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酿酒酵母PKA催化亚基的活性比较研究

 中文摘要第1-4页
 ABSTRACT第4-7页
第一章 文献综述第7-23页
   ·细胞信号转导概述第7页
   ·酿酒酵母的Ras-cAMP信号通路第7-8页
   ·Ras-cAMP信号通路的主要元件第8-21页
     ·鸟苷酸交换因子Cdc25 和Sdc25第8-11页
     ·酵母的小G蛋白Ras第11页
     ·Ras蛋白的GTP酶激活蛋白Ira1 和Ira2第11-12页
     ·腺苷环化酶 Cdc35/Cyr1 和腺苷酸环化酶相关蛋白 Cap/Srv第12-13页
     ·cAMP磷酸二酯酶Pde1 和Pde2第13页
     ·G 蛋白偶联的受体体系 GPCR(Gpr1-Gpa2)第13-14页
     ·Ras-cAMP通路的主要靶标是蛋白激酶A(PKA)第14-17页
     ·激活压力响应基因的锌指蛋白Msn2 和Msn4第17页
     ·调控细胞进入G_0期的蛋白激酶Rim15第17-18页
     ·调控PDS作用元件锌指蛋白 Gis1第18-19页
     ·双特异性蛋白激酶Yak1第19-21页
     ·ZDS1第21页
   ·酵母中的压力响应第21-22页
   ·本文的主要研究内容第22-23页
第二章 实验材料及方法第23-36页
   ·实验材料第23-28页
     ·菌株与质粒第23页
     ·主要仪器第23-24页
     ·主要试剂第24页
     ·酶制剂第24-25页
     ·培养基第25-26页
     ·主要溶液第26-28页
   ·实验方法第28-36页
     ·PCR反应第28页
     ·琼脂糖凝胶电泳第28-30页
     ·大肠杆菌转化第30页
     ·小规模质粒的快速提取(CTAB法)第30页
     ·限制性内切酶酶切体系第30-31页
     ·DNA片段的回收纯化第31-32页
     ·DNA连接体系第32页
     ·酵母细胞的转化第32页
     ·酵母染色体的快速提取第32-33页
     ·酵母等位基因的分离及遗传分析第33页
     ·不同交配型酵母细胞之间的杂交第33-34页
     ·产孢及四分体孢子拆分第34页
     ·Dilution 实验方法第34页
     ·水浴热击实验第34-35页
     ·平板计数计算细胞存活率第35-36页
第三章 结果与讨论第36-50页
   ·菌株构建第36-39页
   ·实验结果与讨论第39-50页
     ·两个TPK基因产物协同作用活性比较第39-43页
     ·TPK3 基因表达产物在压力抗性系统中功能研究第43-47页
     ·TPK1,TPK2 和TPK3 基因表达产物的PKA活性差异研究第47-50页
第四章 总结与展望第50-52页
   ·工作总结第50-51页
   ·工作展望第51-52页
参考文献第52-57页
致谢第57页

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