致谢 | 第7-8页 |
摘要 | 第8-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
缩略语表 | 第15-23页 |
第1章 文献综述 | 第23-39页 |
1.1 植物转录因子概述 | 第23-24页 |
1.2 WRKY转录因子 | 第24-33页 |
1.2.1 WRKY转录因子的结构、分类及结合位点 | 第24-27页 |
1.2.2 WRKY家族的起源与进化 | 第27页 |
1.2.3 WRKY基因的生物学功能 | 第27-33页 |
1.3 ROS | 第33-37页 |
1.3.1 ROS的产生 | 第33页 |
1.3.2 ROS的毒害作用 | 第33-34页 |
1.3.3 ROS的清除机制 | 第34-35页 |
1.3.4 ROS的生物学功能 | 第35-37页 |
1.4 问题的提出、拟解决的问题以及技术路线 | 第37-39页 |
1.4.1 问题的提出和拟解决的问题 | 第37-38页 |
1.4.2 技术路线 | 第38-39页 |
第2章 WRKY基因响应ROS或氧化胁迫 | 第39-46页 |
2.1 材料和方法 | 第39-41页 |
2.1.1 植物材料 | 第39页 |
2.1.2 植物培养及处理条件 | 第39页 |
2.1.3 基因表达分析 | 第39-41页 |
2.2 结果 | 第41-45页 |
2.2.1 WRKY基因响应过氧化氢 | 第41-42页 |
2.2.2 WRKY基因响应重金属镉 | 第42-45页 |
2.2.3 WRKY基因的时间表达分析 | 第45页 |
2.3 讨论 | 第45-46页 |
第3章 WRKY46调控拟南芥渗透胁迫响应以及光依赖的气孔运动 | 第46-85页 |
3.1 前言 | 第46-48页 |
3.1.1 干旱和盐胁迫引发的信号转导 | 第46-47页 |
3.1.2 水分胁迫下的转录调控 | 第47-48页 |
3.1.3 光诱导的气孔运动 | 第48页 |
3.2 问题的提出、拟解决的问题以及技术路线 | 第48-50页 |
3.2.1 问题的提出和拟解决的问题 | 第48-49页 |
3.2.2 技术路线 | 第49-50页 |
3.3 材料和方法 | 第50-60页 |
3.3.1 植物材料 | 第50页 |
3.3.2 植物培养条件 | 第50页 |
3.3.3 载体构建 | 第50-52页 |
3.3.4 拟南芥转基因实验 | 第52-53页 |
3.3.5 T-DNA插入突变体纯合株系的PCR鉴定 | 第53页 |
3.3.6 处理条件 | 第53-54页 |
3.3.7 叶片失水率测定 | 第54页 |
3.3.8 ABA含量测定 | 第54页 |
3.3.9 气孔运动生理实验 | 第54-55页 |
3.3.10 ROS检测 | 第55页 |
3.3.11 MDA含量测定 | 第55页 |
3.3.12 GUS染色及活性测定 | 第55-56页 |
3.3.13 保卫细胞和叶肉细胞原生质体分离 | 第56页 |
3.3.14 保卫细胞中淀粉和苹果酸含量的测定 | 第56-57页 |
3.3.15 基因表达分析 | 第57页 |
3.3.16 蛋白提取和Western blot测定 | 第57-58页 |
3.3.17 染色质免疫共沉淀 | 第58-60页 |
3.4 结果 | 第60-80页 |
3.4.1 WRKY46响应干旱和盐胁迫的诱导 | 第60-62页 |
3.4.2 WRKY46功能缺失突变体对干旱和盐胁迫表现敏感 | 第62-65页 |
3.4.3 WRKY46过表达株系的表型分析 | 第65页 |
3.4.4 过表达WRKY46影响ABA诱导的气孔关闭过程 | 第65-69页 |
3.4.5 WRKY46在保卫细胞中表达 | 第69-71页 |
3.4.6 WRKY46参与调控光诱导的气孔打开过程 | 第71页 |
3.4.7 WRKY46调控细胞渗透保护和氧化还原内稳态基因的表达 | 第71-77页 |
3.4.8 WRKY46调控保卫细胞的淀粉代谢 | 第77-80页 |
3.5 讨论 | 第80-85页 |
3.5.1 WRKY46作为早期因子响应干旱、盐以及氧化胁迫 | 第80页 |
3.5.2 WRKY46参与生物胁迫和非生物胁迫反应 | 第80-83页 |
3.5.3 WRKY46参与气孔的打开过程 | 第83-85页 |
第4章 WRKY46调控盐和渗透胁迫下拟南芥的侧根发育 | 第85-109页 |
4.1 前言 | 第85-87页 |
4.2 问题的提出、拟解决的问题及技术路线 | 第87-89页 |
4.2.1 问题的提出和拟解决的问题 | 第87-88页 |
4.2.2 技术路线 | 第88-89页 |
4.3 材料和方法 | 第89-92页 |
4.3.1 实验材料 | 第89页 |
4.3.2 植物培养条件(同3.3.2) | 第89页 |
4.3.3 处理条件 | 第89-90页 |
4.3.4 T-DNA插入突变体纯合株系的PCR鉴定(同3.3.5) | 第90页 |
4.3.5 GUS染色(同3.3.12) | 第90页 |
4.3.6 IAA含量检测 | 第90页 |
4.3.7 基因表达分析 | 第90页 |
4.3.8 染色质免疫共沉淀(同3.3.17) | 第90-92页 |
4.4 结果 | 第92-105页 |
4.4.1 WRKY46在侧根中表达 | 第92-93页 |
4.4.2 WRKY46的功能缺失抑制侧根在盐和渗透胁迫下的发育 | 第93-96页 |
4.4.3 生长素回复wrky46突变体在盐或渗透胁迫下侧根的生长 | 第96页 |
4.4.4 过表达WRKY46促进盐或渗透胁迫下侧根的发育 | 第96页 |
4.4.5 生长素、ABA、盐和渗透胁迫调控WRKY46的表达 | 第96-100页 |
4.4.6 WRKY46影响盐或渗透胁迫下根中的生长素水平 | 第100-101页 |
4.4.7 WRKY46调控盐或渗透胁迫下ABI4和生长素桥连基因的表达 | 第101-103页 |
4.4.8 WRKY46与ABI4和生长素桥连基因启动子体内结合 | 第103-105页 |
4.5 讨论 | 第105-109页 |
第5章 WRKY46调控铝诱导的苹果酸分泌 | 第109-134页 |
5.1 前言 | 第109-111页 |
5.1.1 植物的铝毒害机制 | 第109-110页 |
5.1.2 植物的耐铝机制 | 第110-111页 |
5.2 问题的提出、拟解决的问题及技术路线 | 第111-113页 |
5.2.1 问题的提出和拟解决的问题 | 第111-112页 |
5.2.2 技术路线 | 第112-113页 |
5.3 材料和方法 | 第113-117页 |
5.3.1 植物材料 | 第113页 |
5.3.2 植物培养条件(同3.3.2) | 第113页 |
5.3.3 铝处理条件 | 第113页 |
5.3.4 GUS染色和活性测定(同3.3.12) | 第113页 |
5.3.5 根系铝含量测定 | 第113-114页 |
5.3.6 根系有机酸分泌的测定 | 第114页 |
5.3.7 烟草叶片中的瞬时表达 | 第114-115页 |
5.3.8 酵母单杂实验 | 第115页 |
5.3.9 基因表达分析 | 第115页 |
5.3.10 染色质免疫共沉淀 | 第115-117页 |
5.4 结果 | 第117-130页 |
5.4.1 WRKY46响应铝 | 第117-120页 |
5.4.2 WRKY46的功能缺失提高拟南芥的铝耐性 | 第120页 |
5.4.3 WRKY46调控ALMT1的表达以及苹果酸的分泌 | 第120-126页 |
5.4.4 WRKY46通过直接结合ALMT1的启动子调控其表达 | 第126-130页 |
5.5 讨论 | 第130-134页 |
第6章 WRKY41调控拟南芥的种子休眠 | 第134-180页 |
6.1 前言 | 第134-136页 |
6.2 问题的提出、拟解决的问题及技术路线 | 第136-138页 |
6.2.1 问题的提出和拟解决的问题 | 第136-137页 |
6.2.2 技术路线 | 第137-138页 |
6.3 材料和方法 | 第138-144页 |
6.3.1 实验材料 | 第138页 |
6.3.2 植物培养条件(同3.3.2) | 第138页 |
6.3.3 载体构建 | 第138-139页 |
6.3.4 拟南芥转基因实验(同3.3.4) | 第139页 |
6.3.5 T-DNA插入突变体纯合株系的PCR鉴定(同3.3.5) | 第139页 |
6.3.6 发芽与根伸长实验 | 第139页 |
6.3.7 干旱处理和失水率测定 | 第139-140页 |
6.3.8 种子ABA含量的测定 | 第140页 |
6.3.9 GUS染色(同3.3.12) | 第140页 |
6.3.10 基因表达分析 | 第140页 |
6.3.11 蛋白提取和Western blot测定 | 第140页 |
6.3.12 烟草叶片瞬时表达实验 | 第140-141页 |
6.3.13 重组蛋白的纯化和凝胶阻滞实验(EMSA) | 第141页 |
6.3.14 染色质免疫共沉淀 | 第141-144页 |
6.4 结果 | 第144-170页 |
6.4.1 WRKY41的功能缺失导致种子的初生休眠降低 | 第144-147页 |
6.4.2 WRKY41主要在种子中表达 | 第147页 |
6.4.3 wrky41突变体的种子萌发和幼苗生长对ABA不敏感 | 第147-151页 |
6.4.4 WRKY41正调控ABA信号途径和种子成熟相关基因的表达 | 第151-153页 |
6.4.5 WRKY41的功能缺失降低种子的热抑制休眠 | 第153-155页 |
6.4.6 WRKY41的功能缺失影响荚果中种子成熟相关基因的表达 | 第155页 |
6.4.7 WRKY41在种子成熟及萌发阶段调控ABI3的表达 | 第155-158页 |
6.4.8 WRKY41不在ABA下游调控ABI3的表达 | 第158-162页 |
6.4.9 WRKY41对ABI3的调控不依赖于ABA的合成代谢、ABA信号途径以及其它调控ABI3转录表达的因子 | 第162-165页 |
6.4.10 WRKY41体外结合ABI3启动子 | 第165页 |
6.4.11 WRKY41在烟草叶片中转录激活ABI3启动子 | 第165-167页 |
6.4.12 WRKY41与ABI3启动子体内结合 | 第167-168页 |
6.4.13 高浓度的ABA反馈调控WRKY41的表达 | 第168-170页 |
6.5 讨论 | 第170-180页 |
6.5.1 WRKY41转录激活ABI3的表达并调控种子的休眠 | 第171-173页 |
6.5.2 WRKY41与ABA信号途径 | 第173-174页 |
6.5.3 WRKY转录因子在种子发育和萌发过程中的作用 | 第174-180页 |
第7章 全文总结 | 第180-183页 |
7.1 主要研究结论 | 第180-181页 |
7.2 创新点 | 第181页 |
7.3 研究展望 | 第181-183页 |
参考文献 | 第183-220页 |
个人简历 | 第220-221页 |
博士期间发表的论文 | 第221页 |