摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-15页 |
第一部分 小麦叶片上潜伏期条锈菌的巢式PCR 检测 | 第15-34页 |
第一章 文献综述 | 第15-19页 |
·小麦条锈病 | 第15-17页 |
·小麦条锈病起源、流行分布与危害 | 第15-16页 |
·小麦条锈菌检测方法 | 第16-17页 |
·巢式PCR | 第17页 |
·巢式PCR 原理 | 第17页 |
·巢式PCR 的优缺点 | 第17页 |
·巢式PCR 的应用 | 第17页 |
·本研究的目的和意义 | 第17-19页 |
第二章 材料与方法 | 第19-25页 |
·试验材料 | 第19页 |
·小麦条锈菌及其他小麦病原菌的繁殖 | 第19页 |
·试剂盒、工具酶、克隆载体及其他试剂 | 第19页 |
·实验仪器 | 第19页 |
·实验方法 | 第19-25页 |
·小麦病原菌及小麦叶片基因组DNA 提取 | 第19-20页 |
·引物设计 | 第20页 |
·PCR 条件的优化 | 第20-21页 |
·引物通用性与特异性检测 | 第21页 |
·巢式PCR 灵敏度检测 | 第21-22页 |
·巢式PCR 产物测序 | 第22-24页 |
·巢式PCR 检测小麦条锈菌侵染的小麦叶片 | 第24-25页 |
第三章 结果与分析 | 第25-29页 |
·DNA 的提取 | 第25页 |
·引物通用性检测 | 第25-26页 |
·引物特异性检测 | 第26页 |
·巢式PCR 灵敏度检测 | 第26-27页 |
·巢式PCR 检测被小麦条锈菌侵染的小麦叶片 | 第27-29页 |
第四章 讨论 | 第29-31页 |
·小麦条锈菌基因组DNA 的提取 | 第29页 |
·巢式PCR 特异性与灵敏度的检测 | 第29页 |
·巢式PCR 检测被小麦条锈菌侵染的小麦叶片 | 第29-30页 |
·进一步研究设想 | 第30-31页 |
第五章 结论 | 第31-32页 |
参考文献 | 第32-34页 |
第二部分 小麦与条锈菌互作中相关激酶类基因的表达谱分析 | 第34-76页 |
第一章 文献综述 | 第34-51页 |
·植物与病原物互作相关基因 | 第34-39页 |
·植物与病原菌互作 | 第34页 |
·病原物无毒基因及其产物 | 第34-36页 |
·植物R 基因及其产物 | 第36-38页 |
·病原物hrp 基因及其产物 | 第38-39页 |
·植物和小麦蛋白激酶 | 第39-48页 |
·蛋白激酶 | 第39-40页 |
·钙依赖蛋白激酶(CDPKs) | 第40-42页 |
·钙/钙调素依赖蛋白激酶(CaMK) | 第42-43页 |
·类受体蛋白激酶(Receptor- like kinases, RLKs) | 第43-45页 |
·促分裂原蛋白激酶(MAPK) | 第45-48页 |
·实时定量RT-PCR(Quantitative reverse transcriptase-PCR) | 第48-50页 |
·定量RT-PCR 的原理和分类 | 第48页 |
·实时荧光定量反转录PCR | 第48-49页 |
·定量RT-PCR 在植物学研究中的应用 | 第49-50页 |
·本研究的目的和意义 | 第50-51页 |
第二章 试验材料与方法 | 第51-57页 |
·试验材料 | 第51页 |
·实验用小麦叶片及条锈菌的采集 | 第51页 |
·试剂 | 第51页 |
·试验方法 | 第51-52页 |
·小麦叶片总RNA 的提取与质量检测 | 第51-52页 |
·RNA 反转录 | 第52页 |
·RNA 反转录合成cDNA 第一链 | 第52页 |
·反转录产物检测 | 第52页 |
·蛋白激酶类基因的筛选 | 第52-53页 |
·斑点杂交(Dot blot) | 第53-54页 |
·PCR 扩增各激酶类基因片段 | 第53页 |
·杂交膜制备 | 第53页 |
·寡核苷酸探针制备 | 第53-54页 |
·杂交 | 第54页 |
·洗膜 | 第54页 |
·数据处理 | 第54页 |
·实时荧光定量PCR | 第54-57页 |
·实时荧光定量PCR 条件的优化 | 第54页 |
·PCR 引物设计 | 第54-55页 |
·利用内参调整cDNA 模板量 | 第55页 |
·内参标准曲线的建立 | 第55页 |
·蛋白激酶类基因的荧光定量PCR | 第55-56页 |
·实时荧光定量PCR 数据处理 | 第56-57页 |
第三章 结果与分析 | 第57-66页 |
·小麦叶片总RNA 的提取与质量检测 | 第57页 |
·反转录产物检测 | 第57-58页 |
·斑点杂交结果 | 第58页 |
·实时荧光定量PCR 条件的优化 | 第58-59页 |
·18 SrRNA 标准曲线的建立 | 第59-60页 |
·激酶类基因实时荧光定量PCR 结果 | 第60-66页 |
·类受体蛋白激酶(Receptor- like kinases, RLKs) | 第60-61页 |
·促分裂原蛋白激酶(MAPK) | 第61-63页 |
·钙/钙调素依赖蛋白激酶(CaMK) | 第63页 |
·丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(serine-threonine kinase) | 第63-65页 |
·MOB(Mps one binder kinase activator-like 1A) | 第65页 |
·糖类激酶(carbohydrate kinase-like protein ) | 第65-66页 |
第四章 讨论 | 第66-69页 |
·斑点杂交(Dot blot) | 第66页 |
·实时荧光定量PCR 扩增条件优化 | 第66页 |
·实时荧光定量PCR 影响因素及注意事项 | 第66-67页 |
·实时荧光定量PCR 分析激酶表达变化 | 第67-68页 |
·进一步研究设想 | 第68-69页 |
第五章 结论 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-76页 |
附录1 | 第76-78页 |
附录2 | 第78-79页 |
致谢 | 第79-80页 |
作者简介 | 第80页 |