| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第13-30页 |
| 1.1 马铃薯及晚疫病概况 | 第13-15页 |
| 1.2 马铃薯晚疫病抗性类型及育种存在的问题 | 第15-17页 |
| 1.3 植物抗病免疫应答 | 第17-22页 |
| 1.3.1 PAMP激发的免疫应答(PTI) | 第17-19页 |
| 1.3.2 效应子激发的免疫应答(ETI) | 第19-21页 |
| 1.3.3 马铃薯免疫应答研究进展 | 第21-22页 |
| 1.4 泛素途径与植物免疫应答 | 第22-28页 |
| 1.4.1 泛素分类与功能 | 第22-26页 |
| 1.4.2 泛素连接酶与植物免疫信号传递 | 第26-28页 |
| 1.5 本研究的提出及意义 | 第28-30页 |
| 2 材料与方法 | 第30-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第30-31页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第30页 |
| 2.1.2 菌株及载体 | 第30页 |
| 2.1.3 晚疫病菌 | 第30-31页 |
| 2.2 实验方法 | 第31-42页 |
| 2.2.1 生物信息学分析数据库及软件 | 第31页 |
| 2.2.2 flg22,CF诱导与cDNA制备 | 第31-32页 |
| 2.2.3 PCR及定量qRT-PCR | 第32页 |
| 2.2.4 质粒提取、琼脂糖胶回收、质粒酶切及载体构建 | 第32-34页 |
| 2.2.5 大肠杆菌与农杆菌的转化 | 第34页 |
| 2.2.6 农杆菌介导的瞬时表达 | 第34-35页 |
| 2.2.7 Westernblot | 第35页 |
| 2.2.8 VIGS沉默NbATL60及R/Avr基因瞬时表达 | 第35-36页 |
| 2.2.9 晚疫病原菌培养与接种 | 第36-37页 |
| 2.2.10 原核表达和体外泛素活性检测 | 第37页 |
| 2.2.11 膜系统酵母文库构建 | 第37-38页 |
| 2.2.12 膜系统酵母文库筛选 | 第38-40页 |
| 2.2.13 膜系统酵母双杂交(Y2H)点对点验证 | 第40页 |
| 2.2.14 互作蛋白双分子荧光互补(BiFC)验证 | 第40-41页 |
| 2.2.15 软件及数据分析 | 第41-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-68页 |
| 3.1 StRFP1序列分析与同源性鉴定 | 第42-44页 |
| 3.2 StRFP1和NbATL60响应晚疫病菌PAMPs和flg22的诱导 | 第44-46页 |
| 3.3 StRFP1和NbATL60定位在细胞膜上 | 第46-49页 |
| 3.4 StRFP1和NbATL60具有E3泛素连接酶活性 | 第49-52页 |
| 3.5 本氏烟中VIGSNbATL60促进晚疫病菌扩展 | 第52-55页 |
| 3.6 瞬时表达StRFP1和NbATL60抑制本氏烟病斑扩展 | 第55-58页 |
| 3.7 本氏烟中VIGSNbATL60不影响INF1和AVR/R诱导的HR | 第58-59页 |
| 3.8 StRFP1和NbATL60调控PTI途径maker基因表达 | 第59-61页 |
| 3.9 马铃薯膜体系酵母双杂交文库构建 | 第61-62页 |
| 3.10 膜系统文库筛选StRFP1互作蛋白 | 第62-64页 |
| 3.11 StRFP1候选互作蛋白验证 | 第64-66页 |
| 3.12 StACY和St14-3-3功能初步验证 | 第66-68页 |
| 4 讨论与展望 | 第68-74页 |
| 4.1 StRFP1和NbATL60参与PTI和ETI免疫响应 | 第68-69页 |
| 4.2 StRFP1和NbATL60参与植物的生长发育与抗性调节 | 第69-70页 |
| 4.3 StRFP1和NbATL60调控免疫需要泛素活性 | 第70页 |
| 4.4 StRFP1的定位和功能 | 第70-71页 |
| 4.5 StRFP1与互作蛋白间可能的识别机制 | 第71-72页 |
| 4.6 研究展望 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-96页 |
| 附录A 酵母文库构建所用试剂盒及试剂信息 | 第96-97页 |
| 附录B 培养基配方及试剂 | 第97-101页 |
| 附录C 本研究所用的引物和载体 | 第101-107页 |
| 附录D 本研究涉及基因CDS序列和氨基酸序列 | 第107-113页 |
| 附录E 博士期间发表或参与发表的文章 | 第113-114页 |
| 致谢 | 第114-115页 |
