摘要 | 第1-11页 |
ABSTRACT | 第11-15页 |
第一部分 文献综述 | 第15-39页 |
第一章 貂阿留申病病毒及其检测方法研究进展 | 第15-39页 |
1 ADV病原学 | 第15-17页 |
·ADV的分类地位 | 第15-16页 |
·ADV的形态及理化性质 | 第16页 |
·ADV的培养 | 第16-17页 |
·ADV株间差异与致病性 | 第17页 |
·ADV的毒株分型 | 第17页 |
2 ADV的分子生物学特性 | 第17-24页 |
·ADV的基因组结构和复制特点 | 第17-18页 |
·ADV的转录和复制 | 第18-20页 |
·ADV基因组编码蛋白及功能 | 第20-23页 |
·ADV基因的表达调控 | 第23-24页 |
3 貂阿留申病概述 | 第24-30页 |
·AD流行病学 | 第24-25页 |
·ADV致病机理 | 第25页 |
·临床症状及病理变化 | 第25-26页 |
·实验室诊断 | 第26-29页 |
·AD的防制 | 第29-30页 |
4 本研究背景及意义 | 第30-32页 |
参考文献 | 第32-39页 |
第二部分 研究内容 | 第39-129页 |
第二章 中国貂阿留申病病毒的分离与鉴定 | 第39-51页 |
摘要 | 第39页 |
1 材料与方法 | 第39-43页 |
·主要试剂 | 第39-40页 |
·细胞与培养基 | 第40页 |
·实验动物 | 第40页 |
·仪器 | 第40页 |
·其他材料 | 第40页 |
·对流免疫电泳(CIEP)检测ADV | 第40-42页 |
·透射电镜观察 | 第42页 |
·CRFK细胞培养与病毒分离 | 第42页 |
·PCR检测ADV | 第42页 |
·动物试验 | 第42-43页 |
2 结果 | 第43-47页 |
·临床症状与病理变化 | 第43页 |
·清ADV抗体检测 | 第43页 |
·电镜观察 | 第43-44页 |
·病毒分离与PCR鉴定 | 第44-45页 |
·水貂攻毒发病试验 | 第45-47页 |
3 讨论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-50页 |
ABSTRACT | 第50-51页 |
第三章 貂阿留申病病毒中国毒株基因序列测定与遗传进化分析 | 第51-75页 |
摘要 | 第51-52页 |
1 材料与方法 | 第52-54页 |
·材料 | 第52页 |
·方法 | 第52-54页 |
2 结果 | 第54-67页 |
·PCR扩增结果 | 第54页 |
·编码区基因测序结果 | 第54页 |
·结构基因的序列分析 | 第54-58页 |
·VP1基因鉴定分析 | 第58页 |
·ADV分离株VP1蛋白生物信息学分析 | 第58-64页 |
·ADV分离株非结构基因的序列分析 | 第64-67页 |
3 讨论 | 第67-71页 |
参考文献 | 第71-74页 |
ABSTRACT | 第74-75页 |
第四章 貂阿留申病病毒TAQMAN实时PCR检测方法的建立与应用 | 第75-85页 |
摘要 | 第75页 |
1 材料与方法 | 第75-78页 |
·材料 | 第75-76页 |
·方法 | 第76-78页 |
2 结果 | 第78-82页 |
·反应条件优化结果 | 第78-79页 |
·标准曲线的建立 | 第79-80页 |
·敏感性试验结果 | 第80页 |
·特异性试验结果 | 第80-81页 |
·重复性试验结果 | 第81页 |
·临床样品检测 | 第81-82页 |
3 讨论 | 第82-83页 |
参考文献 | 第83-84页 |
ABSTRACT | 第84-85页 |
第五章 貂阿留申病病毒VP2主要功能区基因原核表达及其间接ELISA检测方法的建立 | 第85-105页 |
摘要 | 第85页 |
1 材料与方法 | 第85-92页 |
·材料 | 第85-86页 |
·方法 | 第86-92页 |
2 结果 | 第92-100页 |
·PCR扩增结果 | 第92页 |
·重组质粒pMD18T-VP2的酶切 | 第92-93页 |
·重组质粒VP2基因测序 | 第93-94页 |
·重组质粒PET-28a-VP2的鉴定 | 第94页 |
·表达条件优化 | 第94-96页 |
·重组蛋白纯化 | 第96-97页 |
·重组蛋白复性 | 第97页 |
·重组蛋白Western Blot鉴定 | 第97-98页 |
·间接ELISA的最佳反应条件 | 第98-99页 |
·特异性试验 | 第99页 |
·阻断试验 | 第99页 |
·与对流免疫电泳比较试验 | 第99-100页 |
3 讨论 | 第100-102页 |
参考文献 | 第102-104页 |
ABSTRACT | 第104-105页 |
第六章 貂阿留申病病毒VP2基因重组杆状病毒的构建与免疫特性研究 | 第105-129页 |
摘要 | 第105-106页 |
1 材料与方法 | 第106-119页 |
·材料 | 第106-108页 |
·方法 | 第108-119页 |
2 结果 | 第119-124页 |
·VP2基因扩增 | 第119页 |
·阳性质粒pMD18-T-VP2的酶切鉴定 | 第119页 |
·重组转座载体的鉴定 | 第119-120页 |
·细胞病变观察与病毒PCR鉴定 | 第120-121页 |
·间接免疫荧光试验鉴定结果 | 第121-122页 |
·SDS-PAGE和Western-blot检测VP2蛋白 | 第122页 |
·免疫小鼠血清ELISA检测结果 | 第122-123页 |
·免疫小鼠淋巴细胞增殖试验 | 第123-124页 |
3 讨论 | 第124-126页 |
参考文献 | 第126-128页 |
ABSTRACT | 第128-129页 |
全文总结 | 第129-131页 |
攻读博士期间发表论文 | 第131-133页 |
致谢 | 第133页 |