| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1. 前言 | 第12-18页 |
| ·miRNAs 的研究进展 | 第12-15页 |
| ·miRNAs 的发现和命名 | 第12页 |
| ·miRNAs 的生物学特征 | 第12页 |
| ·miRNAs 的生成过程及其作用机制 | 第12-13页 |
| ·miRNAs 的检测技术 | 第13-14页 |
| ·miRNAs 的鉴定和靶基因的预测 | 第14-15页 |
| ·乳腺的发育 | 第15-16页 |
| ·miRNA 与乳腺生物学 | 第16页 |
| ·miR-142-3p 的研究进展 | 第16页 |
| ·PRLR 及其生物学意义 | 第16-17页 |
| ·研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| 2. 材料与方法 | 第18-31页 |
| ·实验材料 | 第18页 |
| ·主要仪器和设备 | 第18页 |
| ·主要试剂和耗材 | 第18-19页 |
| ·实验方法与步骤 | 第19-30页 |
| ·miR-142-3p 靶基因的预测 | 第19页 |
| ·miR-142-3p 及其预选靶基因在小鼠乳腺发育各时期中的表达 | 第19-21页 |
| ·小鼠乳腺上皮细胞的培养及鉴定 | 第21-22页 |
| ·miR-142-3p 靶基因的验证 | 第22-25页 |
| ·质粒共转染及报告基因载体的验证 | 第25-26页 |
| ·miR-42-3p mimics 对小鼠乳腺上皮细胞的影响 | 第26-29页 |
| ·miR-142-3p inhibitor 对小鼠乳腺上皮细胞的影响 | 第29-30页 |
| ·数据处理 | 第30-31页 |
| 3. 结果与分析 | 第31-47页 |
| ·miR-142-3p 靶基因的预测结果 | 第31页 |
| ·miR-142-3p、Prlr 在小鼠乳腺发育、泌乳及退化过程中的表达 | 第31-33页 |
| ·各时期小鼠乳腺组织 RNA 质量检测 | 第31-32页 |
| ·miR-142-3p、Prlr 在小鼠乳腺发育、泌乳及退化过程中的表达 | 第32-33页 |
| ·小鼠乳腺上皮细胞的培养及鉴定 | 第33页 |
| ·miR-142-3p 靶基因 Prlr 的构建与鉴定 | 第33-35页 |
| ·miR-142-3p 结合位点及突变位点示意图 | 第33-34页 |
| ·报告基因载体的构建与鉴定 | 第34-35页 |
| ·荧光素酶活性检测 | 第35页 |
| ·miR-142-3p 基因超表达对小鼠乳腺上皮细胞的影响 | 第35-41页 |
| ·qRT-PCR 检测 miR-142-3p mimics 转染后小鼠乳腺上皮细胞中 miR-142-3p、Prlr 及下游信号通路基因的表达 | 第35-37页 |
| ·miR-142-3p mimics 对小鼠乳腺上皮细胞 PRLR 及下游信号通路蛋白的影响 | 第37-38页 |
| ·miR-142-3p mimics 对小鼠乳腺上皮细胞增殖能力及活性的影响 | 第38页 |
| ·miR-142-3p mimics 对小鼠乳腺上皮细胞酪蛋白分泌的影响 | 第38-39页 |
| ·miR-142-3p mimics 对小鼠乳腺上皮细胞甘油三酯分泌的影响 | 第39-40页 |
| ·miR-142-3p mimics 对小鼠乳腺上皮细胞乳糖分泌的影响 | 第40-41页 |
| ·miR-142-3p 基因沉寂对小鼠乳腺上皮细胞的影响 | 第41-47页 |
| ·qRT-PCR 检测 miR-142-3p inhibitor 转染后小鼠乳腺上皮细胞中 miR-142-3p、Prlr 及下游信号通路基因的表达 | 第41-42页 |
| ·miR-142-3p inhibitor 对小鼠乳腺上皮细胞 PRLR 及下游信号通路蛋白的影响 | 第42-43页 |
| ·miR-142-3p inhibitor 对小鼠乳腺上皮细胞增殖能力及活性的影响 | 第43-45页 |
| ·miR-142-3p inhibitor 对小鼠乳腺上皮细胞甘油三酯分泌的影响 | 第45页 |
| ·miR-142-3p inhibitor 对小鼠乳腺上皮细胞乳糖分泌的影响 | 第45-47页 |
| 4. 讨论 | 第47-52页 |
| ·靶基因的预测及选择 | 第47-48页 |
| ·miR-142-3p 在小鼠乳腺发育、泌乳及退化过程中的表达 | 第48-49页 |
| ·miR-142-3p 对乳腺上皮细胞泌乳信号转导途径的影响 | 第49-50页 |
| ·miR-142-3p 对小鼠乳腺细胞增殖和泌乳的作用及其机制 | 第50-51页 |
| ·miR-142-3p 对小鼠乳腺发育和泌乳调控的研究展望 | 第51-52页 |
| 5. 结论 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-71页 |
| 附录 | 第71-72页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第72页 |
