论文创新点 | 第5-6页 |
主要缩略语 | 第6-7页 |
摘要 | 第7-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
引言 | 第15-17页 |
本研究的技术路线 | 第17-18页 |
第一章 SjAK1生物信息学分析、克隆表达及酶活力测定 | 第18-44页 |
1 材料与方法 | 第18-32页 |
2 结果 | 第32-42页 |
2.1 SjAK1基因的生物信息学分析 | 第32-33页 |
2.2 氨基酸序列比对及系统进化分析 | 第33-36页 |
2.3 SjAK1基因的克隆、表达纯化与多克隆抗血清制备 | 第36-41页 |
2.4 rSjAK1酶活性测定 | 第41-42页 |
3 讨论 | 第42-44页 |
第二章 日本血吸虫不同发育时期SjAK1的表达水平及组织学定位检测 | 第44-54页 |
1 材料与方法 | 第44-48页 |
2 结果 | 第48-52页 |
2.1 荧光定量PCR鉴定SjAK1在不同发育时期虫体中的表达 | 第48-49页 |
2.2 Western blot鉴定SjAK1在不同发育时期虫体中的表达 | 第49页 |
2.3 免疫组织化学法定位SjAK1 | 第49-52页 |
3 讨论 | 第52-54页 |
第三章 rSjAK1对小鼠抗日本血吸虫感染的免疫保护效果及机制研究 | 第54-62页 |
1 材料与方法 | 第54-57页 |
2 结果 | 第57-60页 |
2.1 减虫率和减卵率 | 第57-58页 |
2.2 细胞因子水平变化 | 第58-60页 |
3 讨论 | 第60-62页 |
第四章 体外RNAi实验研究SjAK1在童虫生长发育过程中的功能 | 第62-78页 |
1 材料与方法 | 第62-69页 |
2 结果 | 第69-75页 |
2.1 dsRNA制备与最佳干扰条件筛选 | 第69-70页 |
2.2 Western blot检测干扰童虫后沉默效果 | 第70-71页 |
2.3 体外培养童虫基因沉默后形态学观察 | 第71-74页 |
2.4 Tunel检测SjAK1沉默后童虫细胞凋亡 | 第74-75页 |
3 讨论 | 第75-78页 |
第五章 体外RNAi实验研究SjAK1在虫卵形成过程中的功能 | 第78-91页 |
1 材料与方法 | 第78-82页 |
2 结果 | 第82-89页 |
2.1 SjAK1 dsRNA干扰合抱成虫最佳干扰条件筛选 | 第82-83页 |
2.2 Western blot检测干扰合抱成虫后沉默效果 | 第83页 |
2.3 体外培养合抱成虫SjAK1基因沉默后形态学观察 | 第83-87页 |
2.4 Tunel检测SjAK1沉默后童虫细胞凋亡 | 第87页 |
2.5 荧光定量PCR检测不同发育期雌虫中SjAK1的表达 | 第87-88页 |
2.6 荧光定量PCR检测未成熟卵及成熟卵中SjAK1的表达 | 第88-89页 |
3 讨论 | 第89-91页 |
结论 | 第91-92页 |
参考文献 | 第92-101页 |
综述 | 第101-115页 |
参考文献 | 第110-115页 |
攻读博士期间主要科研成果 | 第115-116页 |
致谢 | 第116-117页 |