中文摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
前言 | 第8-10页 |
一、材料与试剂 | 第10-16页 |
1.1 细胞株 | 第10页 |
1.2 组织样本 | 第10页 |
1.3 T细胞 | 第10页 |
1.4 质粒 | 第10页 |
1.5 试剂与材料 | 第10-12页 |
1.6 仪器 | 第12页 |
1.7 主要试剂配制 | 第12-16页 |
二、实验方法 | 第16-24页 |
2.1 细胞培养与传代 | 第16页 |
2.2 细胞铺板与转染 | 第16页 |
2.3 RNA提取 | 第16-17页 |
2.4 反转录 | 第17页 |
2.5 PCR | 第17-18页 |
2.6 qPCR | 第18-19页 |
2.7 蛋白免疫印迹 | 第19-20页 |
2.8 pcDNA3.1(+)和pGL3-Control Vector重组质粒的构建 | 第20-21页 |
2.9 流式细胞术 | 第21-22页 |
2.10 CCK-8测定 | 第22页 |
2.11 双荧光素酶报告基因系统活性测定 | 第22页 |
2.12 裸鼠植瘤实验 | 第22-23页 |
2.13 agomir给药后检测小鼠外周血中细胞因子的分泌实验 | 第23-24页 |
三、实验结果 | 第24-43页 |
3.1 miR-34a-5p与B7-H3在CRC中共表达 | 第24-26页 |
3.2 miR-34a-5p_3逆转miR-34a-5p介导的B7-H3表达上调 | 第26-29页 |
3.3 miR-34a-5p_3通过抑制B7-H3消除了miR-34a-5p介导的免疫激活 | 第29-34页 |
3.4 miR-34a-5p_3通过调节SIRT1/NF-κB/B7-H3轴消除miR-34a-5p诱导的TNF-α | 第34-39页 |
3.5 miR-34a-5p_3通过靶向B7-H3和PD-L1抑制肿瘤细胞生长 | 第39-43页 |
四、讨论 | 第43-47页 |
参考文献 | 第47-52页 |
总结与展望 | 第52-54页 |
综述: miRNA药物临床研究进展 | 第54-66页 |
参考文献 | 第60-66页 |
附录 | 第66-76页 |
缩写词表 | 第76-77页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第77-78页 |
致谢 | 第78-79页 |