| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 缩略语表 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-26页 |
| ·梨树上主要的潜隐病毒种类 | 第13-16页 |
| ·ASGV的危害特点及分子特性 | 第13-14页 |
| ·ACLSV的危害特点及分子特性 | 第14-15页 |
| ·ASPV的危害特点及分子特性 | 第15-16页 |
| ·植物病毒的脱毒技术 | 第16-22页 |
| ·热处理脱毒 | 第16-17页 |
| ·茎尖培养脱毒 | 第17-18页 |
| ·热处理结合茎尖培养脱毒 | 第18页 |
| ·茎尖微芽嫁接脱毒 | 第18-19页 |
| ·化学处理脱毒 | 第19-20页 |
| ·超低温脱毒 | 第20-22页 |
| ·病毒检测方法 | 第22-24页 |
| ·生物学鉴定 | 第22-23页 |
| ·血清学检测 | 第23-24页 |
| ·分子生物学检测 | 第24页 |
| ·研究的目的和意义 | 第24-26页 |
| 第二章 梨离体植株的获得及病毒检测 | 第26-34页 |
| ·供试材料 | 第26-27页 |
| ·样品的来源 | 第26页 |
| ·MS培养基所需母液 | 第26页 |
| ·试验试剂 | 第26-27页 |
| ·RNA提取主要试剂 | 第26-27页 |
| ·RT-PCR所用主要试剂 | 第27页 |
| ·研究方法 | 第27-29页 |
| ·RT-PCR检测 | 第27-29页 |
| ·总RNA提取 | 第27页 |
| ·RT-PCR所用引物 | 第27-28页 |
| ·反转录合成cDNA第一链 | 第28页 |
| ·PCR扩增 | 第28-29页 |
| ·茎尖剥离与培养 | 第29页 |
| ·结果与分析 | 第29-32页 |
| ·田间采集样品的带毒检测 | 第29-30页 |
| ·从田间采集的不同品种梨茎尖诱导分化情况 | 第30-32页 |
| ·小结与讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 超低温体系的优化及脱毒效果研究 | 第34-44页 |
| ·供试材料 | 第34页 |
| ·研究方法 | 第34-36页 |
| ·玻璃化超低温处理步骤 | 第34-35页 |
| ·玻璃化超低温体系的优化 | 第35-36页 |
| ·病毒检测 | 第36页 |
| ·结果与分析 | 第36-44页 |
| ·梨超低温体系优化 | 第36-40页 |
| ·正交试验结果分析 | 第36-38页 |
| ·预培养条件对超低温处理后茎尖成活率的影响 | 第38页 |
| ·PVS2溶液处理时间对超低温处理后茎尖成活率的影响 | 第38-39页 |
| ·超低温处理后茎尖的形态发生和植株再生 | 第39页 |
| ·超低温处理体系优化结果 | 第39-40页 |
| ·玻璃化法超低温法处理离体植株的病毒脱除效果 | 第40-42页 |
| ·超低温处理不同步骤对梨茎尖再生及脱毒效果的影响 | 第40页 |
| ·不同品种梨茎尖在超低温处理后茎尖再生及脱毒效果 | 第40-41页 |
| ·不同品种梨茎尖超低温处理后脱毒效果的比较 | 第41-42页 |
| ·小结与讨论 | 第42-44页 |
| 第四章 超低温处理与热处理、化学处理相结合的脱毒效果研究 | 第44-55页 |
| ·供试材料 | 第44页 |
| ·研究方法 | 第44-46页 |
| ·超低温处理结合化学处理 | 第44-46页 |
| ·病毒醚的配制 | 第44页 |
| ·预培养方法 | 第44-45页 |
| ·超低温处理结合化学处理试验 | 第45-46页 |
| ·超低温处理结合变温热处理 | 第46页 |
| ·病毒检测 | 第46页 |
| ·结果与分析 | 第46-53页 |
| ·超低温结合化学处理 | 第46-48页 |
| ·20μg/mL病毒醚处理对“丰水”和“美人酥”梨离体植株生长的影响 | 第46-47页 |
| ·预培养时间的筛选 | 第47-48页 |
| ·超低温处理结合变温热处理试验 | 第48-51页 |
| ·变温热处理对不同品种梨离体植株生长情况的影响 | 第48-50页 |
| ·超低温处理结合变温热处理对梨茎尖存活率的影响 | 第50-51页 |
| ·玻璃化超低温脱毒效果 | 第51-53页 |
| ·超低温处理结合变温热处理后不同品种梨植株脱毒效果 | 第51页 |
| ·超低温处理结合化学处理后不同梨品种脱毒情况 | 第51-53页 |
| ·总结与讨论 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-64页 |
| 附录 主要溶液及试剂的配置 | 第64-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
