中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 前言 | 第10-15页 |
第二章 OATP1B3转运体嵌合蛋白的构建 | 第15-20页 |
2.1 实验目的 | 第15页 |
2.2 实验部分 | 第15-19页 |
2.2.1 实验试剂 | 第15页 |
2.2.2 实验仪器与实验耗材 | 第15-16页 |
2.2.3 细胞系人体胚胎肾细胞(HEK293T) | 第16页 |
2.2.4 重叠PCR原理 | 第16-17页 |
2.2.5 嵌合蛋白的构建 | 第17-19页 |
2.3 结果 | 第19-20页 |
第三章 嵌合蛋白的表达及其功能研究 | 第20-26页 |
3.1 实验目的 | 第20页 |
3.2 实验部分 | 第20-24页 |
3.2.1 实验试剂 | 第20-21页 |
3.2.2 实验仪器与实验耗材 | 第21页 |
3.2.3 细胞培养与转染 | 第21-22页 |
3.2.4 细胞表面的生物素酰化及蛋白免疫印迹分析 | 第22-23页 |
3.2.5 细胞摄取实验 | 第23-24页 |
3.3 结果与讨论 | 第24-26页 |
3.3.1 OATP1B1与OATP1B3及其嵌合蛋白的表达 | 第24页 |
3.3.2 EGCG对OATP1B1和OATP1B3及其嵌合蛋白功能的影响 | 第24-26页 |
第四章 EGCG对四种嵌合蛋白的调节 | 第26-30页 |
4.1 实验目的 | 第26页 |
4.2 实验部分 | 第26-28页 |
4.2.1 实验试剂 | 第26页 |
4.2.2 实验仪器与实验耗材 | 第26-27页 |
4.2.3 质粒构建 | 第27-28页 |
4.2.4 细胞培养,转染及表达和功能的考察 | 第28页 |
4.3 结果与讨论 | 第28-30页 |
4.3.1 四种嵌合蛋白的构建 | 第28页 |
4.3.2 四种嵌合蛋白在细胞质膜上的表达 | 第28-29页 |
4.3.3 EGCG对四种嵌合蛋白功能的影响 | 第29-30页 |
第五章 关键氨基酸残基的确定 | 第30-45页 |
5.1 实验目的 | 第30页 |
5.2 实验部分 | 第30-34页 |
5.2.1 实验试剂 | 第30页 |
5.2.2 实验仪器与实验耗材 | 第30-31页 |
5.2.3 质粒的构建 | 第31-33页 |
5.2.4 细胞培养,转染表达及功能考察 | 第33页 |
5.2.5 OATP1B3三维模型的构建 | 第33-34页 |
5.3 结果与讨论 | 第34-45页 |
5.3.1 OATP1B3单突变的构建 | 第34-39页 |
5.3.2 单突变在细胞质膜上的表达 | 第39-40页 |
5.3.3 EGCG对单突变体转运功能的影响 | 第40-43页 |
5.3.4 OATP1B3在45位和555位的单突变体结构图 | 第43-44页 |
5.3.5 计算机模拟的OATP1B3转运体的三维结构 | 第44-45页 |
第六章 总结与展望 | 第45-47页 |
6.1 总结 | 第45-46页 |
6.2 展望 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-52页 |
综述 | 第52-61页 |
参考文献 | 第57-61页 |
攻读硕士期间发表的论文 | 第61-62页 |
附录 | 第62-67页 |
中英文缩略词表 | 第67-68页 |
致谢 | 第68页 |