| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-23页 |
| ·乳酸菌及其产生的细菌素概述 | 第9-12页 |
| ·乳酸菌简介 | 第9-10页 |
| ·细菌素定义及分类 | 第10-11页 |
| ·细菌素的应用 | 第11-12页 |
| ·乳链菌肽的结构特征及生物合成 | 第12-16页 |
| ·乳链菌肽的结构特征 | 第12-13页 |
| ·Nisin 的生物合成及其调控 | 第13-16页 |
| ·乳链菌肽的作用方式 | 第16-19页 |
| ·乳链菌肽的免疫及其抗性机制 | 第19-23页 |
| ·免疫机制 | 第19-20页 |
| ·生理适应机制 | 第20-21页 |
| ·乳链菌肽抗性基因nsr 表达产生的抗性机制 | 第21-23页 |
| 2 引言 | 第23-25页 |
| 3 实验材料与方法 | 第25-42页 |
| ·实验材料 | 第25-29页 |
| ·菌株、质粒及引物 | 第25-26页 |
| ·培养基 | 第26页 |
| ·生化试剂、工具酶和试剂盒 | 第26-27页 |
| ·溶液及缓冲液 | 第27-29页 |
| ·实验方法 | 第29-42页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第29-36页 |
| ·NSR5236A 在乳酸菌中的细胞亚定位 | 第36-38页 |
| ·NSR5236A 体内降解Nisin 活性的测定 | 第38-39页 |
| ·NSR5236A 蛋白的表达与纯化 | 第39页 |
| ·NSRSD5236A 与nisin 的相互作用 | 第39页 |
| ·重组菌及对照菌株生长曲线的测定 | 第39-40页 |
| ·重组菌与对照菌对nisin 的抗性水平测定 | 第40页 |
| ·重组菌与对照菌发酵上清液抑菌活性的定量测定 | 第40-41页 |
| ·NSR 和NSR5236A 在nisin 产生菌中的表达检测 | 第41-42页 |
| 4 实验结果与分析 | 第42-54页 |
| ·表达质粒的构建 | 第42-45页 |
| ·基因nsr 的定点突变 | 第42-43页 |
| ·表达质粒pHM482 的构建 | 第43页 |
| ·NSRSD5236A 与GST 融合表达质粒pSZ321 的构建 | 第43-44页 |
| ·表达质粒pHM582 的构建 | 第44-45页 |
| ·表达质粒pHM581 的构建及鉴定 | 第45页 |
| ·重组表达菌株的鉴定 | 第45页 |
| ·NSR5236A 蛋白的功能分析 | 第45-50页 |
| ·NSR5236A 在乳酸菌中的细胞亚定位 | 第45-46页 |
| ·NSR5236A 体内降解nisin 活性 | 第46-47页 |
| ·NSRSDS236A 蛋白的表达纯化 | 第47-49页 |
| ·NSRSDS236A 对底物 nisin 的结合能力 | 第49-50页 |
| ·NSRS236A 的表达对 nisin 产量的影响 | 第50-54页 |
| ·重组菌与对照菌生长曲线的比较 | 第50页 |
| ·重组菌与对照菌对 nisin 抗性水平的比较 | 第50-52页 |
| ·重组菌与对照菌发酵液上清抑菌活性及产量的比较 | 第52-53页 |
| ·NSRN 和 SRS236A 在 nisin 产生菌中的表达检测 | 第53-54页 |
| 全文讨论 | 第54-56页 |
| 全文总结 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 个人简介 | 第63页 |
| 在校期间发表的论文及科研成果 | 第63页 |
