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貂阿留申病病毒流行毒株分子特征及其VP2基因重组杆状病毒免疫特性研究

摘要第1-11页
ABSTRACT第11-15页
第一部分 文献综述第15-39页
 第一章 貂阿留申病病毒及其检测方法研究进展第15-39页
  1 ADV病原学第15-17页
   ·ADV的分类地位第15-16页
   ·ADV的形态及理化性质第16页
   ·ADV的培养第16-17页
   ·ADV株间差异与致病性第17页
   ·ADV的毒株分型第17页
  2 ADV的分子生物学特性第17-24页
   ·ADV的基因组结构和复制特点第17-18页
   ·ADV的转录和复制第18-20页
   ·ADV基因组编码蛋白及功能第20-23页
   ·ADV基因的表达调控第23-24页
  3 貂阿留申病概述第24-30页
   ·AD流行病学第24-25页
   ·ADV致病机理第25页
   ·临床症状及病理变化第25-26页
   ·实验室诊断第26-29页
   ·AD的防制第29-30页
  4 本研究背景及意义第30-32页
  参考文献第32-39页
第二部分 研究内容第39-129页
 第二章 中国貂阿留申病病毒的分离与鉴定第39-51页
  摘要第39页
  1 材料与方法第39-43页
   ·主要试剂第39-40页
   ·细胞与培养基第40页
   ·实验动物第40页
   ·仪器第40页
   ·其他材料第40页
   ·对流免疫电泳(CIEP)检测ADV第40-42页
   ·透射电镜观察第42页
   ·CRFK细胞培养与病毒分离第42页
   ·PCR检测ADV第42页
   ·动物试验第42-43页
  2 结果第43-47页
   ·临床症状与病理变化第43页
   ·清ADV抗体检测第43页
   ·电镜观察第43-44页
   ·病毒分离与PCR鉴定第44-45页
   ·水貂攻毒发病试验第45-47页
  3 讨论第47-48页
  参考文献第48-50页
  ABSTRACT第50-51页
 第三章 貂阿留申病病毒中国毒株基因序列测定与遗传进化分析第51-75页
  摘要第51-52页
  1 材料与方法第52-54页
   ·材料第52页
   ·方法第52-54页
  2 结果第54-67页
   ·PCR扩增结果第54页
   ·编码区基因测序结果第54页
   ·结构基因的序列分析第54-58页
   ·VP1基因鉴定分析第58页
   ·ADV分离株VP1蛋白生物信息学分析第58-64页
   ·ADV分离株非结构基因的序列分析第64-67页
  3 讨论第67-71页
  参考文献第71-74页
  ABSTRACT第74-75页
 第四章 貂阿留申病病毒TAQMAN实时PCR检测方法的建立与应用第75-85页
  摘要第75页
  1 材料与方法第75-78页
   ·材料第75-76页
   ·方法第76-78页
  2 结果第78-82页
   ·反应条件优化结果第78-79页
   ·标准曲线的建立第79-80页
   ·敏感性试验结果第80页
   ·特异性试验结果第80-81页
   ·重复性试验结果第81页
   ·临床样品检测第81-82页
  3 讨论第82-83页
  参考文献第83-84页
  ABSTRACT第84-85页
 第五章 貂阿留申病病毒VP2主要功能区基因原核表达及其间接ELISA检测方法的建立第85-105页
  摘要第85页
  1 材料与方法第85-92页
   ·材料第85-86页
   ·方法第86-92页
  2 结果第92-100页
   ·PCR扩增结果第92页
   ·重组质粒pMD18T-VP2的酶切第92-93页
   ·重组质粒VP2基因测序第93-94页
   ·重组质粒PET-28a-VP2的鉴定第94页
   ·表达条件优化第94-96页
   ·重组蛋白纯化第96-97页
   ·重组蛋白复性第97页
   ·重组蛋白Western Blot鉴定第97-98页
   ·间接ELISA的最佳反应条件第98-99页
   ·特异性试验第99页
   ·阻断试验第99页
   ·与对流免疫电泳比较试验第99-100页
  3 讨论第100-102页
  参考文献第102-104页
  ABSTRACT第104-105页
 第六章 貂阿留申病病毒VP2基因重组杆状病毒的构建与免疫特性研究第105-129页
  摘要第105-106页
  1 材料与方法第106-119页
   ·材料第106-108页
   ·方法第108-119页
  2 结果第119-124页
   ·VP2基因扩增第119页
   ·阳性质粒pMD18-T-VP2的酶切鉴定第119页
   ·重组转座载体的鉴定第119-120页
   ·细胞病变观察与病毒PCR鉴定第120-121页
   ·间接免疫荧光试验鉴定结果第121-122页
   ·SDS-PAGE和Western-blot检测VP2蛋白第122页
   ·免疫小鼠血清ELISA检测结果第122-123页
   ·免疫小鼠淋巴细胞增殖试验第123-124页
  3 讨论第124-126页
  参考文献第126-128页
  ABSTRACT第128-129页
全文总结第129-131页
攻读博士期间发表论文第131-133页
致谢第133页

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