摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
缩略语表 | 第12-13页 |
引言 | 第13-14页 |
上篇 文献综述 | 第14-29页 |
第一章 辣椒抗病研究进展 | 第15-29页 |
1 辣椒黄瓜花叶病毒的危害性及研究现状 | 第15-18页 |
2 植物分子标记研究 | 第18-22页 |
·主要分子遗传标记技术 | 第19-21页 |
·RFLP标记 | 第19页 |
·RAPD标记 | 第19页 |
·AFLP标记 | 第19-20页 |
·SNP标记 | 第20-21页 |
·分子标记在辣椒遗传育种中的应用 | 第21-22页 |
·连锁图谱的构建 | 第21-22页 |
·重要性状的分子标记研究 | 第22页 |
3 植物抗病基因的研究进展 | 第22-26页 |
·植物抗病相关基因的克隆方法 | 第22-26页 |
·转座子标签技术(Transponson tagging) | 第23页 |
·mRNA差异显示法(mRNA differential display) | 第23-25页 |
·植物抗病同源序列候选基因法 | 第25-26页 |
4 辣椒抗病相关的生理生化特性的研究 | 第26-29页 |
·防御酶与植物抗、感病的关系 | 第27-28页 |
·可溶性蛋白与植物抗、感病的关系 | 第28-29页 |
下篇 研究进展 | 第29-76页 |
第二章 辣椒抗CMV同源序列的克隆与分析 | 第30-43页 |
1 材料与方法 | 第30-34页 |
·植物材料 | 第30-31页 |
·菌种及质粒 | 第30-31页 |
·生化试剂 | 第31页 |
·实验方法 | 第31-34页 |
·辣椒总DNA的提取及检测 | 第31页 |
·PCR引物的设计与合成 | 第31-32页 |
·PCR扩增 | 第32-33页 |
·PCR扩增及特异条带的回收 | 第33页 |
·回收产物的克隆 | 第33-34页 |
·DNA测序及序列分析 | 第34页 |
2 结果与分析 | 第34-42页 |
·辣椒总DNA的检测 | 第34-35页 |
·目的片段的扩增 | 第35页 |
·目的DNA片段的回收、克隆及阳性克隆的鉴定 | 第35页 |
·辣椒RGAs的测序及聚类分析 | 第35-36页 |
·目标片段的碱基序列同源性检索 | 第36-39页 |
·辣椒RGAs与已知植物抗病基因相应区域的氨基酸序列相似性比较 | 第39-40页 |
·RGAs间Ka/Ks的计算 | 第40-42页 |
3 讨论 | 第42-43页 |
第三章 利用mRNA差异显示技术分离和克隆辣椒抗黄瓜花叶病毒相关基因片段 | 第43-57页 |
1 材料与方法 | 第43-49页 |
·材料 | 第43-44页 |
·菌株与质粒 | 第44页 |
·主要生化试剂及酶类 | 第44页 |
·PCR引物 | 第44页 |
·方法 | 第44-49页 |
·辣椒CMV病毒准备与接种 | 第44-45页 |
·辣椒CMV抗病性苗期鉴定 | 第45页 |
·实验工具的处理 | 第45页 |
·总RNA的提取 | 第45-47页 |
·cDNA第一链合成及PCR扩增 | 第47页 |
·PCR扩增产物凝胶电泳及银染 | 第47-48页 |
·差异cDNA回收和二次PCR扩增 | 第48页 |
·二次PCR扩增产物回收、纯化及cDNA片段的克隆、测序 | 第48-49页 |
2 结果与分析 | 第49-55页 |
·辣椒嫩叶总RNA的提取及纯化 | 第49页 |
·混合取样的科学性分析 | 第49页 |
·mRNA差异显示分析 | 第49-55页 |
·适用于辣椒DDRT-PCR引物组合的筛选 | 第49-50页 |
·差异cDNA片段的获得 | 第50-55页 |
3 讨论 | 第55-57页 |
·辣椒mRNA差异显示体系的建立 | 第55-56页 |
·关于DDRT-PCR的假阳性 | 第56-57页 |
第四章 辣椒抗CMV的AFLP分子标记筛选 | 第57-67页 |
1 材料与方法 | 第57-61页 |
·材料 | 第57-58页 |
·试验方法 | 第58-61页 |
·试剂的配制 | 第58页 |
·辣椒CMV抗病性鉴定 | 第58-59页 |
·亲本和F_2代植株DNA的提取 | 第59页 |
·抗、感基因池的构建 | 第59页 |
·AFLP扩增反应体系的构建 | 第59-61页 |
·6%聚丙烯酞胺凝胶电泳检测 | 第61页 |
·带型统计方法 | 第61页 |
2 结果与分析 | 第61-66页 |
·辣椒基因组DNA提取质量及预扩产物检测 | 第61-62页 |
·植株抗病性鉴定结果 | 第62-63页 |
·AFLP体系优化结果 | 第63-64页 |
·AFLP标记揭示的多态性 | 第64-66页 |
3 讨论 | 第66-67页 |
第五章 黄瓜花叶病毒诱导下辣椒可溶性蛋白及防御酶系活性变化的研究 | 第67-76页 |
1 材料与方法 | 第67-70页 |
·材料 | 第67-68页 |
·供试材料 | 第67-68页 |
·试验方法 | 第68-70页 |
·病毒及接种方法 | 第68页 |
·酶液提取 | 第68页 |
·病情调查 | 第68页 |
·生理生化指标测定 | 第68-70页 |
2 结果与分析 | 第70-73页 |
·接种材料的病情调查 | 第70-71页 |
·CMV不同处理时间对辣椒超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响 | 第71页 |
·CMV不同处理时间对辣椒过氧化物歧化酶(POD)活性的影响 | 第71-72页 |
·CMV不同处理时间对辣椒过氧化氢酶(CAT)活性的影响 | 第72-73页 |
·CMV不同处理时间对辣椒可溶性蛋白含量及叶绿素含量的影响 | 第73页 |
3 讨论 | 第73-76页 |
全文结论 | 第76-78页 |
创新之处 | 第78-80页 |
参考文献 | 第80-90页 |
攻读硕士期间发表的论文 | 第90-92页 |
致谢 | 第92页 |