 第38-39页 |
| 2 噬菌体抗体库技术 | 第39-40页 |
| 3 犬细小病毒病治疗 | 第40-41页 |
| 4 诱导表达载体和宿主菌选择 | 第41-43页 |
| 全文结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-50页 |
| Abstract | 第50-52页 |
| 附录1 | 第52-53页 |
| 附录2 | 第53-54页 |
| 附录3 | 第54-56页 |
| 研究生期间发表的论文 | 第56-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
