摘要 | 第3-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第1章 前言 | 第13-21页 |
1.1 转基因水稻的研究进展 | 第13-16页 |
1.1.1 抗虫转基因水稻培育 | 第13页 |
1.1.2 抗病基因工程研究 | 第13-14页 |
1.1.3 抗除草剂转基因水稻研究 | 第14-15页 |
1.1.4 水稻抗逆基因工程研究 | 第15页 |
1.1.5 利用转基因水稻工程在制备药物和次级代谢工程中的应用 | 第15-16页 |
1.2 转基因水稻安全性评估研究进展 | 第16-19页 |
1.2.1 转基因水稻营养成分评估 | 第16-17页 |
1.2.2 转基因水稻非期望效应评估 | 第17页 |
1.2.3 转基因对水稻内生菌的影响 | 第17-19页 |
1.3 植物内生菌的研究方法 | 第19-20页 |
1.3.1 传统分离培养法 | 第19页 |
1.3.2 分子生物学技术研究法 | 第19-20页 |
1.4 研究意义和目的 | 第20-21页 |
第2章 转基因水稻种子可培养内生细菌菌群变异分析 | 第21-35页 |
2.1 引言 | 第21-22页 |
2.2 实验材料 | 第22页 |
2.2.1 水稻材料 | 第22页 |
2.2.2 主要试剂与仪器 | 第22页 |
2.3 实验方法 | 第22-24页 |
2.3.1 水稻内生菌的分离 | 第22页 |
2.3.2 水稻种子内生菌的鉴定 | 第22-23页 |
2.3.3 水稻种子可培养变异内生细菌的耐热研究 | 第23-24页 |
2.3.4 数据处理及统计分析 | 第24页 |
2.4 结果与分析 | 第24-32页 |
2.4.1 检测次数对分离效果的影响 | 第24-26页 |
2.4.2 水稻种子可培养内生细菌的形态学观察 | 第26-27页 |
2.4.3 水稻种子可培养内生细菌16S rRNA鉴定结果 | 第27-28页 |
2.4.4 GM水稻及其多重对照样本的种子可培养内生菌群变异分析 | 第28-31页 |
2.4.5 水稻可培养部分变异内生细菌的耐热 | 第31-32页 |
2.5 讨论 | 第32-35页 |
第3章 抗草甘膦转基因水稻种子可培养内生真菌多样性变异分析 | 第35-55页 |
3.1 前言 | 第35-36页 |
3.2 材料和方法 | 第36-38页 |
3.2.1 实验材料 | 第36页 |
3.2.2 培养基 | 第36页 |
3.2.3 水稻种子内生真菌的分离及纯化 | 第36-37页 |
3.2.4 内生真菌的鉴定 | 第37页 |
3.2.5 数据处理与统计分析 | 第37-38页 |
3.3 结果分析 | 第38-53页 |
3.3.1 水稻种子可培养内生真菌的组成 | 第38-45页 |
3.3.2 转基因水稻及其多重对照样本的种子可培养内生真菌类群的比较 | 第45-51页 |
3.3.3 转基因水稻与多重对照样本的种子可培养内生真菌的多样性比较分析 | 第51-53页 |
3.4 讨论 | 第53-55页 |
第4章 转基因水稻种子可培养内生真菌菌群变异及其存储变化动态分析 | 第55-75页 |
4.1 前言 | 第55-56页 |
4.2 材料和方法 | 第56页 |
4.2.1 实验材料 | 第56页 |
4.2.2 培养基 | 第56页 |
4.2.3 水稻种子内生真菌的分离及纯化 | 第56页 |
4.2.4 内生真菌的鉴定 | 第56页 |
4.2.5 数据处理与统计分析 | 第56页 |
4.3 结果分析 | 第56-73页 |
4.3.1 水稻种子可培养内生真菌的组成 | 第56-64页 |
4.3.2 GM水稻种子可培养内生真菌多样性随储藏时间的变化动态分析 | 第64-67页 |
4.3.3 储藏一年前后GM水稻种子可培养真菌随的变化分析 | 第67-73页 |
4.3.4 5种优势内生真菌在GM水稻种子中的分离率变化动态分析 | 第73页 |
4.4 讨论 | 第73-75页 |
第5章 水稻种子内生细菌高通量测序PCR引物的筛选和菌群结构分析 | 第75-87页 |
5.1 引言 | 第75-76页 |
5.2 实验材料 | 第76页 |
5.2.1 水稻材料 | 第76页 |
5.2.2 主要试剂 | 第76页 |
5.2.3 主要仪器 | 第76页 |
5.3 实验方法 | 第76-80页 |
5.3.1 引物的初筛 | 第76-78页 |
5.3.2 水稻种子表面消毒 | 第78页 |
5.3.3 水稻种子基因组提取 | 第78页 |
5.3.4 水稻种子内生细菌16S rRNA基因序列的PCR扩增 | 第78-79页 |
5.3.5 DNA纯化 | 第79页 |
5.3.6 上机测序 | 第79页 |
5.3.7 数据处理 | 第79-80页 |
5.4 结果与分析 | 第80-84页 |
5.4.1 候选引物的同源性比对和初步筛选 | 第80-81页 |
5.4.2 水稻种子内生微生物全DNA提取和16S rRNA基因序列的PCR扩增 | 第81-82页 |
5.4.3 初筛引物对用于水稻种子内生细菌16S rRNA基因序列的高通量测序实验验证 | 第82-83页 |
5.4.4 基于高通量测序日本晴种子内生细菌菌群结构分析 | 第83-84页 |
5.5 讨论 | 第84-87页 |
第6章 总结与展望 | 第87-91页 |
6.1 总结 | 第87-88页 |
6.2 创新点 | 第88-89页 |
6.3 展望 | 第89-91页 |
参考文献 | 第91-101页 |
致谢 | 第101-103页 |