| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-10页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-18页 |
| ·赤霉素合成及信号转导途径 | 第11-12页 |
| ·赤霉素生物合成途径及反馈调节 | 第11页 |
| ·赤霉素信号应答机制 | 第11-12页 |
| ·赤霉素信号途径中的主要组分 | 第11页 |
| ·赤霉素受体 | 第11页 |
| ·DELLA蛋白降解的分子机制 | 第11-12页 |
| ·赤霉素信号转导模式 | 第12页 |
| ·赤霉素与植物生长发育相关研究进展 | 第12-13页 |
| ·GA 20-氧化酶与植物生长发育相关研究进展 | 第13-14页 |
| ·GASA基因家族研究进展 | 第14-16页 |
| ·GASA基因蛋白结构与组织表达模式 | 第14-15页 |
| ·GASA基因在植物生长发育中的作用 | 第15-16页 |
| ·杨树遗传转化体系的研究 | 第16-17页 |
| ·杨树遗传转化的方法 | 第16页 |
| ·杨树遗传转化的影响因素 | 第16-17页 |
| ·研究目的及意义 | 第17-18页 |
| ·目的及意义 | 第17页 |
| ·技术路线 | 第17-18页 |
| 2 PdGA20ox基因的克隆及功能的研究 | 第18-40页 |
| ·材料与方法 | 第18-26页 |
| ·实验材料 | 第18页 |
| ·总RNA的提取 | 第18-19页 |
| ·实验器皿和耗材的处理 | 第18页 |
| ·药品的制备 | 第18页 |
| ·RNA提取步骤 | 第18-19页 |
| ·GA20-氧化酶基因的克隆及蛋白结构分析 | 第19-20页 |
| ·PCR扩增 | 第19页 |
| ·目的片段的纯化回收 | 第19-20页 |
| ·目的片段与pMD18-T载体连接 | 第20页 |
| ·转化大肠杆菌感受态 | 第20页 |
| ·PCR检测大肠杆菌阳性克隆 | 第20页 |
| ·PdGA20ox基因的蛋白结构分析 | 第20页 |
| ·植物表达载体的构建及转化农杆菌 | 第20-23页 |
| ·基因5’端加入酶切位点 | 第20-21页 |
| ·目的条带纯化回收与T载体连接 | 第21页 |
| ·转化大肠杆菌进行PCR鉴定 | 第21页 |
| ·质粒的提取 | 第21-22页 |
| ·酶切及连接表达载体 | 第22页 |
| ·根癌农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第22-23页 |
| ·农杆菌菌液PCR检测 | 第23页 |
| ·GA20-氧化酶基因转化拟南芥 | 第23-24页 |
| ·拟南芥的培养 | 第23页 |
| ·农杆菌转化拟南芥 | 第23-24页 |
| ·转基因拟南芥的筛选和鉴定 | 第24-25页 |
| ·甘露糖筛选 | 第24页 |
| ·氯酚红检测 | 第24页 |
| ·GUS组织化学法染色检测 | 第24页 |
| ·PCR检测转基因植株 | 第24-25页 |
| ·转基因株系目的基因相对表达量 | 第25页 |
| ·超表达PdGA20ox、ATGA20ox1基因的株系相关表征分析 | 第25-26页 |
| ·萌发率的测定 | 第25页 |
| ·拟南芥下胚轴及根的测定 | 第25-26页 |
| ·叶面积的测定 | 第26页 |
| ·株高和地径的测定 | 第26页 |
| ·PdGA20ox基因在欧美杨R270中的表达情况 | 第26页 |
| ·欧美杨R270组培苗的扩繁 | 第26页 |
| ·欧美杨R270组培苗的赤霉素处理 | 第26页 |
| ·RNA提取和半定量PCR反应 | 第26页 |
| ·结果 | 第26-37页 |
| ·GA 20-氧化酶基因的克隆 | 第26-27页 |
| ·PdGA20ox与ATGA20ox1基因序列分析 | 第27-29页 |
| ·PdGA20ox蛋白结构分析 | 第29页 |
| ·植物表达载体的构建及转化农杆菌结果 | 第29-31页 |
| ·转基因拟南芥的筛选和鉴定 | 第31-33页 |
| ·甘露糖筛选 | 第31页 |
| ·氯酚红检测 | 第31页 |
| ·GUS组织化学法染色检测 | 第31-32页 |
| ·PCR检测转基因植株 | 第32-33页 |
| ·PdGA20ox和ATGA20ox1在转基因拟南芥中的表达量 | 第33页 |
| ·超表达PdGA20ox、ATGA20ox1基因的拟南芥株系相关表征分析 | 第33-37页 |
| ·萌发率的测定 | 第33-34页 |
| ·胚轴和根长的测定 | 第34-35页 |
| ·叶面积的测定 | 第35页 |
| ·株高和地径的测定 | 第35-37页 |
| ·PdGA20ox基因在欧美杨R270中的表达 | 第37页 |
| ·讨论 | 第37-40页 |
| ·GA 20-氧化酶基因的克隆 | 第37页 |
| ·转基因拟南芥的筛选和鉴定 | 第37-38页 |
| ·PdGA20ox基因的功能研究 | 第38-40页 |
| 3 PdGASA基因的克隆及功能的研究 | 第40-56页 |
| ·材料与方法 | 第40-42页 |
| ·实验材料 | 第40页 |
| ·PdGASA基因克隆及分析 | 第40页 |
| ·PdGASA基因的表达特征及对激素的响应 | 第40-41页 |
| ·欧美杨R270组培苗的激素处理 | 第40-41页 |
| ·RNA提取和半定量PCR反应 | 第41页 |
| ·PdGASA基因表达载体的构建与转化农杆菌 | 第41页 |
| ·PdGASA基因转化拟南芥及转化植株的筛选鉴定 | 第41-42页 |
| ·超表达PdGASA基因的拟南芥相关表征分析 | 第42页 |
| ·萌发率的测定 | 第42页 |
| ·拟南芥根长、叶面积和株高的测定 | 第42页 |
| ·PdGASA基因在细胞中的定位 | 第42页 |
| ·结果 | 第42-54页 |
| ·PdGASA基因的克隆 | 第42-43页 |
| ·PdGASA基因序列分析 | 第43页 |
| ·PdGASA基因响应激素的元件分析 | 第43-44页 |
| ·PdGASA基因表达特征及对激素的响应 | 第44-45页 |
| ·PdGASA基因在欧美杨R270各器官中的表达情况 | 第44-45页 |
| ·PdGASA基因对GA_3和ABA的响应 | 第45页 |
| ·PCR检测PdGASA基因表达载体 | 第45-46页 |
| ·转基因拟南芥的筛选和鉴定 | 第46-47页 |
| ·超表达PdGASA1基因的拟南芥相关表征分析 | 第47-49页 |
| ·超表达PdGASA2基因的拟南芥相关表征分析 | 第49-51页 |
| ·超表达PdGASA4基因的拟南芥相关表征分析 | 第51-54页 |
| ·讨论 | 第54-56页 |
| 4 PdGA20ox和PdGASA基因在欧美杨R270中的转化 | 第56-62页 |
| ·材料和方法 | 第56-57页 |
| ·实验材料 | 第56页 |
| ·甘露糖敏感性实验 | 第56页 |
| ·欧美杨R270转化 | 第56-57页 |
| ·转化欧美杨R270的筛选和鉴定 | 第57页 |
| ·结果 | 第57-60页 |
| ·甘露糖抗性的选择 | 第57-58页 |
| ·欧美杨R270转化后的生长情况 | 第58页 |
| ·转基因欧美杨R270生根情况 | 第58-59页 |
| ·转基因欧美杨R270的筛选和鉴定 | 第59-60页 |
| ·讨论 | 第60-62页 |
| 5 结论与展望 | 第62-64页 |
| ·结论 | 第62页 |
| ·创新点 | 第62-63页 |
| ·展望 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-69页 |
| 缩略词表 | 第69-70页 |
| 个人简介 | 第70-71页 |
| 导师简介 | 第71-72页 |
| 获得成果目录清单 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
