摘要 | 第1-9页 |
文献综述 | 第9-18页 |
1 PRRS概述 | 第9-12页 |
·PRRS的发现与流行 | 第9-10页 |
·PRRSV主要结构和功能蛋白 | 第10-11页 |
·PRRSV诱导细胞凋亡 | 第11-12页 |
2 传统中草药是研发抗病毒药物的重要来源 | 第12-14页 |
·具有抗病毒作用的中药提取物 | 第12-13页 |
·具有抗病毒作用的天然化合物 | 第13页 |
·具有抗PRRSV作用的潜在药物 | 第13-14页 |
3 中药抗病毒作用机制 | 第14-18页 |
·直接抗病毒作用 | 第15-16页 |
·直接杀灭病毒 | 第15页 |
·阻止病毒对宿主细胞的吸附和穿入 | 第15-16页 |
·抑制病毒的复制 | 第16页 |
·抑制病毒的装配和释放 | 第16页 |
·间接抗病毒作用 | 第16-17页 |
·作为免疫调节剂 | 第16-17页 |
·干扰细胞凋亡 | 第17页 |
·多途径共同作用 | 第17-18页 |
前言 | 第18-19页 |
试验部分 | 第19-44页 |
1 试验材料 | 第19-22页 |
·主要试剂 | 第19页 |
·试剂配制 | 第19-20页 |
·试验仪器 | 第20-21页 |
·试验药物 | 第21-22页 |
2 试验方法 | 第22-28页 |
·Marc-145细胞 | 第22-23页 |
·来源 | 第22页 |
·Marc-145细胞传代培养 | 第22-23页 |
·Marc-145细胞冻存 | 第23页 |
·Marc-145细胞复苏 | 第23页 |
·PRRSV | 第23页 |
·来源 | 第23页 |
·PRRSV扩增 | 第23页 |
·PRRSV收获 | 第23页 |
·PRRSV的间接免疫荧光检测(IFA) | 第23-24页 |
·病毒毒力的测定 | 第24页 |
·药物的细胞毒性测定 | 第24-25页 |
·药物对PRRSV感染细胞的抑制作用 | 第25页 |
·药物对PRRSV复制的影响 | 第25页 |
·药物对PRRSV吸附的影响 | 第25-26页 |
·药物对PRRSV的直接灭活作用 | 第26页 |
·药物对PRRSV诱导的细胞凋亡的影响 | 第26页 |
·药物对Caspase-3作用的测定 | 第26-28页 |
·蛋白样品的制备和浓度测定 | 第26-27页 |
·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第27页 |
·转膜 | 第27-28页 |
·丽春红染色和封闭 | 第28页 |
·一抗孵育 | 第28页 |
·抗孵育 | 第28页 |
·蛋白检测 | 第28页 |
·数据统计分析 | 第28页 |
3 结果 | 第28-39页 |
·PRRSV的IFA鉴定结果 | 第28-29页 |
·病毒毒力测定结果 | 第29页 |
·药物的细胞毒性试验结果 | 第29-31页 |
·药物的抗病毒试验结果 | 第31-32页 |
·药物对病毒复制阻断作用的测定结果 | 第32-33页 |
·药物对病毒吸附阻断作用的测定结果 | 第33页 |
·药物对病毒直接灭活作用的测定结果 | 第33-34页 |
·Annexin V-EGFP细胞凋亡检测结果 | 第34-38页 |
·Western blot检测caspase-3活化结果 | 第38-39页 |
4 分析与讨论 | 第39-43页 |
·体外筛选出3种化合物具有抗PRRSV作用 | 第39-41页 |
·药物抑制PRRSV的作用方式 | 第41-42页 |
·DG、MT和STS对PRRSV复制的影响 | 第41页 |
·DG、MT和STS对PRRSV吸附的影响 | 第41-42页 |
·DG、MT和STS对PRRSV直接灭活的影响 | 第42页 |
·DG、MT和STS对PRRSV诱导的细胞凋亡的影响 | 第42-43页 |
5 结论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-51页 |
Abstract | 第51-53页 |
附录 | 第53-55页 |
致谢 | 第55页 |