摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
符号及缩略语等的说明 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-34页 |
1 菊芋的研究进展 | 第12-14页 |
·菊芋的概况 | 第12-13页 |
·菊芋的开发利用 | 第13-14页 |
·我国的菊芋开发现状 | 第14页 |
2 菊粉酶 | 第14-22页 |
·微生物产菊粉酶 | 第15-17页 |
·菊粉酶的性质 | 第17-19页 |
·菊粉酶应用 | 第19-20页 |
·菊粉酶基因的克隆表达与性质 | 第20-22页 |
3 巴斯德毕赤酵母表达系统 | 第22-25页 |
4 生物质乙醇 | 第25-32页 |
·生物质乙醇国内外产业发展概况 | 第26-28页 |
·乙醇生产技术 | 第28-29页 |
·酿酒酵母的代谢工程 | 第29-30页 |
·利用菊芋生产乙醇的研究进展 | 第30-32页 |
5 本论文的研究内容和意义 | 第32-34页 |
第二章 微紫青霉外切菊粉酶基因的克隆 | 第34-54页 |
1 材料与方法 | 第34-40页 |
·质粒和菌株 | 第34-35页 |
·培养基与试剂 | 第35-36页 |
·方法 | 第36-40页 |
2 结果与分析 | 第40-53页 |
·青霉的分子生物学鉴定结果 | 第40页 |
·微紫青霉中外切菊粉酶基因保守区的扩增 | 第40-44页 |
·RACE-PCR扩增微紫青霉的外切菊粉酶基因(inuA1)的全长 | 第44-46页 |
·微紫青霉外切菊粉酶基因序列分析 | 第46-52页 |
·外切菊粉酶的内含子分析 | 第52-53页 |
3 本章小结 | 第53-54页 |
第三章 外切菊粉酶基因的表达及性质的研究 | 第54-80页 |
1 材料和方法 | 第55-64页 |
·材料 | 第55-58页 |
·方法 | 第58-64页 |
2 结果与讨论 | 第64-78页 |
·表达载体的构建 | 第64-67页 |
·DNA转化至毕赤酵母X33 | 第67-68页 |
·菊粉酶基因在毕赤酵母中的诱导表达 | 第68-71页 |
·菊粉酶的纯化 | 第71-72页 |
·纯化蛋白的鉴定 | 第72-74页 |
·纯化的重组菊粉酶的性质 | 第74-78页 |
·纯化的重组菊粉酶对菊粉的水解作用 | 第78页 |
3 本章小结 | 第78-80页 |
第四章 菊粉乙醇发酵工程菌株的构建及其乙醇发酵初探 | 第80-104页 |
1 材料和方法 | 第81-88页 |
·材料 | 第81-83页 |
·方法 | 第83-88页 |
2 结果与讨论 | 第88-101页 |
·表达载体pUG-PICS的构建 | 第88-92页 |
·菊粉酶基因在S.cerevisiae 6525中的表达 | 第92-94页 |
·菊粉酶基因在S.cerevisiae 2805和BY4741中的表达 | 第94-96页 |
·重组子产酶与时间的关系 | 第96-98页 |
·重组子BR8直接利用菊粉生产乙醇 | 第98页 |
·重组子AR34和R5协同酿酒酵母6525利用菊粉生产乙醇 | 第98-100页 |
·利用发酵罐发酵乙醇 | 第100-101页 |
3 本章总结 | 第101-104页 |
全文总结 | 第104-108页 |
1 全文结论 | 第104-105页 |
2 创新点 | 第105页 |
3 展望 | 第105-108页 |
参考文献 | 第108-122页 |
附录 | 第122-126页 |
致谢 | 第126-128页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第128页 |