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真核生物翻译起始因子eIF5A溶液结构研究

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
缩写表第11-12页
第一章 综述第12-32页
 第一节 核磁共振技术简介第12-14页
 第二节 核磁共振技术与蛋白质结构解析第14-32页
     ·核磁共振多维结构研究的主要特性参数第14页
       ·化学位移第14页
       ·核Overhauser 效应第14页
     ·蛋白质的表达纯化和样品制备第14-16页
     ·NMR 实验数据的收集和处理第16-20页
       ·多维NMR 实验的扩展及关系第16-17页
       ·常用的三维实验及磁化矢量传递方式第17-19页
       ·FID 信号的处理及化学位移的校准第19-20页
       ·核磁共振信号的化学位移归属第20页
     ·蛋白质溶液结构解析第20-28页
       ·结构约束条件第20-23页
       ·生物大分子溶液结构计算第23-28页
         ·初始结构的获得第24-25页
         ·溶液初始结构的循环优化第25页
         ·溶液结构的计算第25-26页
         ·最终溶液结构的优化计算第26-28页
  参考文献第28-32页
第二章 eIF5A 功能研究介绍第32-55页
 第一节 引言第32页
 第二节 eIF5A 的蛋白序列特点第32-34页
 第三节 eIF5A 和翻译起始因子第34-36页
 第四节 eIF5A 和hypusination 生物学过程第36-40页
 第五节 eIF5A 的其它生物学功能第40-41页
 第六节 eIF5A 与临床疾病研究第41-43页
     ·eIF5A 和炎症治疗第41-42页
     ·eIF5A 和青光眼的临床治疗第42-43页
 第七节 小结第43-44页
 参考文献第44-55页
第三章 eIF5A 溶液结构研究第55-87页
 第一节 研究目的第55页
 第二节 eIF5A 的表达、纯化与分离第55-59页
     ·材料与方法第56页
     ·eIF5A 质粒构建与基因克隆第56页
     ·eIF5A 的表达第56-57页
     ·eIF5A 的纯化第57-58页
     ·eIF5A 13 C/ 1 5N标记蛋白培养第58-59页
     ·eIF5A 核磁共振样品制备第59页
       ·eIF5A 1 5N同位素标记样品的制备第59页
       ·eIF5A 15 N/ 13 C同位素标记样品的制备第59页
 第三节 eIF5A 的性质分析第59-62页
     ·Superdex-75 分析eIF5A 聚集状态第59-60页
     ·超速离心鉴定eIF5A 的分子量第60页
     ·圆二色谱分析eIF5A 的二级结构成分第60-62页
 第四节 eIF5A 化学位移归属第62-65页
     ·核磁共振实验第62页
     ·eIF5A 化学位移指认第62-64页
     ·eIF5A 二级结构分析第64-65页
 第五节 eIF5A 溶液结构计算第65-77页
     ·初始结构计算第65-66页
     ·溶液结构优化第66-67页
     ·残余偶极耦合(RDC)实验第67-77页
       ·eIF5A RDC 实验样品制备第69-70页
         ·噬菌体介质实验样品制备第69页
         ·聚丙烯酰胺凝胶体系实验样品制备第69-70页
       ·eIF5A 残余偶极耦合实验结果第70-76页
         ·Jeff有效耦合常数(D)的计算第70页
         ·eIF5A 在常规溶液体系中J 值的计算第70-72页
         ·eIF5A 在796 Polyacrylamide Gel 体系中D+J 值的计算第72-74页
         ·eIF5A 在1596 Pf1 体系中D+J 值的计算第74-76页
       ·eIF5A RDC 实验结果讨论第76-77页
 第六节 实验结果讨论第77-82页
     ·eIF5A 同源结构分析第79-80页
     ·人eIF5A 结构分析第80-82页
 第七节 小结第82-83页
 参考文献第83-87页
第四章 总结与展望第87-89页
附录一第89-90页
附录二第90-91页
附录三第91-93页
附录四第93-110页
论文发表情况第110-111页
致谢第111页

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