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天南星凝集素和石蒜凝集素基因的克隆及抗虫研究

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-8页
引言第8-9页
第一章 文献综述第9-30页
第二章 天南星凝集素基因的克隆第30-51页
 一、 材料与试剂第30页
 二、 实验方法第30-42页
  (一) 通过3'RACE获得目的基因的3'端片断第30-35页
  (二) 通过5'RACE获得目的基因的5'端片断第35-38页
  (三) 扩增全长目的基因第38-39页
  (四) Southern blot分析第39-42页
  (五) Northern blot分析第42页
 三、 结果和讨论第42-51页
  (一) AHA全长cDNA序列及分析第42-46页
  (二) AHA和其它的单子叶植物甘露糖结合凝集素的序列比较第46-47页
  (三) 分析AHA的二级结构和三级结构第47-49页
  (四) Southern blot分析第49页
  (五) Northern blot分析第49-51页
第三章 天南星凝集素基因的原核表达、蛋白纯化和抗虫分析第51-66页
 一、 材料与试剂第51-52页
 二、 实验方法第52-59页
  (一) 原核表达载体的构建第52-53页
  (二) 目的蛋白的诱导表达及纯化第53-57页
  (三) 蚜虫人工饲养与纯化的天南星凝集素抗蚜效应测定第57-59页
 三、 结果和讨论第59-66页
  (一) 原核表达载体的构建及分析第59-60页
  (二) 目的蛋白的诱导表达结果第60-61页
  (三) 不同时间诱导的目的蛋白的表达分析第61页
  (四) 表达产物的Westernblot分析第61-62页
  (五) 天南星凝集素重组蛋白的纯化第62-63页
  (六) 天南星凝集素重组蛋白对蚜虫的抗性结果分析第63-66页
第四章 天南星凝集素基因转化烟草及抗蚜虫分析第66-80页
 一、 材料与试剂第66-67页
 二、 实验方法第67-76页
  (一) 植物表达载体pBI121-AHA的构建第67-72页
  (二) 叶盘法转化烟草第72-73页
  (三) 转基因植株的分子检测第73-75页
  (四) 转基因阳性植株的抗蚜虫分析第75-76页
 三、 结果和讨论第76-80页
  (一) 表达载体pBI121-AHA的构建及分析第76-77页
  (二) 转基因植株的分子检测第77-78页
  (三) 转基因植株的抗虫结果及分析第78-80页
第五章 石蒜凝集素基因的克隆第80-86页
 一、 材料与试剂第80页
 二、 实验方法第80-81页
  (一) 石蒜凝集素基因的克隆第80-81页
  (二) Western blot分析石蒜凝集素成熟蛋白第81页
  (三) Southern blot分析石蒜基因组DNA第81页
  (四) Northern blot分析石蒜各种组织中lra的表达情况第81页
 三、 结果和讨论第81-86页
  (一) 石蒜凝集素基因的序列和分析第81-83页
  (二) Southern blot结果分析第83页
  (三) Northern blot结果分析第83-84页
  (四) Western blot结果分析第84-86页
参考文献第86-100页
小结第100-101页
致谢第101-102页
附录第102-103页
发表论文第103-104页

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