| 致谢 | 第4-5页 |
| 目录 | 第5-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-39页 |
| 1 I 型干扰素综述 | 第13-19页 |
| 1.1 病原体相关分子模式 | 第13-14页 |
| 1.2 病原体相关分子模式识别受体 | 第14-16页 |
| 1.3 I 型干扰素转录 | 第16-17页 |
| 1.4 I 型干扰素受体信号途径 | 第17页 |
| 1.5 I 型干扰素诱导抗病毒基因 | 第17-18页 |
| 1.6 I 型干扰素的免疫调节作用 | 第18页 |
| 1.7 病毒拮抗 I 型干扰素 | 第18-19页 |
| 2 PRRSV 分子病原学与分子免疫学进展 | 第19-37页 |
| 2.1 PRRSV 分子病原学 | 第20-27页 |
| 2.2 PRRSV 分子免疫学 | 第27-36页 |
| 2.3 PRRSV 易引起继发性感染 | 第36页 |
| 2.4 PRRSV 抗原易变异 | 第36-37页 |
| 3 展望 | 第37-38页 |
| 4 本文研究目的和意义 | 第38-39页 |
| 第二章 重组 IFN-β抑制 PRRSV 在 MARC-145 细胞中的复制 | 第39-53页 |
| 1 引言 | 第39-40页 |
| 2 材料 | 第40-41页 |
| 2.1 细胞和病毒 | 第40页 |
| 2.2 试剂配制 | 第40-41页 |
| 3 方法 | 第41-43页 |
| 3.1 MARC-145 细胞复苏和培养 | 第41页 |
| 3.2 PRRSV 接毒 | 第41-42页 |
| 3.3 间接免疫荧光 | 第42-43页 |
| 3.4 荧光定量 PCR | 第43页 |
| 4 结果 | 第43-51页 |
| 4.1 PRRSV 感染前和 PRRSV 感染早期加入的重组 IFN-β均抑制高剂量感染的 PRRSV | 第43-44页 |
| 4.2 PRRSV 感染前后加入的重组 IFN-β均能清除低剂量感染的 PRRSV | 第44-51页 |
| 5 讨论 | 第51-52页 |
| 6 小结 | 第52-53页 |
| 第三章 第176 位氨基酸和锌指结构在 nsp1α抑制 IFN-β转录中发挥重要作用 | 第53-80页 |
| 1 引言 | 第53-55页 |
| 1.1 I 型干扰素是重要的抗病毒蛋白 | 第53页 |
| 1.2 PRRSV 抑制 I 型干扰素的转录 | 第53-54页 |
| 1.3 PRRSV nsp1α抑制 I 型干扰素的转录 | 第54页 |
| 1.4 PRRSV nsp1α抑制 I 型干扰素的转录的机理还不清楚 | 第54页 |
| 1.5 实验目的 | 第54-55页 |
| 2 材料 | 第55-58页 |
| 2.1 细胞和病毒 | 第55页 |
| 2.2 主要试剂 | 第55页 |
| 2.3 试剂配制 | 第55-57页 |
| 2.4 引物序列见表 3-1 | 第57-58页 |
| 3 方法 | 第58-63页 |
| 3.1 已有质粒简介 | 第58页 |
| 3.2 质粒构建步骤 | 第58-62页 |
| 3.3 表达质粒的转染 | 第62页 |
| 3.4 Western-blots 实验 | 第62-63页 |
| 3.5 双荧光报告基因系统检测荧光素酶基因的表达量 | 第63页 |
| 3.6 数据统计 | 第63页 |
| 4 实验结果 | 第63-77页 |
| 4.1 第 176 位氨基酸在 nsp1α抑制 IFN-β转录中起重要作用 | 第63-71页 |
| 4.2 N 端锌指结构在 nsp1α抑制 IFN-β转录中发挥重要作用 | 第71-77页 |
| 5 讨论 | 第77-79页 |
| 5.1 nsp1α第 176 位氨基酸是其抑制 IFN-β转录所必须的 | 第77-78页 |
| 5.2 PRRSV nsp1α的 N 端锌指结构是 nsp1α抑制 IFN-β启动子转录所必须的 | 第78-79页 |
| 6 小结 | 第79-80页 |
| 第四章 PRRSV 的 nsp1α与 HnRNP A2/B1 蛋白相互作用 | 第80-91页 |
| 1 引言 | 第80-81页 |
| 2 材料方法 | 第81-83页 |
| 2.1 293T 细胞和其他试剂 | 第81页 |
| 2.2 引物序列 | 第81页 |
| 2.3 银染试剂配制 | 第81-82页 |
| 2.4 免疫共沉淀 | 第82页 |
| 2.5 SDS-PAGE 电泳（详见第三章方法部分） | 第82页 |
| 2.6 蛋白银染 | 第82-83页 |
| 2.7 Western blots（详见第三章方法部分） | 第83页 |
| 2.8 质粒构建（详见第三章方法部分） | 第83页 |
| 2.9 病毒 TCID50 测定 | 第83页 |
| 3 结果 | 第83-89页 |
| 3.1 免疫共沉淀和质谱测序初步筛选与 nsp1α或 nsp11 相互作用的细胞蛋白 | 第83-85页 |
| 3.2 PRRSV nsp1α与 HnRNP A2/B1 相互作用 | 第85-88页 |
| 3.3 HnRNP A2/B1 促进病毒毒力 | 第88-89页 |
| 3.4 HnRNP A2/B1 蛋白对干扰素转录信号通路无明显作用 | 第89页 |
| 4 讨论 | 第89-90页 |
| 5 小结 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-114页 |
| 博士期间科研成果 | 第114-116页 |
| 本研究得到的项目资助 | 第116页 |
