| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-28页 |
| ·病原学 | 第14-17页 |
| ·分类 | 第14-15页 |
| ·形态结构与理化特性 | 第15页 |
| ·培养特性 | 第15页 |
| ·PCV 分子生物学 | 第15-17页 |
| ·PCV2 诱导免疫抑制机理的研究进展 | 第17-20页 |
| ·组织学病理变化 | 第18页 |
| ·对树突状细胞的影响 | 第18页 |
| ·对单核/巨噬细胞的影响 | 第18-19页 |
| ·细胞因子的变化 | 第19页 |
| ·对T 淋巴细胞和B 淋巴细胞的作用 | 第19-20页 |
| ·猪圆环病毒诊断技术的研究进展 | 第20-27页 |
| ·诊断判定标准 | 第20页 |
| ·实验室诊断技术 | 第20-27页 |
| ·研究的目的和意义 | 第27-28页 |
| 第二章 猪圆环病毒1 型IPMA 抗体检测方法的建立及应用 | 第28-36页 |
| ·材料和方法 | 第28-31页 |
| ·病毒、抗体、细胞 | 第28-29页 |
| ·培养基及主要试剂 | 第29页 |
| ·主要仪器设备 | 第29页 |
| ·PCR 鉴别试验 | 第29页 |
| ·病毒增殖与毒价测定 | 第29-30页 |
| ·IPMA 反应板的制备 | 第30页 |
| ·IPMA 操作程序 | 第30页 |
| ·PCV1 与PCV2 血清学交叉反应测定 | 第30页 |
| ·PCV1-IPMA 特异性、敏感性和重复性试验 | 第30页 |
| ·PCV1-IPMA 与ELISA 符合试验 | 第30-31页 |
| ·临床血清样品的检测 | 第31页 |
| ·结果 | 第31-34页 |
| ·PCV1 和PCV2 毒种鉴定 | 第31页 |
| ·PCV1-IPMA 反应条件的测定 | 第31-32页 |
| ·PCV1 与PCV2 血清抗体交叉反应测定 | 第32-33页 |
| ·PCV1-IPMA 特异性、敏感性和重复性试验 | 第33页 |
| ·IPMA 与ELISA 符合试验 | 第33页 |
| ·对临床样品检测结果 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 抗猪圆环病毒1 型CAP 蛋白的表达及活性鉴定 | 第36-42页 |
| ·材料与方法 | 第36-38页 |
| ·病毒、细胞系及试剂 | 第36-37页 |
| ·主要仪器 | 第37页 |
| ·昆虫细胞Sf-21 株的培养 | 第37页 |
| ·重组Cap 蛋白的表达及最佳收获时间的确定 | 第37页 |
| ·重组蛋白的表达及纯化 | 第37-38页 |
| ·纯化的重组蛋白SDS-PAGE 和Western blot 分析 | 第38页 |
| ·兔抗PCV1-rCap 蛋白和PCV2-rCap 蛋白高免血清的制备 | 第38页 |
| ·两种病毒重组Cap 蛋白血清学交叉反应试验 | 第38页 |
| ·结果 | 第38-41页 |
| ·重组Cap 蛋白的表达、最佳收获时间的确定 | 第38-39页 |
| ·重组蛋白纯化及Western blot 分析结果 | 第39-40页 |
| ·IPMA 检测兔抗PCV1-rCap 和PCV2-rCap 高免血清交叉反应 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| 第四章 抗猪圆环病毒1 型和2 型CAP 蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 | 第42-52页 |
| ·材料和方法 | 第43-45页 |
| ·细胞、毒种、试验动物及试剂 | 第43页 |
| ·主要仪器 | 第43页 |
| ·重组PCV1-Cap 蛋白和PCV2-Cap 蛋白表达纯化 | 第43页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第43-44页 |
| ·单克隆抗体的鉴定 | 第44-45页 |
| ·结果 | 第45-49页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第45页 |
| ·单抗亚类的鉴定 | 第45-46页 |
| ·单抗效价测定 | 第46页 |
| ·单抗反应特性鉴定 | 第46-47页 |
| ·免疫过氧化物酶单层细胞试验 | 第47-48页 |
| ·单抗与病毒抗原交叉反应试验 | 第48页 |
| ·单抗中和活性测定 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-52页 |
| ·关于杂交瘤细胞融合试验 | 第49-50页 |
| ·关于PCV1 单克隆抗体 | 第50页 |
| ·关于PCV2 单克隆抗体 | 第50-52页 |
| 第五章 检测猪圆环病毒2 型中和抗体阻断ELISA 的建立及应用 | 第52-61页 |
| ·材料和方法 | 第53-55页 |
| ·病毒、抗体、细胞及试剂 | 第53页 |
| ·主要仪器设备 | 第53页 |
| ·抗原的制备 | 第53页 |
| ·单克隆抗体纯化及辣根过氧化物酶标记 | 第53-54页 |
| ·阻断ELISA 术式 | 第54页 |
| ·阻断ELISA 反应条件的确定 | 第54页 |
| ·阻断ELISA 临界值确定 | 第54页 |
| ·阻断ELISA 与常规IPMA 对比试验 | 第54页 |
| ·阻断ELISA 与血清中和试验比较 | 第54-55页 |
| ·阻断ELISA 交叉反应试验和重复性试验 | 第55页 |
| ·检测血清样品来源 | 第55页 |
| ·结果 | 第55-59页 |
| ·单克隆抗体纯化及辣根过氧化物酶记抗体制备 | 第55-56页 |
| ·阻断ELISA 反应条件的确定 | 第56页 |
| ·不同抗体水平血清样品检测试验 | 第56-57页 |
| ·阻断ELISA 临界值的确定 | 第57页 |
| ·阻断ELISA 与IPMA 符合性试验 | 第57页 |
| ·中和试验和阻断ELISA 检测结果比较 | 第57-58页 |
| ·血清交叉试验与重复性试验 | 第58页 |
| ·对试验猪血清抗体的检测 | 第58-59页 |
| ·对临床送检猪血清抗体的检测 | 第59页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| 第六章 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
| 附录 | 第70-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 作者简历 | 第75页 |
