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大豆查尔酮异构酶GmCHI4A和GmCHI4B基因的克隆及功能验证

中文摘要第4-6页
abstract第6-7页
中英文缩略语表第8-12页
第一章 文献综述第12-20页
    1 大豆耐盐性的研究进展第12-14页
        1.1 盐胁迫对植物的影响第12-13页
        1.2 盐胁迫条件下的自我调节第13-14页
        1.3 大豆耐盐基因的相关研究第14页
    2 大豆异黄酮的研究进展第14-16页
        2.1 大豆异黄酮的结构和性质第14页
        2.2 大豆异黄酮的生理功能第14-15页
        2.3 大豆异黄酮的合成过程第15-16页
    3 查尔酮异构酶的研究进展第16-18页
        3.1 查尔酮异构酶的结构特征和分类第16-17页
        3.2 查尔酮异构酶的生物学功能及应用第17-18页
    4 发根农杆菌介导的遗传转化研究进展第18-19页
        4.1 发根农杆菌及Ri质粒第18页
        4.2 发根农杆菌的侵染和致病过程第18页
        4.3 发根农杆菌介导的根系转换体系及应用第18-19页
    5 本实验的研究目的与意义第19-20页
第二章 GmCHI4A和GmCHI4B的克隆及序列分析第20-33页
    2.1 材料第20-21页
        2.1.1 植物材料第20页
        2.1.2 宿主菌和载体第20页
        2.1.3 酶及试剂第20页
        2.1.4 主要仪器设备第20页
        2.1.5 引物及测序第20-21页
    2.2 方法第21-25页
        2.2.1 大豆总RNA的提取第21-22页
        2.2.2 cDNA的合成第22页
        2.2.3 大豆GmCHI4A和GmCHI4B的PCR扩增第22-23页
        2.2.4 PCR产物的回收第23-24页
        2.2.5 大肠杆菌DH5α热激感受态细胞的制备第24页
        2.2.6 PCR产物的克隆第24页
        2.2.7 冻融法转化大肠杆菌DH5α感受态细胞第24-25页
        2.2.8 GmCHI4A和GmCHI4B序列的生物信息学分析第25页
    2.3 结果第25-31页
        2.3.1 GmCHI4A和GmCHI4B基因cDNA全长序列的获得第25-26页
        2.3.2 GmCHI4A和GmCHI4B基因的序列分析及所编码的蛋白的结构功能预测第26-30页
        2.3.3 GmCHI4A和GmCHI4B基因保守域同源性及进化树分析第30-31页
    2.4 讨论第31-32页
    2.5 小结第32-33页
第三章 GmCHI4A和GmCHI4B功能的初步分析第33-42页
    3.1 材料第33-34页
        3.1.1 植物材料第33页
        3.1.2 宿主菌及载体第33页
        3.1.3 酶及试剂第33页
        3.1.4 引物及测序第33-34页
        3.1.5 主要仪器设备第34页
    3.2 方法第34-37页
        3.2.1 原核表达第34-37页
        3.2.2 GmCHI4A和GmCHI4B基因的表达模式分析第37页
    3.3 结果与分析第37-41页
        3.3.1 原核表达第37-39页
        3.3.2 GmCHI4A与GmCHI4B基因的表达模式分析第39-41页
    3.4 讨论第41页
    3.5 小结第41-42页
第四章 GmCHI4A与GmCHI4B在大豆发状根中的表达和抗盐性分析第42-70页
    4.1 材料第42-45页
        4.1.1 植物材料第42页
        4.1.2 宿主与载体第42页
        4.1.3 酶及试剂第42页
        4.1.4 引物及测序第42-44页
        4.1.5 主要仪器设备第44页
        4.1.6 药品的配制第44-45页
    4.2 方法第45-53页
        4.2.1 植物表达载体pCHF-1301-CHI4s的构建第45-46页
        4.2.2 K599农杆菌感受态的制备第46-47页
        4.2.3 电击法转化K599感受态细胞第47页
        4.2.4 发根农杆菌的遗传转化第47-50页
        4.2.5 GmCHI4A和GmCHI4B转基因大豆发根的鉴定和筛选第50页
        4.2.6 实时荧光定量PCR分析第50页
        4.2.7 转基因大豆发状根异黄酮测定第50-51页
        4.2.8 GmCHI4A与GmCHI4B大豆发状根的抗盐性鉴定第51-53页
    4.3 结果与分析第53-67页
        4.3.1 pCHF1301CHI4s载体验证结果第53-54页
        4.3.2 GmCHI4A和GmCHI4B转基因大豆发根的鉴定和筛选第54-56页
        4.3.3 实时荧光定量PCR检测结果分析第56-57页
        4.3.4 转基因大豆发状根异黄酮测定结果第57-59页
        4.3.5 GmCHI4A与GmCHI4B在大豆发状根中的抗盐性分析第59-66页
        4.3.6 高盐胁迫条件下转基因大豆发状根的相关抗逆基因表达分析第66-67页
    4.4 讨论第67-69页
    4.5 小结第69-70页
结论第70-71页
参考文献第71-79页
作者简介及科研成果第79-80页
致谢第80页

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