中文摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
中英文缩略语表 | 第8-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-20页 |
1 大豆耐盐性的研究进展 | 第12-14页 |
1.1 盐胁迫对植物的影响 | 第12-13页 |
1.2 盐胁迫条件下的自我调节 | 第13-14页 |
1.3 大豆耐盐基因的相关研究 | 第14页 |
2 大豆异黄酮的研究进展 | 第14-16页 |
2.1 大豆异黄酮的结构和性质 | 第14页 |
2.2 大豆异黄酮的生理功能 | 第14-15页 |
2.3 大豆异黄酮的合成过程 | 第15-16页 |
3 查尔酮异构酶的研究进展 | 第16-18页 |
3.1 查尔酮异构酶的结构特征和分类 | 第16-17页 |
3.2 查尔酮异构酶的生物学功能及应用 | 第17-18页 |
4 发根农杆菌介导的遗传转化研究进展 | 第18-19页 |
4.1 发根农杆菌及Ri质粒 | 第18页 |
4.2 发根农杆菌的侵染和致病过程 | 第18页 |
4.3 发根农杆菌介导的根系转换体系及应用 | 第18-19页 |
5 本实验的研究目的与意义 | 第19-20页 |
第二章 GmCHI4A和GmCHI4B的克隆及序列分析 | 第20-33页 |
2.1 材料 | 第20-21页 |
2.1.1 植物材料 | 第20页 |
2.1.2 宿主菌和载体 | 第20页 |
2.1.3 酶及试剂 | 第20页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第20页 |
2.1.5 引物及测序 | 第20-21页 |
2.2 方法 | 第21-25页 |
2.2.1 大豆总RNA的提取 | 第21-22页 |
2.2.2 cDNA的合成 | 第22页 |
2.2.3 大豆GmCHI4A和GmCHI4B的PCR扩增 | 第22-23页 |
2.2.4 PCR产物的回收 | 第23-24页 |
2.2.5 大肠杆菌DH5α热激感受态细胞的制备 | 第24页 |
2.2.6 PCR产物的克隆 | 第24页 |
2.2.7 冻融法转化大肠杆菌DH5α感受态细胞 | 第24-25页 |
2.2.8 GmCHI4A和GmCHI4B序列的生物信息学分析 | 第25页 |
2.3 结果 | 第25-31页 |
2.3.1 GmCHI4A和GmCHI4B基因cDNA全长序列的获得 | 第25-26页 |
2.3.2 GmCHI4A和GmCHI4B基因的序列分析及所编码的蛋白的结构功能预测 | 第26-30页 |
2.3.3 GmCHI4A和GmCHI4B基因保守域同源性及进化树分析 | 第30-31页 |
2.4 讨论 | 第31-32页 |
2.5 小结 | 第32-33页 |
第三章 GmCHI4A和GmCHI4B功能的初步分析 | 第33-42页 |
3.1 材料 | 第33-34页 |
3.1.1 植物材料 | 第33页 |
3.1.2 宿主菌及载体 | 第33页 |
3.1.3 酶及试剂 | 第33页 |
3.1.4 引物及测序 | 第33-34页 |
3.1.5 主要仪器设备 | 第34页 |
3.2 方法 | 第34-37页 |
3.2.1 原核表达 | 第34-37页 |
3.2.2 GmCHI4A和GmCHI4B基因的表达模式分析 | 第37页 |
3.3 结果与分析 | 第37-41页 |
3.3.1 原核表达 | 第37-39页 |
3.3.2 GmCHI4A与GmCHI4B基因的表达模式分析 | 第39-41页 |
3.4 讨论 | 第41页 |
3.5 小结 | 第41-42页 |
第四章 GmCHI4A与GmCHI4B在大豆发状根中的表达和抗盐性分析 | 第42-70页 |
4.1 材料 | 第42-45页 |
4.1.1 植物材料 | 第42页 |
4.1.2 宿主与载体 | 第42页 |
4.1.3 酶及试剂 | 第42页 |
4.1.4 引物及测序 | 第42-44页 |
4.1.5 主要仪器设备 | 第44页 |
4.1.6 药品的配制 | 第44-45页 |
4.2 方法 | 第45-53页 |
4.2.1 植物表达载体pCHF-1301-CHI4s的构建 | 第45-46页 |
4.2.2 K599农杆菌感受态的制备 | 第46-47页 |
4.2.3 电击法转化K599感受态细胞 | 第47页 |
4.2.4 发根农杆菌的遗传转化 | 第47-50页 |
4.2.5 GmCHI4A和GmCHI4B转基因大豆发根的鉴定和筛选 | 第50页 |
4.2.6 实时荧光定量PCR分析 | 第50页 |
4.2.7 转基因大豆发状根异黄酮测定 | 第50-51页 |
4.2.8 GmCHI4A与GmCHI4B大豆发状根的抗盐性鉴定 | 第51-53页 |
4.3 结果与分析 | 第53-67页 |
4.3.1 pCHF1301CHI4s载体验证结果 | 第53-54页 |
4.3.2 GmCHI4A和GmCHI4B转基因大豆发根的鉴定和筛选 | 第54-56页 |
4.3.3 实时荧光定量PCR检测结果分析 | 第56-57页 |
4.3.4 转基因大豆发状根异黄酮测定结果 | 第57-59页 |
4.3.5 GmCHI4A与GmCHI4B在大豆发状根中的抗盐性分析 | 第59-66页 |
4.3.6 高盐胁迫条件下转基因大豆发状根的相关抗逆基因表达分析 | 第66-67页 |
4.4 讨论 | 第67-69页 |
4.5 小结 | 第69-70页 |
结论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-79页 |
作者简介及科研成果 | 第79-80页 |
致谢 | 第80页 |