| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 一 文献综述 | 第11-25页 |
| 1 烟草的价值及抗病研究现状 | 第11-17页 |
| ·烟草的价值 | 第11-13页 |
| ·烟草的文化价值 | 第11-12页 |
| ·烟草的经济价值 | 第12页 |
| ·烟草的药用价值 | 第12-13页 |
| ·烟草的病害研究现状 | 第13-17页 |
| ·烟草的常见病害 | 第13-15页 |
| ·烟草抗病毒病害基因工程的研究进展 | 第15-17页 |
| 2 植物抗病蛋白(R)防卫反应及研究进展 | 第17-21页 |
| ·植物防卫反应 | 第18-19页 |
| ·预存性的防卫反应 | 第18页 |
| ·诱导性的防卫反应 | 第18-19页 |
| ·植物抗病蛋白(R)防卫反应的信号元件 | 第19-21页 |
| ·信号元件 EDS1、NDR1 | 第19页 |
| ·信号元件 NPR1 | 第19页 |
| ·信号元件 RAR1、SGT1 | 第19-21页 |
| 3 反义核酸技术及研究进展 | 第21-24页 |
| ·反义核酸的作用机理 | 第21页 |
| ·反义核酸技术的应用 | 第21-24页 |
| ·反义核酸技术在植物上的应用 | 第21-23页 |
| ·反义核酸技术在细菌、病毒上的应用 | 第23-24页 |
| ·反义核酸的发展前景 | 第24页 |
| 4 本研究的目的意义 | 第24-25页 |
| 二 材料与方法 | 第25-41页 |
| 1 烟草 SGT1 、RAR1 反义表达载体的构建及转化烟草 | 第25-34页 |
| ·材料与仪器 | 第25-26页 |
| ·供试的植物材料 | 第25页 |
| ·供试的菌株及载体 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25-26页 |
| ·主要仪器设备 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-34页 |
| ·试验设计 | 第26页 |
| ·目的片段的获得 | 第26-28页 |
| ·植物反义表达载体 pCAMBIA1301-SGT1 的构建 | 第28-32页 |
| ·植物反义表达载体 pCAMBIA1301-RAR1 的构建 | 第32-33页 |
| ·反义表达载体转化农杆菌 LBA4404 | 第33页 |
| ·叶盘法转化烟草无菌苗及分化 | 第33-34页 |
| 2 烟草阳性植株的鉴定 | 第34-38页 |
| ·材料与仪器 | 第34-35页 |
| ·供试的植物材料 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34-35页 |
| ·主要仪器设备 | 第35页 |
| ·方法 | 第35-38页 |
| ·抗性苗分子鉴定 | 第35页 |
| ·GUS 的组织化学染色检测 | 第35-36页 |
| ·RT-PCR 检测阳性株 | 第36-38页 |
| 3 转基因烟草植株的抗病功能检测 | 第38-41页 |
| ·材料与仪器 | 第38-39页 |
| ·供试材料 | 第38页 |
| ·主要试剂 | 第38页 |
| ·主要仪器设备 | 第38-39页 |
| ·方法 | 第39-41页 |
| ·试验设计 | 第39页 |
| ·汁液摩擦接种诱发 | 第39页 |
| ·叶绿素的提取及测定 | 第39-41页 |
| 三 结果与分析 | 第41-59页 |
| 1 目的片段的扩增 | 第41页 |
| 2 植物反义表达载体 pCAMBIA1301-SGT1 的构建 | 第41-43页 |
| ·中间载体 PupTn-SGT1 的构建 | 第41-42页 |
| ·反义表达载体 pCAMBIA1301-SGT1 的构建 | 第42页 |
| ·反义表达载体 pCAMBIA1301-SGT1 的测序比对图 | 第42-43页 |
| 3 植物反义表达载体 pCAMBIA13 01-RAR1 的构建 | 第43-44页 |
| ·中间载体 PupTn-RAR1 的构建 | 第43页 |
| ·反义表达载体 pCAMBIA1301-RAR1 的构建 | 第43-44页 |
| ·反义表达载体 pCAMBIA1301-RAR1 的测序比对图 | 第44页 |
| 4 标记基因 HptII 检测阳性株 | 第44-45页 |
| 5 GUS 的组织化学染色检测 | 第45-46页 |
| 6 RT-PCR 检测阳性植株 | 第46-48页 |
| ·烟草总 RNA 的提取与电泳检测 | 第46页 |
| ·总 RNA 反转录后不同植株的表达情况 | 第46-48页 |
| 7 转基因阳性植株的获得 | 第48页 |
| 8 转基因烟草植株的抗病毒检测 | 第48-57页 |
| ·接种普通烟草花叶病病毒（TMV） | 第48-50页 |
| ·接种烟草赤星病 | 第50-52页 |
| ·叶绿素的提取及检测 | 第52-57页 |
| 9 讨论 | 第57-59页 |
| 四 本研究的主要结论 | 第59-60页 |
| 1.烟草反义表达载体的构建 | 第59页 |
| 2.转基因阳性烟草植株的获得 | 第59页 |
| 3.T0代转基因烟草植株的抗病性鉴定 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 附录 1部分试剂配方 | 第68页 |
| 附录 2 缩略词 | 第68-69页 |
| 附录 3 转基因烟草照片 | 第69页 |
| 附录 4 载体构建图谱 | 第69-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
