摘要 | 第3-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
第一章 MYDGF对2型糖尿病小鼠糖脂代谢及GLP-1合成和分泌的影响 | 第13-39页 |
1.1 前言 | 第13页 |
1.2 实验试剂及仪器 | 第13-16页 |
1.2.1 实验试剂 | 第13-14页 |
1.2.2 实验主要仪器 | 第14-15页 |
1.2.3 溶液配制 | 第15-16页 |
1.3 实验方法 | 第16-25页 |
1.3.1 实验动物的饲养以及动物模型的建立 | 第16-17页 |
1.3.2 病毒转染检测 | 第17-18页 |
1.3.3 小鼠代谢水平检测 | 第18-21页 |
1.3.4 Real-time PCR检测回肠GLP-1相关转录因子mRNA表达水平 | 第21-22页 |
1.3.5 回肠免疫荧光 | 第22-23页 |
1.3.6 Western blot检测信号蛋白表达量 | 第23-25页 |
1.4 统计分析 | 第25页 |
1.5 结果 | 第25-35页 |
1.5.1 MYDGF敲除小鼠体内MYDGF表达缺乏 | 第25-26页 |
1.5.2 AAV-MYDGF注射的小鼠体内持续表达MYDGF | 第26-27页 |
1.5.3 MYDGF对各组小鼠生化指标的影响 | 第27-29页 |
1.5.4 MYDGF改善糖尿病小鼠葡萄糖耐量 | 第29-31页 |
1.5.5 MYDGF促进糖尿病小鼠肠道L细胞分泌GLP-1 | 第31-33页 |
1.5.6 MYDGF上调GLP-1相关基因表达 | 第33-35页 |
1.6 讨论 | 第35-36页 |
1.7 结论 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-39页 |
第二章 MYDGF对L细胞株(STC-1细胞)分泌GLP-1的影响 | 第39-52页 |
2.1 前言 | 第39页 |
2.2 实验试剂与仪器 | 第39-41页 |
2.2.1 实验主要仪器 | 第39-40页 |
2.2.2 实验试剂 | 第40页 |
2.2.3 试剂配制 | 第40-41页 |
2.3 实验方法 | 第41-45页 |
2.3.1 STC-1细胞培养及活性测定 | 第41-42页 |
2.3.2 实验分组 | 第42页 |
2.3.3 ELISA法检测STC-1细胞分泌GLP-1的含量 | 第42-43页 |
2.3.4 实时荧光定量PCR(RT-PCR) | 第43-45页 |
2.3.5 STC-1细胞免疫荧光染色 | 第45页 |
2.4 统计分析 | 第45-46页 |
2.5 结果 | 第46-49页 |
2.5.1 rMYDGF的最佳作用浓度和最佳作用时间 | 第46页 |
2.5.2 rMYDGF对STC-1细胞分泌GLP-1的影响 | 第46-47页 |
2.5.3 rMYDGF可以激活MEK/ERK和PKA/GSK3 β/β-catenin信号通路 | 第47-49页 |
2.6 讨论 | 第49-50页 |
2.7 结论 | 第50页 |
参考文献 | 第50-52页 |
第三章 MYDGF促进GLP-1分泌的作用机制 | 第52-64页 |
3.1 前言 | 第52页 |
3.2 实验仪器及试剂 | 第52-55页 |
3.2.1 实验仪器 | 第52-53页 |
3.2.2 实验试剂 | 第53-54页 |
3.2.3 溶液配制 | 第54-55页 |
3.3 实验方法 | 第55-56页 |
3.3.1 实验动物饲养及细胞培养: | 第55页 |
3.3.2 Western blot检测组织相关蛋白的表达 | 第55-56页 |
3.4 统计分析 | 第56页 |
3.5 结果 | 第56-59页 |
3.5.1 MYDGF可激活MEK/ERK信号通路 | 第56-58页 |
3.5.2 MYDGF可激活PKA/GSK3 β/β-catenin信号通路 | 第58-59页 |
3.6 讨论 | 第59-60页 |
3.7 结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-64页 |
全文结论 | 第64-65页 |
综述 | 第65-72页 |
参考文献 | 第69-72页 |
攻读学位期间成果 | 第72-73页 |
致谢 | 第73-74页 |