| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-19页 |
| ·微生物油脂 | 第9-10页 |
| ·微生物油脂在食用油中的应用 | 第9-10页 |
| ·微生物油脂在生物柴油中的应用 | 第10页 |
| ·油脂合成中的还原力来源酶 | 第10-13页 |
| ·油脂合成中还原力 NADPH 的来源酶 | 第10-12页 |
| ·NADH 作为脂肪酸合成中还原力来源的可能性 | 第12-13页 |
| ·大肠杆菌脂肪酸代谢 | 第13-17页 |
| ·大肠杆菌脂肪酸的合成 | 第13页 |
| ·大肠杆菌脂肪酸的降解 | 第13-15页 |
| ·大肠杆菌中不饱和脂肪酸及环丙烷脂肪酸的合成 | 第15页 |
| ·大肠杆菌脂肪酸代谢的调控 | 第15-16页 |
| ·大肠杆菌的硫酯酶 I | 第16页 |
| ·提高大肠杆菌脂肪酸产量的相关研究 | 第16-17页 |
| ·课题研究意义与内容 | 第17-19页 |
| ·本课题的研究意义 | 第17页 |
| ·本课题的主要研究内容 | 第17-19页 |
| 第二章 材料与方法 | 第19-30页 |
| ·实验材料 | 第19-23页 |
| ·质粒与菌株 | 第19页 |
| ·工具酶与试剂 | 第19-20页 |
| ·培养基 | 第20-21页 |
| ·常用溶液的配制 | 第21-22页 |
| ·主要仪器与设备 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-30页 |
| ·引物设计与目的片段的扩增 | 第23页 |
| ·分子克隆相关实验 | 第23-25页 |
| ·大肠杆菌重组菌株的摇瓶培养 | 第25页 |
| ·摇瓶培养菌体的收集和处理 | 第25-26页 |
| ·SDS-PAGE 蛋白质凝胶电泳 | 第26-27页 |
| ·还原力产生酶的活性检测 | 第27-28页 |
| ·脂肪酸的提取与分析 | 第28-29页 |
| ·统计学分析 | 第29-30页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第30-49页 |
| ·还原力产生酶基因的克隆及其重组载体的构建 | 第30-32页 |
| ·还原力产生酶基因的 PCR 扩增 | 第30页 |
| ·用于过表达还原力产生酶的重组载体的构建 | 第30-32页 |
| ·过表达还原力产生酶对大肠杆菌 BL21 脂肪酸合成的影响 | 第32-41页 |
| ·以大肠杆菌 BL21 为宿主的还原力产生酶过表达菌株的构建 | 第32-33页 |
| ·IPTG 对大肠杆菌 ZY1 脂肪酸产量的影响 | 第33页 |
| ·重组菌株蛋白质表达的 SDS-PAGE 分析 | 第33-35页 |
| ·重组菌株中还原力产生酶的活性分析 | 第35页 |
| ·重组菌株的脂质分析 | 第35-38页 |
| ·底物添加对重组菌株脂肪酸产量的影响 | 第38-40页 |
| ·本节讨论 | 第40-41页 |
| ·过表达还原力产生酶对大肠杆菌 BL21△fadE/pTE 脂肪酸合成的影响 | 第41-49页 |
| ·‘tesA 基因的克隆及其重组载体的构建 | 第41-43页 |
| ·以大肠杆菌 BL21△fadE/pTE 为宿主的还原力产生酶过表达菌株的构建 | 第43-44页 |
| ·重组菌株蛋白质表达的 SDS-PAGE 分析 | 第44-45页 |
| ·重组菌株中还原力产生酶的活性分析 | 第45页 |
| ·重组菌株的脂质分析 | 第45-48页 |
| ·本节讨论 | 第48-49页 |
| 主要结论与展望 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-54页 |
| 附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第54页 |