摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-7页 |
目录 | 第7-10页 |
英文縮略词表 | 第10-12页 |
前言 | 第12-19页 |
第一章 Cx31与p62相互作用 | 第19-36页 |
·实验材料与试剂 | 第19-25页 |
·主要实验仪器 | 第19-20页 |
·主要实验试剂与耗材 | 第20-22页 |
·主要试剂的配制 | 第22-25页 |
·实验用细胞和质粒 | 第25页 |
·实验方法 | 第25-30页 |
·质粒转染 | 第25-26页 |
·Cx31-myc/Hela稳定表达细胞系的建立 | 第26页 |
·Western Blot | 第26-28页 |
·免疫荧光技术 | 第28页 |
·免疫共沉淀 | 第28-30页 |
·实验结果 | 第30-35页 |
·Cx31-myc/Hela稳定表达细胞系建立成功 | 第30页 |
·Cx31与p62相互作用 | 第30-31页 |
·Cx31与p62共定位 | 第31-35页 |
·分析与讨论 | 第35页 |
·结论 | 第35-36页 |
第二章 p62的PB1结构域介导p62到达Cx31间隙连接斑 | 第36-56页 |
·实验材料与试剂 | 第36-40页 |
·主要实验仪器 | 第36-37页 |
·主要实验试剂与耗材 | 第37-38页 |
·主要试剂的配制 | 第38-39页 |
·实验用菌种和质粒 | 第39-40页 |
·试验方法 | 第40-45页 |
·质粒构建 | 第40-45页 |
·质粒转染 | 第45页 |
·免疫荧光技术 | 第45页 |
·免疫共沉淀 | 第45页 |
·实验结果 | 第45-54页 |
·Cx31、p62和泛素或泛素突变体三者共定位 | 第45-47页 |
·质粒构建成功 | 第47-50页 |
·p62的PB1结构域功能突变体不与Cx31间隙连接斑共定位 | 第50-53页 |
·p62的PB1结构域、LIR结构域和UBA结构域功能突变体不影响p62与Cx31的相互作用 | 第53-54页 |
·分析与讨论 | 第54-55页 |
·结论 | 第55-56页 |
第三章 p62对Cx31代谢和分布的影响 | 第56-64页 |
·实验材料与试剂 | 第56-57页 |
·主要实验仪器 | 第56页 |
·主要实验试剂与耗材 | 第56-57页 |
·主要试剂的配制 | 第57页 |
·试验方法 | 第57-59页 |
·RNA干扰技术 | 第57页 |
·Western Blot | 第57页 |
·免疫荧光 | 第57页 |
·生物素标记膜蛋白检测 | 第57-58页 |
·细胞质膜上Cx31占总Cx31比例的统计分析 | 第58-59页 |
·实验结果 | 第59-63页 |
·p62 siRNA干扰后,Cx31蛋白水平上调 | 第59页 |
·p62通过溶酶体途径和蛋白酶体途径影响Cx31降解 | 第59-60页 |
·siRNA干扰p62导致细胞质膜上的Cx31增加 | 第60-61页 |
·p62 siRNA干扰后,胞浆中与Lamp1共定位的Cx31增多 | 第61-63页 |
·分析与讨论 | 第63页 |
·结论 | 第63-64页 |
总结 | 第64-66页 |
参考文献 | 第66-74页 |
综述 | 第74-88页 |
参考文献 | 第81-88页 |
致谢 | 第88-89页 |
个人简历 | 第89页 |