| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-24页 |
| ·小麦条锈菌研究概况 | 第13-16页 |
| ·小麦条锈病的危害与分布 | 第13页 |
| ·小麦条锈菌的生物学特征 | 第13-14页 |
| ·小麦条锈菌的侵染过程 | 第14-15页 |
| ·病原真菌孢子与寄主表面的接触芽管和附着胞诱导形成 | 第15-16页 |
| ·植物病原菌角质酶 | 第16-20页 |
| ·角质层 | 第16页 |
| ·角质酶基因的克隆及功能研究 | 第16-18页 |
| ·角质酶在病原菌致病过程中的作用 | 第18-20页 |
| ·克隆全长cDNA 的方法 | 第20-22页 |
| ·电子克隆 | 第20-21页 |
| ·cDNA 文库筛选 | 第21页 |
| ·RACE 技术 | 第21-22页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第22-24页 |
| 第二章 小麦条锈菌角质酶基因的克隆及序列分析 | 第24-43页 |
| ·材料 | 第24页 |
| ·试验用的菌株和条锈菌 | 第24页 |
| ·试剂盒、工具酶、克隆载体、菌种及其他试剂 | 第24页 |
| ·试验方法 | 第24-29页 |
| ·小麦条锈菌角质酶基因相关克隆菌株的查找 | 第24页 |
| ·质粒提取和插入片断的鉴定 | 第24-25页 |
| ·测序鉴定 | 第25-26页 |
| ·内含子序列的获得 | 第26-28页 |
| ·小麦条锈菌角质酶基因序列分析 | 第28-29页 |
| ·结果分析 | 第29-41页 |
| ·小麦条锈菌角质酶基因相关克隆菌株的查找 | 第29-30页 |
| ·质粒提取、插入片段的SfiI 酶切鉴定和测序分析 | 第30页 |
| ·同源性搜索 | 第30-31页 |
| ·氨基酸序列分析 | 第31-37页 |
| ·小麦条锈菌角质酶基因内含子序列分析 | 第37-38页 |
| ·进化树分析 | 第38-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| ·基因的克隆 | 第41-42页 |
| ·小麦条锈菌角质酶基因的序列特征 | 第42-43页 |
| 第三章 小麦条锈菌角质酶基因的表达分析 | 第43-48页 |
| ·材料、试剂及仪器 | 第43页 |
| ·材料 | 第43页 |
| ·试剂 | 第43页 |
| ·仪器 | 第43页 |
| ·实验方法 | 第43-46页 |
| ·小麦叶片总RNA 的提取、纯化与质量检测 | 第43-45页 |
| ·实时定量 PCR 分析 | 第45-46页 |
| ·结果与分析 | 第46-47页 |
| ·小麦叶片总RNA 的提取 | 第46页 |
| ·实时定量PCR 分析 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-48页 |
| 第四章 小麦条锈菌角质酶基因的原核表达和抗体制备 | 第48-60页 |
| ·材料 | 第48页 |
| ·菌种、载体、工具酶与试剂盒 | 第48页 |
| ·试验用家兔 | 第48页 |
| ·实验方法 | 第48-54页 |
| ·目的片段的PCR 扩增 | 第48-49页 |
| ·PCR 产物的纯化、连接 | 第49页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第49页 |
| ·重组质粒PSCUT1-pGEM-T 转化及筛选 | 第49页 |
| ·测序鉴定 | 第49页 |
| ·融合表达载体PSCUT1-pET-32a 的构建 | 第49-50页 |
| ·融合表达载体的转化 | 第50页 |
| ·融合蛋白的诱导表达 | 第50页 |
| ·SDS 聚丙烯酰胺电泳检测 | 第50-51页 |
| ·融合蛋白亲和层析纯纯化 | 第51-52页 |
| ·实验动物免疫 | 第52页 |
| ·抗体的纯化 | 第52-53页 |
| ·抗血清及抗体的效价测定 | 第53-54页 |
| ·Western Blot 分析 | 第54页 |
| ·结果与分析 | 第54-58页 |
| ·小麦条锈菌角质酶ORF 区的扩增及测序验证 | 第54-55页 |
| ·融合表达载体的构建 | 第55-57页 |
| ·抗血清及抗体的免疫学性质 | 第57页 |
| ·抗体的纯化及SDS-PAGE 电泳分析 | 第57页 |
| ·小麦条锈菌角质酶抗体特异性检测 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58-60页 |
| ·ORF 的克隆 | 第58页 |
| ·表达载体的构建 | 第58页 |
| ·表达系统的选择 | 第58-59页 |
| ·融合蛋白诱导表达条件的确定 | 第59页 |
| ·抗体的制备 | 第59页 |
| ·进一步研究设想 | 第59-60页 |
| 第五章 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-69页 |
| 附录1 | 第69-70页 |
| 附录2 | 第70-73页 |
| 附录3 | 第73-74页 |
| 附录4 | 第74-75页 |
| 附录5 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 作者简介 | 第77页 |
