| 致谢 | 第7-10页 |
| 摘要 | 第10-15页 |
| ABSTRACT | 第15-21页 |
| 缩略语表 | 第22-28页 |
| 第一章 细胞壁在植物耐铝中的作用 | 第28-43页 |
| 1.1 引言 | 第28-29页 |
| 1.2 植物铝毒害机制 | 第29-30页 |
| 1.2.1 植物铝毒害的症状 | 第29-30页 |
| 1.2.2 植物铝毒害的作用位点 | 第30页 |
| 1.3 植物耐铝机制 | 第30-40页 |
| 1.3.1 外部排斥机制 | 第31-39页 |
| 1.3.1.1 有机酸的分泌 | 第31-33页 |
| 1.3.1.2 细胞壁的固定 | 第33-35页 |
| 1.3.1.3 果胶 | 第35-36页 |
| 1.3.1.4 半纤维素 | 第36-39页 |
| 1.3.1.5 纤维素 | 第39页 |
| 1.3.1.6 其他铝排斥机制 | 第39页 |
| 1.3.2 内部耐受机制 | 第39-40页 |
| 1.3.2.1 液泡的区室化 | 第39-40页 |
| 1.3.2.2 有机酸或者酚类化合物的螯合 | 第40页 |
| 1.4 激素与信号分子对植物耐铝性的影响 | 第40-43页 |
| 1.4.1 植物激素对植物耐铝性的影响 | 第40-41页 |
| 1.4.2 一氧化氮NO对植物耐铝性的影响 | 第41-43页 |
| 第二章 ：问题的提出、技术路线和拟解决的问题 | 第43-45页 |
| 2.1 问题的提出 | 第43-44页 |
| 2.2 技术路线 | 第44页 |
| 2.3 拟解决的问题 | 第44-45页 |
| 第三章 半纤维素是拟南芥细胞壁结合铝的主要位点 | 第45-62页 |
| 3.1 引言 | 第45-46页 |
| 3.2 材料与方法 | 第46-50页 |
| 3.2.1 植物材料与培养 | 第46页 |
| 3.2.2 RNA提取和实时定量分析 | 第46-47页 |
| 3.2.3 铝处理和相对根伸长 | 第47-48页 |
| 3.2.4 XET体内酶活分析 | 第48页 |
| 3.2.5 根系细胞壁的提取 | 第48页 |
| 3.2.6 细胞壁组分分级提取 | 第48-49页 |
| 3.2.7 细胞壁组分中糖醛酸含量的测定 | 第49页 |
| 3.2.8 细胞壁对铝的吸附动力学 | 第49页 |
| 3.2.9 单糖含量的测定 | 第49-50页 |
| 3.2.10 铝含量的测定 | 第50页 |
| 3.3 结果 | 第50-57页 |
| 3.3.1 铝对拟南芥根伸长的影响 | 第50-51页 |
| 3.3.2 细胞壁组分的分级提取方法 | 第51-54页 |
| 3.3.3 铝在细胞壁各组分中的分布 | 第54-55页 |
| 3.3.4 铝对体内XET酶活的影响 | 第55-57页 |
| 3.3.5 铝对XTH基因表达的影响 | 第57页 |
| 3.4 讨论 | 第57-62页 |
| 第四章 ：半纤维素相关基因XTH31与植物耐铝性 | 第62-97页 |
| 4.1 引言 | 第62页 |
| 4.2 材料与方法 | 第62-72页 |
| 4.2.1 植物材料与培养 | 第62-63页 |
| 4.2.2 铝处理和相对根伸长 | 第63页 |
| 4.2.3 Morin和PI染色 | 第63页 |
| 4.2.4 细胞壁组分中总糖含量的测定 | 第63页 |
| 4.2.5 MALDI-TOF分析测定木葡聚糖寡糖 | 第63-64页 |
| 4.2.6 木葡聚糖降解酶(XDA)活性的测定 | 第64页 |
| 4.2.7 XTH31在酵母中的异源表达 | 第64-67页 |
| 4.2.7.1 表达载体的构建 | 第64-65页 |
| 4.2.7.2 融合蛋白的表达 | 第65-66页 |
| 4.2.7.3 毕赤酵母异源表达XTH31蛋白的XET和XEH酶活分析 | 第66-67页 |
| 4.2.8 根系提取物中XET和XEH酶活的同位素分析 | 第67页 |
| 4.2.9 ~(27)Al的核磁共振(NMR) | 第67-68页 |
| 4.2.10 亚细胞定位 | 第68-69页 |
| 4.2.10.1 相关融合表达载体的构建 | 第68页 |
| 4.2.10.2 洋葱表皮细胞瞬时表达 | 第68-69页 |
| 4.2.11 拟南芥转基因 | 第69-72页 |
| 4.2.11.1 载体的构建 | 第69-70页 |
| 4.2.11.2 农杆菌感受态的制备和转化 | 第70-71页 |
| 4.2.11.3 拟南芥转基因 | 第71-72页 |
| 4.3 结果 | 第72-91页 |
| 4.3.1 XTH31突变体的耐铝性鉴定 | 第72-76页 |
| 4.3.2 XTH31的序列分析和蛋白的亚细胞定位 | 第76-79页 |
| 4.3.3 XTH31的组织特异性表达 | 第79页 |
| 4.3.4 XTH31对铝的浓度响应 | 第79-81页 |
| 4.3.5 XTH31对体内和体外XET/XEH酶活的贡献 | 第81-86页 |
| 4.3.6 xth31根系半纤维素含量 | 第86-87页 |
| 4.3.7 xth31细胞壁木葡聚糖含量 | 第87-88页 |
| 4.3.8 木葡聚糖可以结合铝 | 第88-91页 |
| 4.4 讨论 | 第91-97页 |
| 4.4.1 XTH31调控拟南芥铝敏感性 | 第91页 |
| 4.4.2 XTH31参与细胞修饰与细胞伸长 | 第91-93页 |
| 4.4.3 体内XET酶活与体外XEH酶活 | 第93-94页 |
| 4.4.4 木葡聚糖参与铝胁迫可能的机理 | 第94-97页 |
| 第五章 ：与XTH31互作XTHs鉴定及其与耐铝性的关系 | 第97-110页 |
| 5.1 引言 | 第97页 |
| 5.2 材料与方法 | 第97-100页 |
| 5.2.1 植物材料与培养 | 第97页 |
| 5.2.2 XET体内酶活分析 | 第97页 |
| 5.2.3 亚细胞定位 | 第97-98页 |
| 5.2.4 酵母双杂交实验 | 第98-99页 |
| 5.2.5 农杆菌接到的烟草叶片的侵染 | 第99-100页 |
| 5.2.6 蛋白的提取与蛋白胶的分析 | 第100页 |
| 5.3 结果 | 第100-107页 |
| 5.3.1 XTH17与XTH31在体内和体外互作 | 第100-101页 |
| 5.3.2 XTH17的亚细胞定位 | 第101-103页 |
| 5.3.3 XTH17拥有XET活性 | 第103-104页 |
| 5.3.4 XTH17对铝的时间和浓度响应 | 第104页 |
| 5.3.5 XTH17的T-DNA插入突变体xth17的耐铝性 | 第104-106页 |
| 5.3.6 xth17根系半纤维素含量及其结合铝的能力 | 第106-107页 |
| 5.4 讨论 | 第107-110页 |
| 第六章 ：木葡聚糖O-乙酰化修饰与植物耐铝性 | 第110-126页 |
| 6.1 引言 | 第110页 |
| 6.2 材料与方法 | 第110-112页 |
| 6.2.1 植物材料与培养 | 第110-111页 |
| 6.2.2 RNA提取和实时定量分析 | 第111页 |
| 6.2.3 果胶甲酯酶活性的测定 | 第111页 |
| 6.2.4 细胞壁乙酰基含量的测定 | 第111页 |
| 6.2.5 木葡聚糖O-乙酰化程度的测定 | 第111-112页 |
| 6.3 结果 | 第112-121页 |
| 6.3.1 tbl27突变体对铝的敏感性 | 第112-114页 |
| 6.3.2 TBL27的组织定位 | 第114-116页 |
| 6.3.3 TBL27对铝的时间和浓度响应 | 第116-117页 |
| 6.3.4 TBL27调控铝胁迫下的O-乙酰化水平 | 第117-119页 |
| 6.3.5 axy4突变体根系细胞壁铝含量 | 第119-121页 |
| 6.4 讨论 | 第121-126页 |
| 第七章 ：木葡聚糖的岩藻糖化与植物耐铝性 | 第126-139页 |
| 7.1 引言 | 第126页 |
| 7.2 材料与方法 | 第126-127页 |
| 7.2.1 植物材料与培养 | 第126-127页 |
| 7.2.2 RNA提取和实时定量分析 | 第127页 |
| 7.3 结果 | 第127-136页 |
| 7.3.1 铝处理下木葡聚糖结构的变化 | 第127-128页 |
| 7.3.2 木葡聚糖结构变化的相关突变体的铝耐性 | 第128-130页 |
| 7.3.3 AXY3和AXY8对铝的时间和浓度响应 | 第130-133页 |
| 7.3.4 axy3和axy8突变体细胞壁中的铝含量 | 第133页 |
| 7.3.5 axy3和axy8突变体半纤维素中的铝含量 | 第133-136页 |
| 7.3.6 axy3和axy8突变体的耐铝性差异与ALSl的表达 | 第136页 |
| 7.4 讨论 | 第136-139页 |
| 第八章 生长素调控细胞壁结合铝的机制 | 第139-167页 |
| 8.1 引言 | 第139-140页 |
| 8.2 材料与方法 | 第140-143页 |
| 8.2.1 植物材料与培养 | 第140-141页 |
| 8.2.2 RNA提取和实时定量分析 | 第141页 |
| 8.2.3 铝处理和相对根伸长 | 第141页 |
| 8.2.4 Morin染色 | 第141-142页 |
| 8.2.5 铝含量的测定 | 第142页 |
| 8.2.6 蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第142-143页 |
| 8.2.7 根系游离IAA提取与含量的测定 | 第143页 |
| 8.2.8 NO含量的测定 | 第143页 |
| 8.3 结果 | 第143-163页 |
| 8.3.1 XTH15的T-DNA插入突变体xth15耐铝性增强 | 第143-146页 |
| 8.3.2 生长素负调控拟南芥的耐铝性 | 第146-148页 |
| 8.3.3 生长素改变拟南芥细胞壁铝积累量 | 第148-149页 |
| 8.3.4 生长素影响ALS1的表达 | 第149-152页 |
| 8.3.5 生长素通过NO调控拟南芥细胞壁铝积累量 | 第152-162页 |
| 8.3.6 NO不影响拟南芥ALS1的表达 | 第162-163页 |
| 8.4 讨论 | 第163-167页 |
| 8.4.1 生长素通过降低细胞壁铝积累量和下调ALS1表达加重铝毒害 | 第163-164页 |
| 8.4.2 生长素通过NO调控半纤维素含量及其铝结合的能力 | 第164-165页 |
| 8.4.3 NO并不参与生长素负调控拟南芥ALS1的表达过程 | 第165-167页 |
| 第九章 MPK6调控细胞壁结合铝的机制 | 第167-176页 |
| 9.1 引言 | 第167-168页 |
| 9.2 材料与方法 | 第168-171页 |
| 9.2.1 植物材料与培养 | 第168页 |
| 9.2.2 酵母双杂交 | 第168-169页 |
| 9.2.3 原核表达及蛋白诱导与纯化 | 第169-171页 |
| 9.2.4 体外磷酸化分析 | 第171页 |
| 9.3 结果 | 第171-175页 |
| 9.3.1 mpk6突变体对铝胁迫的响应 | 第171-172页 |
| 9.3.2 MPK6与TBL7的体外互作 | 第172-173页 |
| 9.3.3 mpk6与tbl7突变体细胞壁和半纤维素对铝的吸附 | 第173-175页 |
| 9.4 讨论 | 第175-176页 |
| 第十章 结论与展望 | 第176-177页 |
| 参考文献 | 第177-199页 |
| 个人简历 | 第199页 |
| 个人信息 | 第199页 |
| 教育背景 | 第199页 |
| 获奖情况 | 第199页 |
| 博士期间发表的论文 | 第199-200页 |
| 已发表一作论文 | 第199-200页 |
| 署名论文 | 第200页 |
| 待发表论文 | 第200页 |
