| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略语表 | 第11-13页 |
| 1. 文献综述 | 第13-25页 |
| ·烟草病毒病的发生与危害 | 第13-14页 |
| ·烟草病毒病毒原的主要种类 | 第14-20页 |
| ·烟草花叶病毒(Tobacco Mosaic Virus,TMV) | 第14-15页 |
| ·生物学特性 | 第14页 |
| ·株系划分 | 第14-15页 |
| ·黄瓜花叶病毒(Cucumber Mosaic Virus,CMV) | 第15-17页 |
| ·生物学特性 | 第15-16页 |
| ·株系划分 | 第16页 |
| ·亚组鉴定 | 第16-17页 |
| ·马铃薯X病毒(Potato Virus X,PVX) | 第17-18页 |
| ·生物学特性 | 第17页 |
| ·株系划分 | 第17-18页 |
| ·马铃薯Y病毒(Potato Virus Y,PVY) | 第18-19页 |
| ·生物学特性 | 第18页 |
| ·株系划分 | 第18-19页 |
| ·烟草蚀纹病毒(Tobacco Etch Virus,TEV) | 第19页 |
| ·生物学特性 | 第19页 |
| ·株系划分 | 第19页 |
| ·烟草环斑病毒(Tobacco Ring Spot Virus,TRSV) | 第19-20页 |
| ·烟草病毒常用检测技术 | 第20-23页 |
| ·指示植物法 | 第20-21页 |
| ·血清学检测 | 第21-22页 |
| ·电子显微技术 | 第22页 |
| ·分子生物学检测 | 第22-23页 |
| ·湖北省烟草种植概况 | 第23-24页 |
| ·研究目的和意义 | 第24-25页 |
| 2. 材料与方法 | 第25-33页 |
| ·材料 | 第25-27页 |
| ·烟草病毒病样本 | 第25页 |
| ·指示植物 | 第25页 |
| ·酶联免疫检测材料 | 第25-26页 |
| ·抗血清 | 第25页 |
| ·酶标抗体 | 第25-26页 |
| ·缓冲液 | 第26页 |
| ·分子生物学检测材料 | 第26页 |
| ·材料准备 | 第26页 |
| ·大肠杆菌感受态 | 第26页 |
| ·引物 | 第26页 |
| ·其他实验材料 | 第26-27页 |
| ·方法 | 第27-33页 |
| ·烟草病毒病样本的保存 | 第27页 |
| ·干燥保存 | 第27页 |
| ·超低温保存 | 第27页 |
| ·烟草病毒病田间调查 | 第27页 |
| ·摩擦接种 | 第27页 |
| ·酶联免疫检测法(ELISA) | 第27-29页 |
| ·间接酶联免疫检测法(ID-ELISA) | 第27-28页 |
| ·双抗体夹心免疫检测法(DAS-ELISA) | 第28-29页 |
| ·分子生物学检测 | 第29-33页 |
| ·总RNA的提取 | 第29页 |
| ·cDNA的合成 | 第29-30页 |
| ·cDNA的特异性引物检测 | 第30-31页 |
| ·DNA目标条带的回收 | 第31页 |
| ·DNA回收产物的连接 | 第31页 |
| ·连接产物的转化 | 第31-32页 |
| ·T-A单克隆的活化 | 第32页 |
| ·T-A单克隆(重组质粒)的检测 | 第32页 |
| ·序列测定与同源性比对 | 第32-33页 |
| 3. 结果与分析 | 第33-55页 |
| ·烟草病毒病田间症状类型 | 第33-37页 |
| ·不同症状样本接种指示植物上的症状反应 | 第37-39页 |
| ·酶联免疫检测 | 第39-49页 |
| ·湖北省烟草病毒病毒原种类 | 第39-43页 |
| ·湖北省烤烟病毒病毒原种类 | 第43-46页 |
| ·湖北省白肋烟病毒病毒原种类 | 第46-48页 |
| ·湖北省马里兰烟病毒病毒原种类 | 第48-49页 |
| ·分子生物学检测 | 第49-55页 |
| ·烟草的总RNA | 第49-50页 |
| ·RT-PCR检测结果 | 第50-51页 |
| ·T-A单克隆检测结果 | 第51-52页 |
| ·目标片段的测序及同源性比对 | 第52-55页 |
| ·TMV序列比对结果 | 第52-53页 |
| ·CMV序列比对结果 | 第53页 |
| ·PVY序列比对结果 | 第53-55页 |
| 4. 小结与讨论 | 第55-58页 |
| ·湖北省烟草病毒病发生情况分析 | 第55-56页 |
| ·不同烟草产区病毒病发生情况分析 | 第56-57页 |
| ·烟草病毒主要鉴定方法的评价 | 第57-58页 |
| 5. 全文总结与展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-67页 |
| 附录Ⅰ 2010-2011年湖北省烟草病毒病样本采集信息 | 第67-83页 |
| 附录Ⅱ 主要试剂及溶液的配制 | 第83-85页 |
| 附录Ⅲ 已测定烟草病毒的CP基因序列 | 第85-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
