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氟对小鼠精子趋化性的影响及其机制研究

摘要第1-8页
前言第8-11页
1. 试验材料第11-13页
   ·试验动物第11页
   ·主要试剂与耗材第11-12页
   ·主要仪器设备第12-13页
2. 试验方法第13-23页
   ·试验动物模型的建立第13-15页
     ·小鼠生长发育状况的观测第13页
     ·小鼠日摄氟量及股骨氟含量的测定第13页
     ·相关脏器系数的测定第13页
     ·小鼠精液品质的测定第13-14页
     ·小鼠睾丸组织形态学观察第14-15页
   ·精子趋化性检测第15-17页
     ·微流控芯片的处理第16页
     ·卵丘细胞的制备第16页
     ·小鼠精子的制备第16-17页
     ·检测精子趋化性第17页
     ·试验数据的采集第17页
   ·精子中Ca~(2+)浓度的测定第17-18页
     ·Fura-2 AM检测Ca~(2+)浓度的原理第17-18页
     ·测定步骤第18页
     ·荧光测定第18页
   ·腺苷酸环化酶(adenylate cyclase,AC)含量的测定第18-19页
     ·精子总蛋白的提取第18页
     ·增强型BCA试剂盒测定精子的总蛋白浓度第18-19页
     ·ELSA试剂盒检测精子中腺苷酸环化酶(AC)的含量第19页
   ·与小鼠精子趋化性功能相关的基因表达检测第19-23页
     ·小鼠精子总RNA的提取第19-20页
     ·精子总RNA的质量鉴定第20页
     ·小鼠精子趋化性功能相关基因引物设计第20-21页
     ·Real-time PCR反应体系的建立第21-22页
     ·Real-time PCR扩增条件的建立第22页
     ·标准曲线制备第22页
     ·PCR产物的鉴定第22-23页
     ·数据处理第23页
3. 试验数据统计与分析第23页
4. 试验结果第23-35页
   ·小鼠生长发育状况的测定结果第23-24页
   ·小鼠日均摄氟量及股骨氟含量的测定结果第24-25页
   ·小鼠主要脏器系数的测定结果第25-26页
   ·小鼠精液品质的测定结果第26页
   ·氟对雄性小鼠睾丸组织结构的影响第26-27页
   ·精子趋化性检测的试验结果第27-28页
   ·小鼠精子中Ca~(2+)浓度的测定结果第28-29页
   ·小鼠精子中腺苷酸环化酶(AC)含量的测定结果第29页
   ·氟对小鼠精子中相关基因表达的影响第29-35页
     ·小鼠精子总RNA的提取结果第29-30页
     ·标准曲线的建立第30-31页
     ·内参及目的基因的QRT-PCR扩增动力学曲线及溶解曲线第31-33页
     ·各目的基因扩增产物的鉴定结果第33-34页
     ·各目的基因mRNA表达结果第34-35页
5. 分析与讨论第35-42页
   ·试验动物模型的建立第35-37页
     ·小鼠的日均饮水量及摄氟量第35-36页
     ·氟对小鼠体重及主要脏器系数的影响第36页
     ·氟对小鼠精液品质的影响第36-37页
     ·氟对雄性小鼠睾丸组织结构的影响第37页
   ·氟对小鼠精子趋化性功能的影响第37-39页
     ·趋化物质的选择第37-38页
     ·趋化性检测第38-39页
   ·氟对小鼠精子趋化性功能影响的分子机理第39-42页
     ·精子趋化性功能的分子机理第39页
     ·氟对小鼠精子中Ca~(2+)浓度及腺苷酸环化酶(AC)含量的影响第39-40页
     ·氟对小鼠精子趋化性功能相关基因的影响第40-42页
全文结论第42-43页
参考文献第43-48页
Abstract第48-50页
致谢第50页

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