摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-16页 |
第一部分 单纯疱疹病毒2型糖蛋白gG-2基因序列测定及分析 | 第16-29页 |
·材料 | 第16-18页 |
·实验方法 | 第18-22页 |
·细胞培养分离病毒 | 第18页 |
·引物设计与合成 | 第18页 |
·单纯疱疹病毒DNA提取 | 第18-19页 |
·目的基因扩增与纯化 | 第19-20页 |
·目的基因克隆 | 第20-21页 |
·gG-2基因的序列测定及同源性分析 | 第21-22页 |
·gG-2基因与gG-1基因的生物信息学分析及比较 | 第22页 |
结果 | 第22-25页 |
讨论 | 第25-28页 |
小结 | 第28-29页 |
第二部分 单纯疱疹病毒2型gG-2“独特区”重组表达质粒的构建及鉴定 | 第29-43页 |
·材料 | 第29-30页 |
·实验方法 | 第30-37页 |
·gG2独特区片段的获取 | 第30-31页 |
·目的基因克隆 | 第31页 |
·酶切及鉴定 | 第31-32页 |
·表达载体的构建 | 第32-35页 |
·阳性克隆pGEX4T-1/T的诱导表达及鉴定 | 第35页 |
·免疫印迹(Western-Blot)检测表达蛋白 | 第35-37页 |
结果 | 第37-40页 |
讨论 | 第40-41页 |
小结 | 第41-43页 |
第三部分 单纯疱疹病毒2型gG-2_T蛋白纯化以及抗原活性初步研究 | 第43-51页 |
·材料 | 第43-44页 |
·实验方法 | 第44-47页 |
·目的基因表达条件的优化 | 第44页 |
·超声裂解条件的优化 | 第44页 |
·表达产物的纯化 | 第44-46页 |
·阳性HSV-2型、HSV-1型病人血清的确定 | 第46页 |
·间接ELISA检测纯化蛋白免疫原性 | 第46页 |
·间接EHSA检测纯化蛋白与HSV-1型的交叉反应 | 第46-47页 |
结果 | 第47-49页 |
讨论 | 第49-50页 |
小结 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-55页 |
综述 | 第55-61页 |
攻读学位期间成果 | 第61-62页 |
缩略语词汇表 | 第62-64页 |
致谢 | 第64-65页 |