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Connexin 31与p62相互作用的研究

摘要第1-5页
英文摘要第5-7页
目录第7-10页
英文縮略词表第10-12页
前言第12-19页
第一章 Cx31与p62相互作用第19-36页
   ·实验材料与试剂第19-25页
     ·主要实验仪器第19-20页
     ·主要实验试剂与耗材第20-22页
     ·主要试剂的配制第22-25页
     ·实验用细胞和质粒第25页
   ·实验方法第25-30页
     ·质粒转染第25-26页
     ·Cx31-myc/Hela稳定表达细胞系的建立第26页
     ·Western Blot第26-28页
     ·免疫荧光技术第28页
     ·免疫共沉淀第28-30页
   ·实验结果第30-35页
     ·Cx31-myc/Hela稳定表达细胞系建立成功第30页
     ·Cx31与p62相互作用第30-31页
     ·Cx31与p62共定位第31-35页
   ·分析与讨论第35页
   ·结论第35-36页
第二章 p62的PB1结构域介导p62到达Cx31间隙连接斑第36-56页
   ·实验材料与试剂第36-40页
     ·主要实验仪器第36-37页
     ·主要实验试剂与耗材第37-38页
     ·主要试剂的配制第38-39页
     ·实验用菌种和质粒第39-40页
   ·试验方法第40-45页
     ·质粒构建第40-45页
     ·质粒转染第45页
     ·免疫荧光技术第45页
     ·免疫共沉淀第45页
   ·实验结果第45-54页
     ·Cx31、p62和泛素或泛素突变体三者共定位第45-47页
     ·质粒构建成功第47-50页
     ·p62的PB1结构域功能突变体不与Cx31间隙连接斑共定位第50-53页
     ·p62的PB1结构域、LIR结构域和UBA结构域功能突变体不影响p62与Cx31的相互作用第53-54页
   ·分析与讨论第54-55页
   ·结论第55-56页
第三章 p62对Cx31代谢和分布的影响第56-64页
   ·实验材料与试剂第56-57页
     ·主要实验仪器第56页
     ·主要实验试剂与耗材第56-57页
     ·主要试剂的配制第57页
   ·试验方法第57-59页
     ·RNA干扰技术第57页
     ·Western Blot第57页
     ·免疫荧光第57页
     ·生物素标记膜蛋白检测第57-58页
     ·细胞质膜上Cx31占总Cx31比例的统计分析第58-59页
   ·实验结果第59-63页
     ·p62 siRNA干扰后,Cx31蛋白水平上调第59页
     ·p62通过溶酶体途径和蛋白酶体途径影响Cx31降解第59-60页
     ·siRNA干扰p62导致细胞质膜上的Cx31增加第60-61页
     ·p62 siRNA干扰后,胞浆中与Lamp1共定位的Cx31增多第61-63页
   ·分析与讨论第63页
   ·结论第63-64页
总结第64-66页
参考文献第66-74页
综述第74-88页
 参考文献第81-88页
致谢第88-89页
个人简历第89页

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