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辣椒抗疫病相关基因的分析及QTL定位

中文摘要第1-13页
英文摘要第13-15页
前言第15-18页
第一章 文献综述第18-50页
 第一节 辣椒疫病的研究进展第18-29页
  1 辣椒疫病的主要症状第18页
  2 辣椒疫病的病原学研究第18-20页
  3 辣椒疫病的发生发展规律第20-21页
  4 辣椒疫病的防治第21-26页
   ·选用、培育抗病品种防治辣椒疫病第21-22页
   ·利用栽培技术防治辣椒疫病第22-23页
   ·化学药剂防治辣椒疫病第23-24页
   ·利用生物方法来防治辣椒疫病第24-26页
  5 利用生物技术防治辣椒疫病第26-27页
  6 今后的发展方向第27-29页
 第二节 植物抗病基因同源序列及其应用第29-38页
  1 已经克隆的植物抗病基因及其基因产物结构第29-31页
  2 RGA-克隆植物抗病基因的新策略第31-33页
  3 RGA的主要应用第33-36页
   ·RGA在克隆与定位抗病基因和分子辅助育种上的应用第33-35页
   ·RGA在品种鉴定上的应用第35页
   ·RGA在构建遗传图谱上的应用第35页
   ·RGA在抗病基因分子进化研究上的应用第35-36页
  4 RGA克隆与定位抗病基因上存在的问题与展望第36-38页
 第三节 DNA标记技术在辣椒上的应用第38-48页
  1 DNA分子标记的主要技术第38-41页
   ·基于Southern杂交技术的分子标记第38-39页
   ·基于PCR技术的分子标记第39-40页
   ·以基因组序列为基础的分子标记第40-41页
  2 用分子标记分析亲缘关系和鉴定种子纯度第41-42页
  3 构建辣椒的分子连锁图谱第42-44页
  4 标记辣椒重要的性状第44-45页
  5 分子标记辅助育种第45-48页
 第四节 立题依据和技术路线第48-50页
  1 立题依据第48-49页
  2 研究的技术路线及总体设计第49-50页
第二章 疫病接种方法和品种抗性的比较第50-55页
 1 材料和方法第50-52页
   ·供试辣椒品种和育苗第50页
   ·供试菌株及培养第50-51页
   ·接种方法第51-52页
     ·离体叶片接种法第51页
     ·切茎接种法第51页
     ·灌根接种法第51页
     ·辣椒疫病的分级标准第51-52页
 2 结果和分析第52-54页
   ·离体叶片接种后的发病情况第52页
   ·切茎接种法的发病情况第52-53页
   ·灌根接种法的发病情况第53-54页
 3 结论与讨论第54-55页
第三章 辣椒抗病基因同源序列的分离和分析第55-76页
 1 材料与方法第55-60页
   ·供试的辣椒品种(品系)第55页
   ·所需的试剂第55页
   ·主要仪器设备第55-56页
   ·PCR反应所用引物第56-57页
     ·引物A第56页
     ·引物B第56页
     ·引物C第56-57页
     ·引物D第57页
   ·DNA提取第57-58页
   ·PCR扩增第58页
   ·DNA扩增片段的回收、纯化第58页
   ·纯化片段与pGEM-T载体连接第58-59页
   ·感受态细胞的制备第59页
   ·连接产物的转化第59页
   ·重组质粒的提取第59-60页
   ·重组质粒的分类第60页
   ·测序结果的分析第60页
 2 结果与分析第60-67页
   ·辣椒DNA的提取第60-61页
   ·PCR扩增结果第61页
   ·扩增片段的克隆及质粒酶切分类的结果第61页
   ·测序结果及序列的BLAST分析第61-66页
   ·DNA序列及其推导的蛋白质序列的同源性分析第66-67页
 3 结论与讨论第67-76页
   ·在进行抗病基因同源序列扩增时,选择合适的引物相当重要第67-70页
   ·利用抗病基因保守区域设计简并引物,扩增片段大多与抗病性有关第70-72页
   ·从感病品种中也能扩增到与抗病性有关的片段第72页
   ·可将RGA转换成CAPS标记或SCAR标记用于分子辅助育种第72-73页
   ·RGA作为分子标记用于遗传作图第73页
   ·RGA用于研究抗病基因的分子进化机理第73-74页
   ·RGA用于品种鉴定第74页
   ·分子系统树在分子生物学与进化上的应用第74-75页
   ·回收、克隆过程中存在片段丢失现象第75-76页
第四章 利用差异显示技术克隆辣椒抗疫病相关基因的初步研究第76-85页
 1 材料与方法第76-80页
   ·供试材料第76-77页
     ·供试辣椒品种第76-77页
     ·供试病原菌第77页
     ·供试试剂第77页
   ·试验方法第77-80页
     ·总RNA提取第77页
     ·RT及RT-PCR反应第77-79页
     ·6%聚丙烯酰胺凝胶的制备及电泳第79页
     ·银染程序第79页
     ·聚丙烯酰胺凝胶中差异条带的回收及再扩增第79-80页
     ·琼脂糖凝胶中回收片段、T-克隆及测序第80页
     ·差异序列分析比较第80页
 2 结果与分析第80-83页
   ·RNA的提取第80页
   ·反转录和mRNA差异显示第80-82页
   ·差异片段的序列分析第82-83页
 3 讨论第83-85页
   ·差异显示技术在分析辣椒抗疫病相关基因的意义第83页
   ·差异显示技术在克隆抗病基因上的前景第83-84页
   ·进行mRNA差异显示时的一些问题?第84-85页
第五章 辣椒抗疫病遗传规律的初步研究第85-94页
 1 材料和方法第85-86页
   ·供试品种第85页
   ·供试病原菌第85页
   ·抗病性分析第85-86页
 2 结果与分析第86-92页
   ·接种后的发病情况第86-90页
   ·抗病性分析结果第90-92页
 3 结论与讨论第92-94页
   ·93-100-17-1-0×茄门组合是研究辣椒抗疫病的好材料第92页
   ·93-100-17-1-0的抗疫病性状可能是由寡基因或多基因所控制第92-93页
   ·93-100-17-1-0×茄门的F2群体适合于QTL分析第93-94页
第六章 辣椒抗疫病基因的QTL定位第94-112页
 1 材料与方法第94-98页
   ·作图群体的建立第94-95页
   ·主要仪器设备和所需试剂第95页
   ·抗病性鉴定第95页
   ·AFLP分子标记和连锁图谱的构建第95-98页
     ·DNA提取第95页
     ·AFLP分析第95-98页
     ·遗传图谱的构建和QTL定位第98页
 2 结果与分析第98-107页
   ·抗病性分析第98页
   ·AFLP分析结果第98-101页
   ·遗传连锁图谱及QTL分析第101-107页
 3 结论与讨论第107-112页
   ·93-100-17-1-0×茄门的F2群体为合适的作图群体第107-109页
   ·AFLP是适合用于研究辣椒的分子标记第109-110页
   ·QTL定位方法和提高QTL定位的精度第110页
   ·有关抗疫病基因的定位和克隆第110-112页
全文结论第112-114页
参考文献第114-126页
附录一 部分实验材料果实图片第126-128页
附录二 接种图片第128-129页
附录三 GenBank收录的部分序列第129-136页
附录四 BLAST检索第136-141页
附件五 论文中所用的缩略词第141-142页
附件六 测序报告第142-148页
致谢第148-149页
作者简历第149页

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