RNF170对肺癌细胞凋亡和自噬的影响
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 符号说明 | 第12-14页 |
| 前言 | 第14-28页 |
| 1 肿瘤 | 第14-15页 |
| 1.1 肿瘤 | 第14页 |
| 1.2 肺癌 | 第14-15页 |
| 2 泛素-蛋白酶体途径 | 第15-18页 |
| 2.1 泛素-蛋白酶体途径 | 第15-16页 |
| 2.2 泛素化在自噬调节中的作用 | 第16-17页 |
| 2.3 RNF170 | 第17-18页 |
| 3 细胞自噬 | 第18-22页 |
| 3.1 细胞自噬 | 第18-21页 |
| 3.2 mTOR | 第21-22页 |
| 4 细胞凋亡 | 第22-25页 |
| 4.1 细胞凋亡的概念和特点 | 第22-23页 |
| 4.2 细胞凋亡的形态特征 | 第23页 |
| 4.3 细胞凋亡的生化特征 | 第23-24页 |
| 4.4 细胞凋亡的机制 | 第24-25页 |
| 5 细胞自噬和凋亡的关系 | 第25-28页 |
| 实验材料和方法 | 第28-45页 |
| 1 实验材料 | 第28页 |
| 2 试剂和耗材 | 第28-29页 |
| 3 仪器设备 | 第29-30页 |
| 4 溶液和试剂配方 | 第30-35页 |
| 4.1 细胞培养所用试剂和配方 | 第30-31页 |
| 4.2 蛋白裂解所用试剂和配方 | 第31-32页 |
| 4.3 蛋白免疫印迹所用试剂和配方 | 第32-34页 |
| 4.4 流式细胞术所用试剂 | 第34-35页 |
| 5 实验方法 | 第35-45页 |
| 5.1 细胞培养 | 第35-36页 |
| 5.3 Western Blot检测蛋白变化 | 第36-38页 |
| 5.4 RNAi抑制基因表达 | 第38-40页 |
| 5.6 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第40页 |
| 5.7 饥饿法诱导细胞自噬 | 第40页 |
| 5.8 自噬小体荧光聚集实验 | 第40-41页 |
| 5.9 质粒构建 | 第41-43页 |
| 5.10 菌落电泳 | 第43页 |
| 5.11 免疫蛋白沉淀实验 | 第43-45页 |
| 实验结果 | 第45-55页 |
| 1 RNF170能抑制细胞自噬 | 第45-48页 |
| 1.1 RNF170在细胞自噬中起作用 | 第45-46页 |
| 1.2 RNF170敲除后自噬小体增多 | 第46-47页 |
| 1.3 RNF170敲除后自噬升高 | 第47-48页 |
| 1.4 RNF170过表达后抑制细胞自噬 | 第48页 |
| 2 RNF170通过m-TOR通路调控细胞自噬 | 第48-50页 |
| 3 RNF170抑制细胞凋亡 | 第50-53页 |
| 4 IP3R在RNF170抑制凋亡和自噬中的作用 | 第53-54页 |
| 5 ATG3与RNF170的相互作用 | 第54-55页 |
| 讨论 | 第55-57页 |
| References | 第57-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 附表 | 第68页 |