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表达H5N1血凝素HAl重组乳酸菌的构建及其免疫效力的研究

摘要第1-13页
ABSTRACT第13-17页
引言第17-19页
第一篇 文献综述第19-47页
 第一章 高致病性禽流感的研究进展第19-27页
  1 禽流感病毒的结构与特性第19-20页
   ·禽流感病毒的形态和结构第19-20页
   ·禽流感病毒的分类与类型第20页
  2 禽流感病毒主要蛋白的功能及其免疫原性第20-22页
   ·血凝素蛋白HA第20-21页
   ·神经氨酸酶NA第21页
   ·基质蛋白M2第21-22页
   ·核衣壳蛋白NP第22页
  3 H5N1高致病性禽流感疫苗的进展第22-27页
   ·全病毒灭活疫苗第22-23页
   ·亚单位疫苗第23页
   ·核酸疫苗第23-24页
   ·基因重组活载体疫苗第24-27页
 第二章 以乳酸菌为递送载体黏膜免疫的研究进展第27-38页
  1 黏膜免疫的机理研究第27-32页
   ·黏膜免疫相关淋巴组织第27-29页
   ·淋巴细胞归巢第29-30页
   ·家禽黏膜相关淋巴组织的特点第30-32页
  2 乳酸菌递送载体的研究现状第32-38页
   ·不同种属的乳酸菌活疫苗递送载体第32-34页
   ·外源抗原蛋白的表达类型第34-36页
   ·乳酸菌诱导机体免疫反应的机制第36-38页
 参考文献第38-47页
第二篇 试验研究第47-115页
 第一章 鸡源乳酸菌的分离与鉴定第47-63页
  摘要第47页
  前言第47-48页
  1 材料与方法第48-53页
   ·材料与试剂第48-50页
   ·菌株的分离与纯化第50页
   ·菌株的形态和生化鉴定第50页
   ·菌株粘附定植能力的鉴定第50-51页
   ·耐酸性能试验第51页
   ·菌株抗生素敏感试验第51页
   ·乳酸菌属种的分子生物学验证第51-52页
   ·受体乳酸菌菌株的筛选第52-53页
  2 结果第53-58页
   ·菌株的形态与结构第53-54页
   ·乳酸菌生化鉴定第54页
   ·乳酸菌粘附定植性的检测第54页
   ·乳酸菌耐酸性的检测第54-55页
   ·乳酸菌抗生素敏感性的检测第55页
   ·乳酸菌种属的分子鉴定第55-56页
   ·乳酸菌受体菌株的筛选第56-58页
  3 讨论第58-60页
  参考文献第60-63页
 第二章 表达H5N1血凝素重组乳酸菌的构建及其验证第63-67页
  摘要第63页
  前言第63-64页
  1 材料与方法第64-67页
   ·材料第64-66页
   ·禽流感病毒血凝素HA1目的片段的克隆第66页
   ·重组表达质粒pMG36E-H的构建与验证第66-67页
   ·重组乳酸乳球菌的获得与验证第67页
   ·重组乳酸乳球菌外源蛋白的表达第67页
   ·表达产物的鉴定及其抗原性的检测第67页
 2 表达H5N1血凝素重组乳酸乳球菌构建的试验结果第67-81页
   ·PCR扩增血凝素部分基因片段第67-68页
   ·重组表达质粒的验证第68页
   ·重组乳酸乳球菌的验证第68-69页
   ·目的蛋白的表达检测第69页
   ·重组蛋白的Western-blot分析第69-70页
  3 表达H5N1血凝素重组乳酸杆菌的构建第70-73页
   ·乳酸脱氢酶启动子P和H5N1血凝素HA1目的片段的获得第70-71页
   ·重组型表达质粒pLEM415-PHA1的构建第71页
   ·重组型表达质粒pLEM415-PHA1的验证第71-72页
   ·重组高致病性禽流感血凝素乳酸菌的获得第72页
   ·重组血凝素乳酸菌SDS-PAGE和Western-blot验证第72-73页
  4 讨论第73-76页
  参考文献第76-81页
 第三章 口服三株重组乳酸菌对小鼠免疫功能的研究第81-95页
  摘要第81页
  前言第81-82页
  1 材料与方法第82-85页
   ·试验材料第82-83页
   ·试验小鼠分组及免疫第83页
   ·气管、肠道涮洗液中特异性IgA测定第83页
   ·免疫小鼠血清HI滴度测定第83-84页
   ·免疫小鼠血清中特异性抗体IgG的测定第84页
   ·脾淋巴细胞的CD4~+、CD8~+、CD19~+细胞亚群的分析第84页
   ·脾淋巴细胞增殖试验第84-85页
  2 试验结果第85-89页
   ·肠道、气管特异性IgA抗体水平第85页
   ·血清特异性IgG抗体水平第85-86页
   ·CD4~+/CD8~+、CD19~+淋巴细胞第86-87页
   ·脾淋巴细胞增殖指数第87-88页
   ·脾淋巴细胞细胞因子IL-4和IFN-γ分泌水平第88-89页
  3 讨论第89-91页
  参考文献第91-95页
 第四章 重组鸡源乳杆菌DLD17-PH口服免疫雏鸡效果的研究第95-115页
  摘要第95页
  前言第95-96页
  1 材料与方法第96-101页
   ·试验材料第96页
   ·试验设计第96-97页
   ·试验方法第97-100页
   ·数据处理第100-101页
  2 结果第101-107页
   ·血清中HI效价的变化第101页
   ·血清中禽流感特异性IgG抗体水平的变化第101-102页
   ·局部组织中气管涮洗液特异性IgA抗体水平第102-103页
   ·局部组织中盲肠涮洗液特异性IgA抗体水平第103页
   ·黏膜局部组织中细胞因子表达量的变化第103-104页
   ·黏膜局部组织中细胞因子表达量的变化第104-105页
   ·黏膜局部组织内模式识别受体TLR-2表达量的变化第105页
   ·黏膜局部组织内防御素AvBD-9表达量的变化第105-106页
   ·鸡源乳杆菌DLD17和DLD17-pH在盲肠黏膜和内容物中数量的变化第106-107页
  3 结论第107-110页
  参考文献第110-115页
全文结论第115-117页
本文创新点第117-119页
论文发表情况第119-121页
致谢第121页

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