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抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)天然化合物的体外筛选及其抗病毒机制研究

摘要第1-9页
文献综述第9-18页
 1 PRRS概述第9-12页
   ·PRRS的发现与流行第9-10页
   ·PRRSV主要结构和功能蛋白第10-11页
   ·PRRSV诱导细胞凋亡第11-12页
 2 传统中草药是研发抗病毒药物的重要来源第12-14页
   ·具有抗病毒作用的中药提取物第12-13页
   ·具有抗病毒作用的天然化合物第13页
   ·具有抗PRRSV作用的潜在药物第13-14页
 3 中药抗病毒作用机制第14-18页
   ·直接抗病毒作用第15-16页
     ·直接杀灭病毒第15页
     ·阻止病毒对宿主细胞的吸附和穿入第15-16页
     ·抑制病毒的复制第16页
     ·抑制病毒的装配和释放第16页
   ·间接抗病毒作用第16-17页
     ·作为免疫调节剂第16-17页
     ·干扰细胞凋亡第17页
   ·多途径共同作用第17-18页
前言第18-19页
试验部分第19-44页
 1 试验材料第19-22页
   ·主要试剂第19页
   ·试剂配制第19-20页
   ·试验仪器第20-21页
   ·试验药物第21-22页
 2 试验方法第22-28页
   ·Marc-145细胞第22-23页
     ·来源第22页
     ·Marc-145细胞传代培养第22-23页
     ·Marc-145细胞冻存第23页
     ·Marc-145细胞复苏第23页
   ·PRRSV第23页
     ·来源第23页
     ·PRRSV扩增第23页
     ·PRRSV收获第23页
   ·PRRSV的间接免疫荧光检测(IFA)第23-24页
   ·病毒毒力的测定第24页
   ·药物的细胞毒性测定第24-25页
   ·药物对PRRSV感染细胞的抑制作用第25页
   ·药物对PRRSV复制的影响第25页
   ·药物对PRRSV吸附的影响第25-26页
   ·药物对PRRSV的直接灭活作用第26页
   ·药物对PRRSV诱导的细胞凋亡的影响第26页
   ·药物对Caspase-3作用的测定第26-28页
     ·蛋白样品的制备和浓度测定第26-27页
     ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第27页
     ·转膜第27-28页
     ·丽春红染色和封闭第28页
     ·一抗孵育第28页
     ·抗孵育第28页
     ·蛋白检测第28页
   ·数据统计分析第28页
 3 结果第28-39页
   ·PRRSV的IFA鉴定结果第28-29页
   ·病毒毒力测定结果第29页
   ·药物的细胞毒性试验结果第29-31页
   ·药物的抗病毒试验结果第31-32页
   ·药物对病毒复制阻断作用的测定结果第32-33页
   ·药物对病毒吸附阻断作用的测定结果第33页
   ·药物对病毒直接灭活作用的测定结果第33-34页
   ·Annexin V-EGFP细胞凋亡检测结果第34-38页
   ·Western blot检测caspase-3活化结果第38-39页
 4 分析与讨论第39-43页
   ·体外筛选出3种化合物具有抗PRRSV作用第39-41页
   ·药物抑制PRRSV的作用方式第41-42页
     ·DG、MT和STS对PRRSV复制的影响第41页
     ·DG、MT和STS对PRRSV吸附的影响第41-42页
     ·DG、MT和STS对PRRSV直接灭活的影响第42页
   ·DG、MT和STS对PRRSV诱导的细胞凋亡的影响第42-43页
 5 结论第43-44页
参考文献第44-51页
Abstract第51-53页
附录第53-55页
致谢第55页

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