| 中文摘要 | 第1-12页 |
| 英文摘要 | 第12-15页 |
| 英文缩略表 | 第15-18页 |
| 1. 前言 | 第18-33页 |
| ·苹果香气成分 | 第18-19页 |
| ·挥发性物质的提取技术 | 第19-20页 |
| ·影响苹果香气成分的因素 | 第20-25页 |
| ·采前因素的影响 | 第20-23页 |
| ·采后因素的影响 | 第23-25页 |
| ·苹果酯类香气成分代谢途径及相关酶 | 第25-28页 |
| ·直链酯类香气成分代谢途径 | 第25-26页 |
| ·支链酯类香气成分代谢途径 | 第26-28页 |
| ·苹果酯类香气成分合成相关酶 | 第28页 |
| ·醇酰基转移酶参与酯类挥发性成分合成的研究进展 | 第28-31页 |
| ·花和果实中的醇酰基转移酶基因 | 第29-31页 |
| ·花和果实中的醇酰基转移酶基因的调控 | 第31页 |
| ·植物挥发性成分的代谢基因工程 | 第31-32页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第32-33页 |
| 2. 材料与方法 | 第33-63页 |
| ·试验材料 | 第33-37页 |
| ·植物材料 | 第33页 |
| ·菌株与质粒 | 第33页 |
| ·酶及生化试剂 | 第33页 |
| ·PCR 引物 | 第33-34页 |
| ·培养基 | 第34-37页 |
| ·实验方法 | 第37-61页 |
| ·植物材料总 RNA 的提取 | 第37页 |
| ·反转录cDNA 第一链的合成 | 第37-38页 |
| ·cDNA 纯化（用于5′RACE） | 第38页 |
| ·对cDNA 进行末端加尾（用于5′RACE） | 第38页 |
| ·PCR 扩增 | 第38-39页 |
| ·连接反应 | 第39-40页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第40页 |
| ·碱法小量质粒 DNA 的提取 | 第40-41页 |
| ·DNA 序列测定 | 第41页 |
| ·苹果醇酰基转移酶cDNA克隆 | 第41-42页 |
| ·Northern 杂交分析 | 第42-45页 |
| ·基因组DNA 提取 | 第45页 |
| ·原核表达苹果醇酰基转移酶MdAAT2 蛋白 | 第45-48页 |
| ·原核表达苹果醇酰基转移酶MdAAT2 蛋白抗体制备及效价测定 | 第48-49页 |
| ·Western blot 检测蛋白表达 | 第49-50页 |
| ·蛋白质免疫荧光原位杂交 | 第50-51页 |
| ·MdAAT2 基因转烟草正义表达载体的构建 | 第51-52页 |
| ·MdAAT2 基因转番茄正义果实特异表达载体的构建 | 第52-55页 |
| ·根癌农杆菌LBA4404感受态细胞的制备与转化 | 第55-56页 |
| ·农杆菌介导的烟草的转化 | 第56-57页 |
| ·农杆菌介导的番茄的转化 | 第57页 |
| ·转基因植株的检测 | 第57-58页 |
| ·挥发性成分测定 | 第58页 |
| ·乙烯释放速率测定 | 第58-59页 |
| ·脂氧合酶（LOX）活性测定 | 第59页 |
| ·丙酮酸脱羧酶（PDC）和醛脱氢酶（ADH）活性测定 | 第59页 |
| ·醇酰基转移酶（AAT）活性测定 | 第59-60页 |
| ·组织圆片试验 | 第60页 |
| ·蚜虫选择试验 | 第60页 |
| ·本研究使用的软件 | 第60-61页 |
| ·材料处理方法 | 第61-63页 |
| ·采后苹果果实1-MCP 处理 | 第61页 |
| ·不同信号物质处理冷藏后的苹果果实 | 第61-63页 |
| 3. 结果与分析 | 第63-104页 |
| ·苹果挥发性成分分析 | 第63-67页 |
| ·SPME 提取苹果挥发性成分分析条件的确定 | 第63-65页 |
| ·采后成熟金帅苹果挥发性成分分析 | 第65-67页 |
| ·苹果醇酰基转移酶基因(MdAAT)的分离 | 第67-69页 |
| ·MdAAT 中间片段的分离 | 第67页 |
| ·MdAAT 5’片段的分离（以MdAAT2 为例） | 第67-68页 |
| ·MdAAT 3’片段的分离（以MdAAT2 为例） | 第68页 |
| ·MdAAT 全长cDNA 的分离（以MdAAT2 为例） | 第68-69页 |
| ·苹果醇酰基转移酶基因(MdAAT)的序列分析 | 第69-75页 |
| ·MdAAT2 在大肠杆菌中的表达、抗体制备及效价测定 | 第75-79页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第76页 |
| ·重组蛋白表达与SDS-PAGE 分析 | 第76-77页 |
| ·pET30a-MdAAT 重组蛋白亲和纯化及抗血清效价测定 | 第77-79页 |
| ·MdAAT2 重组蛋白功能鉴定 | 第79-80页 |
| ·可溶性MdAAT2 重组蛋白的鉴定 | 第79页 |
| ·重组蛋白酶活鉴定 | 第79-80页 |
| ·MdAAT2 的表达特性及挥发性酯类成分分析 | 第80-87页 |
| ·MdAAT2 组织器官表达特性 | 第80-82页 |
| ·MdAAT2在果实发育和成熟期间的表达特性 | 第82-87页 |
| ·苹果贮后酯类挥发性成分的恢复及调控机制 | 第87-95页 |
| ·SA，ETH和MeJA对内部乙烯（IEC）和酯类挥发性成分合成的影响 | 第87-88页 |
| ·SA，ETH 和MeJA 对MdAAT2 表达及酶活性的影响 | 第88-90页 |
| ·SA，ETH 和MeJA 对乙烯合成和信号转导相关基因表达的影响 | 第90-93页 |
| ·SA，ETH 和MeJA 对酯类代谢途径相关酶活性的影响 | 第93-95页 |
| ·MdAAT2 基因在烟草中超表达对烟草挥发性成分代谢的影响 | 第95-99页 |
| ·转基因烟草表达载体P81121-MdAAT2 的构建及转基因烟草鉴定 | 第95-96页 |
| ·转基因烟草挥发性成分分析 | 第96-98页 |
| ·转基因烟草对蚜虫取食行为的影响 | 第98-99页 |
| ·MdAAT2 基因在番茄果实特异表达对番茄果实香气成分的影响 | 第99-104页 |
| ·筛选适合转化的番茄自交系品种 | 第99页 |
| ·番茄果实特异表达载体p81121-TE8MdAAT2 的构建 | 第99-101页 |
| ·转基因番茄果实挥发性成分分析 | 第101-104页 |
| 4. 讨论 | 第104-111页 |
| ·苹果酯类挥发性成分的提取与检测 | 第104-105页 |
| ·苹果酯类挥发性成分提取条件的选择 | 第104页 |
| ·苹果酯类挥发性成分分析 | 第104-105页 |
| ·MdAAT2 基因属于植物酰基转移酶BAHD 家族 | 第105页 |
| ·MdAAT2 基因参与了苹果果实酯类挥发性成分的合成 | 第105-108页 |
| ·SA，ETH 和MeJA 对贮后酯类挥发性成分恢复的调控机制 | 第108-109页 |
| ·烟草和番茄酯类代谢工程 | 第109-111页 |
| 5. 结论 | 第111-114页 |
| 参考文献 | 第114-124页 |
| 附录 | 第124-125页 |
| 致谢 | 第125-126页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第126页 |
