摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-13页 |
第一部分 文献综述 | 第13-31页 |
第一章 水稻SNARE蛋白基因的结构与功能 | 第13-21页 |
1 植物SNARE蛋白的分类 | 第14-15页 |
2 植物SNARE核心复合体的结构 | 第15-16页 |
3 植物SNARE蛋白介导的膜融合机制 | 第16-17页 |
4 植物SNARE蛋白功能 | 第17-18页 |
5 植物SNARE蛋白研究展望 | 第18-21页 |
第二章 水稻蛋白质组学研究进展 | 第21-31页 |
1 蛋白质组学的概念 | 第21-22页 |
2 蛋白质组学的研究方法 | 第22页 |
3 水稻蛋白质组学研究 | 第22-23页 |
4 水稻表达蛋白质组学 | 第23-26页 |
5 水稻功能蛋白质组学 | 第26-30页 |
6 结论与前景 | 第30-31页 |
第二部分 研究报告 | 第31-115页 |
第三章 水稻OsSNAP32蛋白基因的克隆与功能分析 | 第31-55页 |
1 材料与方法 | 第32-38页 |
·植物材料 | 第32页 |
·植物材料的处理 | 第32-33页 |
·总RNA的提取和cDNA第一链的合成 | 第33页 |
·水稻SNAP25-type蛋白基因OsSNAP32基因的克隆 | 第33页 |
·序列分析 | 第33-34页 |
·菌株、质粒和试剂盒 | 第34页 |
·亚细胞定位 | 第34页 |
·OsSNAP32正反义植物表达载体的构建 | 第34-35页 |
·根癌农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第35-36页 |
·转基因水稻阳性植株的PCR和RT-PCR检测 | 第36页 |
·转基因水稻阳性植株的Southern blot检测 | 第36-37页 |
·T_0代转基因植株农艺性状考察 | 第37-38页 |
·T_1代转基因植株对稻瘟病菌的抗性鉴定 | 第38页 |
2 结果与分析 | 第38-51页 |
·水稻OsSNAP32基因的cDNA克隆 | 第38-40页 |
·水稻OsSNAP32的氨基酸序列分析 | 第40-42页 |
·水稻OsSNAP32蛋白的亚细胞定位 | 第42-43页 |
·水稻OsSNAP32在各组织中和胁迫处理下的表达分析 | 第43-46页 |
·OsSNAP32转基因水稻的获得 | 第46页 |
·T_0代水稻转基因植株的PCR检测 | 第46-47页 |
·T_0代水稻转基因植株的RT-PCR检测 | 第47-48页 |
·T_0代水稻转基因植株的Southern blot检测 | 第48-49页 |
·T_0代水稻转基因植株农艺性状考察 | 第49-50页 |
·T_1代水稻转基因植株稻瘟病菌接种处理 | 第50-51页 |
3 讨论 | 第51-55页 |
第四章 水稻OsNPSN11~13基因的克隆和特性研究 | 第55-71页 |
1 材料与方法 | 第56-60页 |
·植物材料 | 第56页 |
·总RNA的提取和cDNA第一链的合成 | 第56页 |
·水稻NPSN家族蛋白基因的克隆 | 第56-57页 |
·序列分析 | 第57页 |
·菌株、质粒和试剂盒 | 第57页 |
·亚细胞定位 | 第57-58页 |
·OsNPSN11在大肠杆菌中的表达和产物纯化 | 第58-59页 |
·多克隆抗体的制备和检测 | 第59页 |
·OsNPSN11在水稻中的亚细胞组分定位 | 第59-60页 |
2 结果与分析 | 第60-69页 |
·水稻OsNPSN11~13的cDNA克隆 | 第60-61页 |
·水稻OsNPSN11~13的氨基酸序列分析 | 第61-64页 |
·水稻OsNPSN11~13蛋白的亚细胞定位 | 第64-65页 |
·水稻OsNPSN11基因在大肠杆菌中的表达 | 第65-66页 |
·目标蛋白的纯化 | 第66-67页 |
·ELISA检测抗体的效价和Western blot分析抗体的特异性 | 第67-68页 |
·OsNPSN11蛋白在水稻细胞内的亚细胞组分定位 | 第68-69页 |
3 讨论 | 第69-71页 |
第五章 OsNPSN11~13的表达特征及在抵御非生物胁迫和生物胁迫中的功能分析 | 第71-99页 |
1 材料与方法 | 第72-76页 |
·植物材料 | 第72-73页 |
·植物材料的处理 | 第73页 |
·半定量RT-PCR分析 | 第73页 |
·菌株、质粒和试剂盒 | 第73页 |
·OsNPSN11~13基因对酵母细胞的转化 | 第73-74页 |
·酵母细胞非生物胁迫处理试验 | 第74页 |
·OsNPSN11过量表达转基因烟草的获得 | 第74页 |
·转基因烟草的耐逆性分析 | 第74-75页 |
·OsNPSN11正反义水稻表达载体的构建 | 第75页 |
·根癌农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第75-76页 |
·转基因水稻阳性植株的PCR和RT-PCR检测 | 第76页 |
·转基因水稻阳性植株的Southern blot检测 | 第76页 |
·T_0代转基因植株农艺性状考察 | 第76页 |
·T_1代转基因植株对稻瘟病菌的抗性鉴定 | 第76页 |
2 结果与分析 | 第76-95页 |
·水稻OsNPSN11~13在非生物胁迫下的表达分析 | 第76-77页 |
·水稻OsNPSN11~13在转基因酵母细胞中的表达 | 第77-78页 |
·对转基因酵母细胞进行非生物胁迫处理分析 | 第78-80页 |
·OsNPSN11转基因烟草的获得 | 第80-82页 |
·OsNPSN11转基因烟草幼苗非生物胁迫处理分析 | 第82-87页 |
·病原菌接种对OsNPSN11~13表达的影响 | 第87-88页 |
·OsNPSN11转基因水稻的获得 | 第88-89页 |
·T_0代水稻转基因植株的PCR检测 | 第89-90页 |
·T_0代水稻转基因植株的RT-PCR检测 | 第90-91页 |
·T_0代水稻转基因植株的Southern blot检测 | 第91-92页 |
·T_0代水稻转基因植株农艺性状考察 | 第92-93页 |
·T_1代水稻转基因植株稻瘟病菌接种处理 | 第93-95页 |
3 讨论 | 第95-99页 |
第六章 水稻抗稻瘟病菌质膜相关蛋白研究 | 第99-115页 |
1 材料与方法 | 第100-104页 |
·植物材料和育苗 | 第100页 |
·稻瘟病菌与接种 | 第100页 |
·水稻叶片质膜蛋白的提取和纯化 | 第100-101页 |
·水稻叶片质膜蛋白的纯度鉴定 | 第101-102页 |
·水稻叶片质膜蛋白的双向电泳 | 第102-104页 |
·蛋白胶染色、扫描和图像分析 | 第104页 |
2 结果与分析 | 第104-112页 |
·水稻品种抗稻瘟病性鉴定 | 第104-105页 |
·NaCI浓度对水稻叶片质膜蛋白提取的影响 | 第105-106页 |
·水稻质膜蛋白纯度的鉴定 | 第106-107页 |
·水稻叶片质膜蛋白的双向电泳分析 | 第107-110页 |
·差异表达蛋白点的质谱鉴定 | 第110-112页 |
3 讨论 | 第112-115页 |
全文结论 | 第115-117页 |
参考文献 | 第117-129页 |
在读期间发表或待发表研究论文 | 第129-131页 |
致谢 | 第131页 |