| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 目录 | 第10-13页 |
| 引言 | 第13-14页 |
| 第一章 G_(A13)与血细胞发生紧密相关 | 第14-52页 |
| 1. 文献综述 | 第14-33页 |
| ·哺乳动物血细胞发生 | 第14-15页 |
| ·影响哺乳动物血细胞原始发生和决定发生的因素 | 第14-15页 |
| ·斑马鱼的血细胞发生 | 第15-17页 |
| ·原始血细胞发生 | 第15-16页 |
| ·血细胞决定发生 | 第16-17页 |
| ·斑马鱼中血细胞发生相关转录因子的时空表达 | 第17-22页 |
| ·Flila | 第18页 |
| ·Draculin(drl) | 第18页 |
| ·Scl | 第18-19页 |
| ·Lmo2 | 第19页 |
| ·gata1和gata2 | 第19-20页 |
| ·Hhex | 第20页 |
| ·Runx1和runx3 | 第20-21页 |
| ·c-myb | 第21-22页 |
| ·斑马鱼造血干细胞相关突变体 | 第22-24页 |
| ·Kugelig(cdx) | 第22页 |
| ·Spadetail(tbx16) | 第22-23页 |
| ·Cloche(未知基因) | 第23页 |
| ·Bloodless(未知基因) | 第23-24页 |
| ·G蛋白家族概述 | 第24-30页 |
| ·G_(α12)家族的直接效应分子 | 第24-28页 |
| ·G_(α12)信号通路的非直接效应因子 | 第28页 |
| ·G_(α12)亚家族的生理和病理学意义 | 第28-30页 |
| ·吗啡啉反义寡核苷酸技术 | 第30-33页 |
| ·吗啡啉的打靶效率,对照及其局限性 | 第31页 |
| ·脱靶效应(off-targeting) | 第31-33页 |
| 2. 材料与方法 | 第33-40页 |
| ·斑马鱼的饲养及受精卵的获取 | 第33页 |
| ·胚胎的去卵膜 | 第33页 |
| ·吗啡啉反义寡聚核苷酸设计和序列信息 | 第33-34页 |
| ·显微注射 | 第34页 |
| ·RNA拯救实验 | 第34-35页 |
| ·胚胎总RNA的提取 | 第35-36页 |
| ·逆转录反应 | 第36页 |
| ·PCR反应 | 第36页 |
| ·蛋白质免疫印迹 | 第36-37页 |
| ·血红素染色 | 第37-38页 |
| ·血管染色 | 第38页 |
| ·原位杂交探针的体外转录合成 | 第38页 |
| ·整体原位杂交 | 第38-40页 |
| 3. 结果 | 第40-48页 |
| ·gua13b的表达谱 | 第40-41页 |
| ·G_(α13)吗啡啉沉默阻碍血细胞发生和血管发生过程 | 第41-44页 |
| ·G_(α13)b缺陷导致血细胞和血管内皮细胞标记基因表达降低 | 第44-46页 |
| ·降低P53的蛋白水平能够部分恢复G_(α13)缺陷表型 | 第46-48页 |
| 4. 讨论 | 第48-52页 |
| ·关于用吗啡啉沉默目标基因技术的探讨 | 第48-49页 |
| ·造血系统缺陷不是由于脉管系统的缺陷引起的 | 第49-50页 |
| ·G_(α13)可能是一种细胞存活因子 | 第50页 |
| ·造血缺陷和血管形成缺陷也可能是一种off-target作用 | 第50-52页 |
| 第二章 LRP8斑马鱼神经发育中的作用 | 第52-81页 |
| 1. 文献综述 | 第52-66页 |
| ·脊椎动物脊髓的构建及其组成 | 第52-56页 |
| ·诱导中枢神经系统形成的早期信号 | 第52-54页 |
| ·前后轴的构建启动脊髓形成 | 第54页 |
| ·脊髓背腹轴的构建以及所包含的细胞类型 | 第54-56页 |
| ·斑马鱼尾部侧线发育概述 | 第56-57页 |
| ·斑马鱼髓鞘的形成 | 第57-59页 |
| ·髓鞘的结构特征及功能上的保守性 | 第58-59页 |
| ·神经胶质细胞发育及髓鞘形成相关基因的突变筛选 | 第59页 |
| ·低密度脂蛋白(LDL)受体(LRP)概述 | 第59-66页 |
| ·LRP的结构特征 | 第60-61页 |
| ·LRP在脉管系统保护中的作用 | 第61页 |
| ·丝氨酸和苏氨酸残基的磷酸化调控LRP的功能 | 第61-62页 |
| ·LRP在细胞迁移方面的作用 | 第62-63页 |
| ·LRP对整联蛋白功能的调节 | 第63页 |
| ·tPA和LRP:这对配体/受体的新功能 | 第63-65页 |
| ·LRP在神经血管单元中的表达 | 第65页 |
| ·LRP膜内蛋白水解的调控 | 第65-66页 |
| 2. 材料与方法 | 第66-68页 |
| ·分段扩增lrp8 cDNA阅读框的引物以及吗啡啉的检测引物 | 第66页 |
| ·Lrp8序列的生物信息学分析 | 第66-67页 |
| ·Lrp8吗啡啉反义寡核苷酸的设计和序列信息 | 第67页 |
| ·原位杂交探针合成及原位杂交 | 第67页 |
| ·斑马鱼胚胎整体免疫组化 | 第67-68页 |
| ·透射电子显微镜观察 | 第68页 |
| 3. 实验结果 | 第68-80页 |
| ·斑马鱼lrp8基因同源物序列的克隆验证 | 第68-72页 |
| ·斑马鱼lrp8转录本在胚胎发育不同时期的表达特征 | 第72-73页 |
| ·斑马鱼lrp8基因缺失抑制背部神经轴突的生长 | 第73-75页 |
| ·斑马鱼lrp8缺失抑制对中央纵向神经束(MLF)的影响 | 第75-77页 |
| ·斑马鱼lrp8缺失对侧部纵向神经束(LLF)的影响 | 第77-80页 |
| 4. 讨论 | 第80-81页 |
| ·lrp8在头部中线处表达暗示其与hedgehog信号通路相关 | 第80-81页 |
| ·lrp8可能通过hedgehog信号通路影响神经胶质细胞的发育 | 第81页 |
| 参考文献 | 第81-103页 |
| 攻博期间发表的与学位论文相关的科研成果 | 第103-104页 |
| 致谢 | 第104-105页 |
| 附录 | 第105页 |
