| 论文创新点 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 第一章 朊蛋白及朊病毒疾病概述 | 第14-35页 |
| 引言 | 第14-15页 |
| 1. 朊病毒蛋白的发现 | 第15-16页 |
| 2. 朊病毒蛋白的研究进展 | 第16-19页 |
| ·"唯蛋白"假说 | 第16页 |
| ·朊蛋白是朊病毒的主要构成成分 | 第16-17页 |
| ·朊病毒蛋白PrP~(Sc)的性质 | 第17-18页 |
| ·朊病毒理论的一些其他观点 | 第18-19页 |
| 3. 朊蛋白的序列和结构 | 第19-22页 |
| ·朊蛋白的一级结构 | 第19-20页 |
| ·朊蛋白的三维结构 | 第20-22页 |
| 4. 朊蛋白的生理功能 | 第22-24页 |
| ·PrP~C的抗氧化功能 | 第22-23页 |
| ·PrP~C对维持神经系统正常功能的作用 | 第23页 |
| ·PrP~C在信号转导及记忆形成方面的功能 | 第23-24页 |
| ·PrP~C的抗叠朊作用 | 第24页 |
| ·PrP~C在离子代谢中的作用 | 第24页 |
| 5. 朊蛋白与脂筏 | 第24-27页 |
| ·脂筏的结构 | 第25页 |
| ·脂筏的功能 | 第25-26页 |
| ·脂筏在朊蛋白转运及构象变化中的作用 | 第26-27页 |
| 6. 朊病毒致病的分子机制 | 第27-31页 |
| ·PrP~C和PrP~(Sc)分子生物学特性的比较 | 第28页 |
| ·PrP~C的构象转变 | 第28-30页 |
| ·与PrP~C构象转变相关的蛋白因素 | 第30页 |
| ·PrP~(Sc)的复制及增殖 | 第30-31页 |
| 7. 朊病毒类疾病的诊断及防治 | 第31-33页 |
| ·朊病毒类疾病的诊断 | 第32-33页 |
| ·朊病毒类疾病的防治 | 第33页 |
| 8. 问题和展望 | 第33-35页 |
| 第二章 量子点技术的研究进展 | 第35-51页 |
| 引言 | 第35-36页 |
| 1. 量子点的基本特性 | 第36-38页 |
| ·量子点的组成 | 第36-37页 |
| ·量子点的结构 | 第37-38页 |
| 2. 量子点的优越性 | 第38-40页 |
| ·量子点广泛的激发光谱 | 第38页 |
| ·量子点狭窄和对称的荧光谱峰 | 第38页 |
| ·量子点颜色的可控性 | 第38-39页 |
| ·量子点的光稳定性 | 第39页 |
| ·量子点良好的生物相容性 | 第39页 |
| ·量子点的高双光子吸收截面 | 第39-40页 |
| 3. 量子点的合成 | 第40-42页 |
| ·水相中量子点的合成 | 第40-41页 |
| ·有机相中量子点的合成 | 第41页 |
| ·核-壳型量子点的制备 | 第41-42页 |
| 4. 量子点的修饰 | 第42-43页 |
| 5. 量子点对生物分子的标记 | 第43-45页 |
| ·量子点标记生物分子的方法 | 第43-44页 |
| ·量子点标记蛋白 | 第44页 |
| ·量子点标记核酸 | 第44-45页 |
| 6. 量子点的应用 | 第45-50页 |
| ·活细胞中的标记示踪应用 | 第45-46页 |
| ·活体动物中的标记示踪应用 | 第46-47页 |
| ·核酸分子生物学与蛋白质分析方面的应用 | 第47-48页 |
| ·在信号转导方面的应用 | 第48页 |
| ·在微生物检测中的应用 | 第48-49页 |
| ·在靶向药物开发方面的应用 | 第49页 |
| ·其它方面的应用 | 第49-50页 |
| 7. 问题与展望 | 第50-51页 |
| 第三章 PrP真核表达载体及稳定表达RFP标记的PrP的神经瘤细胞系的构建 | 第51-79页 |
| 引言 | 第51页 |
| 1. 实验材料与设备 | 第51-59页 |
| ·实验仪器 | 第51-52页 |
| ·材料与试剂 | 第52-54页 |
| ·溶液及培养基的配置 | 第54-58页 |
| ·常用实验操作 | 第58-59页 |
| 2. 质粒的构建 | 第59-71页 |
| ·真核表达PrP蛋白质粒的构建 | 第59-62页 |
| ·GFP标记的PrP蛋白质粒的构建 | 第62-65页 |
| ·RFP标记的PrP蛋白质粒的构建 | 第65-71页 |
| 3. 蛋白的表达与抗体的制备 | 第71-76页 |
| ·PrP23-231蛋白的表达与纯化 | 第71-73页 |
| ·蛋白的浓缩和定量 | 第73-74页 |
| ·抗PrP23-231抗血清的制备 | 第74-76页 |
| 4. SP-RFP-PrP稳定表达细胞系的筛选 | 第76-77页 |
| ·细胞对G418耐受浓度的确定 | 第76页 |
| ·转染及筛选 | 第76页 |
| ·挑单克隆及扩增 | 第76页 |
| ·鉴定 | 第76-77页 |
| 5. 讨论 | 第77-79页 |
| 第四章 体外验证量子点与朊蛋白的连接及相互作用 | 第79-92页 |
| 引言 | 第79页 |
| 1. 试验材料与方法 | 第79-83页 |
| ·实验仪器 | 第80页 |
| ·实验材料与试剂 | 第80页 |
| ·缓冲液的配置 | 第80-81页 |
| ·常用实验操作 | 第81-83页 |
| 2. 量子点与朊蛋白的结合 | 第83-88页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳证明量子点与朊蛋白的结合 | 第83页 |
| ·超滤证明量子点与朊蛋白的结合 | 第83-85页 |
| ·WesternBlot验证量子点与朊蛋白结合的特异性 | 第85-86页 |
| ·动态光散射法测量子点-朊蛋白复合物的粒径 | 第86-87页 |
| ·原子力显微镜直接观察QDs-PrP复合物 | 第87-88页 |
| 3. 量子点的结合对朊蛋白的影响 | 第88-90页 |
| ·pH环境对QDs-PrP复合物的影响 | 第88-89页 |
| ·量子点的结合对朊蛋白二级结构的影响 | 第89-90页 |
| 4. 讨论 | 第90-92页 |
| 第五章 量子点标记的朊蛋白在活细胞内的示踪研究 | 第92-104页 |
| 引言 | 第92-93页 |
| 1. 实验材料与方法 | 第93页 |
| ·实验仪器与设备 | 第93页 |
| ·实验材料与试剂耗材 | 第93页 |
| ·溶液及缓冲液的配置 | 第93页 |
| 2. QDs的细胞毒性 | 第93-96页 |
| ·MTT法测定QDs-Ni~(2+)修饰方法对其细胞毒性的影响 | 第94-95页 |
| ·MTT法测定QDs-Ni~(2+)对转染PrP的神经细胞的毒性 | 第95-96页 |
| 3. QDs标记活细胞中的PrPc | 第96-100页 |
| ·QDs与SP-GFP-PrP的共定位 | 第96-97页 |
| ·QDs-PrP~C不同时间点在细胞中的分布 | 第97-98页 |
| ·QDs-PrP~C在单个细胞中的荧光示踪 | 第98-100页 |
| 4. 脂筏对PrP~C运输及定位的作用的研究 | 第100-102页 |
| ·脂筏在PrP~C膜转运中的作用 | 第100-101页 |
| ·脂筏在Prp~C内吞中的作用 | 第101-102页 |
| 5. 讨论 | 第102-104页 |
| 研究总结 | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-113页 |
| 博士期间发表论文 | 第113-114页 |
| 致谢 | 第114页 |
