| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 第一章 前言 | 第8-20页 |
| ·对虾白斑综合症病毒(WSSV)的概述 | 第8-14页 |
| ·对虾白斑病的流行及症状 | 第8页 |
| ·对虾白斑病的宿主 | 第8-9页 |
| ·WSSV 的分类地位 | 第9页 |
| ·WSSV 的基因组研究 | 第9-11页 |
| ·WSSV 的结构蛋白 | 第11-12页 |
| ·WSSV 感染的分子机制 | 第12页 |
| ·WSSV 的诊断方法 | 第12-14页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的防治进展 | 第14页 |
| ·毕赤酵母表达系统 | 第14-19页 |
| ·巴氏毕赤酵母表达外源蛋白的优势 | 第15-16页 |
| ·巴氏毕赤酵母表达宿主菌的种类 | 第16页 |
| ·巴氏毕赤酵母表达载体 | 第16-17页 |
| ·外源基因的转化方法 | 第17页 |
| ·外源基因整合的方式 | 第17-19页 |
| ·本研究的目的意义 | 第19-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-34页 |
| ·材料 | 第20-23页 |
| ·菌株和质粒 | 第20页 |
| ·动物材料 | 第20页 |
| ·酶与主要生化试剂 | 第20页 |
| ·主要溶液配制 | 第20-22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| ·方法 | 第23-34页 |
| ·技术路线 | 第24-25页 |
| ·vp26 和vp28 基因的扩增及扩增产物的纯化 | 第25-26页 |
| ·vp26 和vp28 基因克隆到T 载体及测序鉴定 | 第26-28页 |
| ·重组毕赤酵母表达载体的构建 | 第28-30页 |
| ·重组毕赤酵母的筛选及鉴定 | 第30-31页 |
| ·重组毕赤酵母的甲醇诱导表达 | 第31-34页 |
| 第三章 结果与分析 | 第34-42页 |
| ·PCR 扩增vp26 和vp28 基因 | 第34页 |
| ·vp26 和vp28 基因的鉴定及分析 | 第34-36页 |
| ·重组表达载体pPIC9K-VP26 和pPIC9K-VP28 的构建及鉴定 | 第36-37页 |
| ·外源基因的导入及重组毕赤酵母的筛选 | 第37-38页 |
| ·重组毕赤酵母小量表达产物的SDS-PAGE 分析 | 第38页 |
| ·重组毕赤酵母小量表达产物的Western blot 分析 | 第38-39页 |
| ·重组毕赤酵母小量表达产物的ELISA 分析 | 第39页 |
| ·重组毕赤酵母的大量表达 | 第39-41页 |
| ·表达蛋白的纯化及验证 | 第41-42页 |
| 第四章 讨论 | 第42-46页 |
| ·毕赤酵母高效表达的策略 | 第42-44页 |
| ·重组蛋白VP26 和VP28 的表达分析 | 第44-46页 |
| 第五章 结论与展望 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 附录 | 第54-56页 |
| 在学期间发表的学术论文 | 第56页 |
