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多能性干细胞培养环境和多能性的相关研究

CONTENTS第1-9页
摘要第9-11页
Abstract第11-13页
1 前言第13-26页
   ·细胞的命运决定(determination)第13-14页
   ·小鼠胚胎干细胞的研究进展第14-16页
   ·重编程的研究进展第16-18页
     ·核移植技术第16-18页
     ·诱导多能性干细胞第18页
   ·人多能性干细胞研究进展第18-19页
   ·多能性干细胞的状态第19-22页
     ·小鼠胚胎干细胞和人胚胎干细胞的异同第19-20页
     ·EpiSCs 的获得及不同多能性状态之间的相互转换第20-22页
   ·临床级别多能性干细胞第22-23页
   ·猪多能性干细胞研究进展第23页
   ·本研究的目的和意义第23-26页
2 材料与方法第26-38页
   ·实验材料第26-30页
     ·实验动物和材料第26页
     ·主要仪器与设备第26-27页
     ·主要试剂及试剂盒第27-28页
     ·常用试剂及配制第28-30页
   ·实验方法第30-38页
     ·细胞培养第30-31页
     ·病毒包装第31-32页
     ·iPS 细胞的诱导第32-33页
     ·多能性细胞的鉴定第33-38页
3 结果与分析第38-59页
   ·通过培养体系的优化将人 ES 细胞转化为小鼠 ES 细胞样的细胞第38-44页
     ·摸索优化并确定起作用的培养液第38-39页
     ·mhES 细胞的鉴定分析第39-41页
     ·mhESCs 的多能性状态分析第41-42页
     ·进一步用此系统进行其他人 ES 细胞的转换,并进行 iPS 细胞诱导尝试第42-44页
   ·快速诱导具有小鼠 ES 细胞样猪 iPS 细胞第44-52页
     ·在 LBX 培养液中可以高效的诱导猪 iPS 细胞,并且具有多能性第44-46页
     ·PiPS_m 细胞具有正常的多能性第46-48页
     ·猪 iPS 细胞的 X 染色体状态第48-49页
     ·相对于 pips_h 细胞,pips_m 细胞具有不同的基因表达模式第49-50页
     ·猪 iPS 细胞的核移植和转基因实验第50-52页
   ·临床级别人孤雌 ES 细胞建系第52-59页
     ·临床级别饲养层的准备第52-53页
     ·临床级别干细胞系的建立第53-55页
     ·多能性及生物安全性检测第55-59页
4 讨论第59-62页
   ·环境决定细胞的命运第59-60页
     ·人的多能性状态的转换第59-60页
     ·猪 iPS 细胞的诱导及应用第60页
   ·多能性干细胞的未来第60-62页
5 结论第62-63页
致谢第63-64页
参考文献第64-74页
附录第74-76页
攻读博士学位期间已发表的学术论文第76页

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