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水稻SNARE蛋白基因的克隆与功能分析

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-13页
第一部分 文献综述第13-31页
 第一章 水稻SNARE蛋白基因的结构与功能第13-21页
  1 植物SNARE蛋白的分类第14-15页
  2 植物SNARE核心复合体的结构第15-16页
  3 植物SNARE蛋白介导的膜融合机制第16-17页
  4 植物SNARE蛋白功能第17-18页
  5 植物SNARE蛋白研究展望第18-21页
 第二章 水稻蛋白质组学研究进展第21-31页
  1 蛋白质组学的概念第21-22页
  2 蛋白质组学的研究方法第22页
  3 水稻蛋白质组学研究第22-23页
  4 水稻表达蛋白质组学第23-26页
  5 水稻功能蛋白质组学第26-30页
  6 结论与前景第30-31页
第二部分 研究报告第31-115页
 第三章 水稻OsSNAP32蛋白基因的克隆与功能分析第31-55页
  1 材料与方法第32-38页
   ·植物材料第32页
   ·植物材料的处理第32-33页
   ·总RNA的提取和cDNA第一链的合成第33页
   ·水稻SNAP25-type蛋白基因OsSNAP32基因的克隆第33页
   ·序列分析第33-34页
   ·菌株、质粒和试剂盒第34页
   ·亚细胞定位第34页
   ·OsSNAP32正反义植物表达载体的构建第34-35页
   ·根癌农杆菌介导的水稻遗传转化第35-36页
   ·转基因水稻阳性植株的PCR和RT-PCR检测第36页
   ·转基因水稻阳性植株的Southern blot检测第36-37页
   ·T_0代转基因植株农艺性状考察第37-38页
   ·T_1代转基因植株对稻瘟病菌的抗性鉴定第38页
  2 结果与分析第38-51页
   ·水稻OsSNAP32基因的cDNA克隆第38-40页
   ·水稻OsSNAP32的氨基酸序列分析第40-42页
   ·水稻OsSNAP32蛋白的亚细胞定位第42-43页
   ·水稻OsSNAP32在各组织中和胁迫处理下的表达分析第43-46页
   ·OsSNAP32转基因水稻的获得第46页
   ·T_0代水稻转基因植株的PCR检测第46-47页
   ·T_0代水稻转基因植株的RT-PCR检测第47-48页
   ·T_0代水稻转基因植株的Southern blot检测第48-49页
   ·T_0代水稻转基因植株农艺性状考察第49-50页
   ·T_1代水稻转基因植株稻瘟病菌接种处理第50-51页
  3 讨论第51-55页
 第四章 水稻OsNPSN11~13基因的克隆和特性研究第55-71页
  1 材料与方法第56-60页
   ·植物材料第56页
   ·总RNA的提取和cDNA第一链的合成第56页
   ·水稻NPSN家族蛋白基因的克隆第56-57页
   ·序列分析第57页
   ·菌株、质粒和试剂盒第57页
   ·亚细胞定位第57-58页
   ·OsNPSN11在大肠杆菌中的表达和产物纯化第58-59页
   ·多克隆抗体的制备和检测第59页
   ·OsNPSN11在水稻中的亚细胞组分定位第59-60页
  2 结果与分析第60-69页
   ·水稻OsNPSN11~13的cDNA克隆第60-61页
   ·水稻OsNPSN11~13的氨基酸序列分析第61-64页
   ·水稻OsNPSN11~13蛋白的亚细胞定位第64-65页
   ·水稻OsNPSN11基因在大肠杆菌中的表达第65-66页
   ·目标蛋白的纯化第66-67页
   ·ELISA检测抗体的效价和Western blot分析抗体的特异性第67-68页
   ·OsNPSN11蛋白在水稻细胞内的亚细胞组分定位第68-69页
  3 讨论第69-71页
 第五章 OsNPSN11~13的表达特征及在抵御非生物胁迫和生物胁迫中的功能分析第71-99页
  1 材料与方法第72-76页
   ·植物材料第72-73页
   ·植物材料的处理第73页
   ·半定量RT-PCR分析第73页
   ·菌株、质粒和试剂盒第73页
   ·OsNPSN11~13基因对酵母细胞的转化第73-74页
   ·酵母细胞非生物胁迫处理试验第74页
   ·OsNPSN11过量表达转基因烟草的获得第74页
   ·转基因烟草的耐逆性分析第74-75页
   ·OsNPSN11正反义水稻表达载体的构建第75页
   ·根癌农杆菌介导的水稻遗传转化第75-76页
   ·转基因水稻阳性植株的PCR和RT-PCR检测第76页
   ·转基因水稻阳性植株的Southern blot检测第76页
   ·T_0代转基因植株农艺性状考察第76页
   ·T_1代转基因植株对稻瘟病菌的抗性鉴定第76页
  2 结果与分析第76-95页
   ·水稻OsNPSN11~13在非生物胁迫下的表达分析第76-77页
   ·水稻OsNPSN11~13在转基因酵母细胞中的表达第77-78页
   ·对转基因酵母细胞进行非生物胁迫处理分析第78-80页
   ·OsNPSN11转基因烟草的获得第80-82页
   ·OsNPSN11转基因烟草幼苗非生物胁迫处理分析第82-87页
   ·病原菌接种对OsNPSN11~13表达的影响第87-88页
   ·OsNPSN11转基因水稻的获得第88-89页
   ·T_0代水稻转基因植株的PCR检测第89-90页
   ·T_0代水稻转基因植株的RT-PCR检测第90-91页
   ·T_0代水稻转基因植株的Southern blot检测第91-92页
   ·T_0代水稻转基因植株农艺性状考察第92-93页
   ·T_1代水稻转基因植株稻瘟病菌接种处理第93-95页
  3 讨论第95-99页
 第六章 水稻抗稻瘟病菌质膜相关蛋白研究第99-115页
  1 材料与方法第100-104页
   ·植物材料和育苗第100页
   ·稻瘟病菌与接种第100页
   ·水稻叶片质膜蛋白的提取和纯化第100-101页
   ·水稻叶片质膜蛋白的纯度鉴定第101-102页
   ·水稻叶片质膜蛋白的双向电泳第102-104页
   ·蛋白胶染色、扫描和图像分析第104页
  2 结果与分析第104-112页
   ·水稻品种抗稻瘟病性鉴定第104-105页
   ·NaCI浓度对水稻叶片质膜蛋白提取的影响第105-106页
   ·水稻质膜蛋白纯度的鉴定第106-107页
   ·水稻叶片质膜蛋白的双向电泳分析第107-110页
   ·差异表达蛋白点的质谱鉴定第110-112页
  3 讨论第112-115页
全文结论第115-117页
参考文献第117-129页
在读期间发表或待发表研究论文第129-131页
致谢第131页

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