摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
缩略语表 | 第6-11页 |
第一章 引言 | 第11-20页 |
1.1 沙门氏菌的概述 | 第11-13页 |
1.1.1 沙门氏菌的生理生化特性 | 第11-12页 |
1.1.2 沙门氏菌的抗原结构和血清型分类 | 第12页 |
1.1.3 沙门氏菌的感染流行现状 | 第12-13页 |
1.2 沙门氏菌检测方法研究进展 | 第13-17页 |
1.2.1 传统检测方法 | 第13-14页 |
1.2.2 快速检测方法 | 第14-17页 |
1.2.3 其他检测方法 | 第17页 |
1.3 以胶体金为标记物的免疫层析试纸条 | 第17-19页 |
1.3.1 胶体金及其标记 | 第18页 |
1.3.2 胶体金在免疫层析技术中的应用 | 第18-19页 |
1.4 选题目的和意义 | 第19-20页 |
第二章 抗沙门氏菌单克隆抗体的配对和评价 | 第20-30页 |
摘要 | 第20页 |
前言 | 第20页 |
2.1 材料与仪器 | 第20-21页 |
2.1.1 菌株 | 第20-21页 |
2.1.2 主要试剂 | 第21页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第21页 |
2.1.4 相关试剂配制 | 第21页 |
2.2 实验方法 | 第21-24页 |
2.2.1 细菌培养 | 第21页 |
2.2.2 腹水的纯化 | 第21-22页 |
2.2.3 单抗浓度测定 | 第22页 |
2.2.4 抗体的配对 | 第22页 |
2.2.5 单克隆抗体的评价 | 第22-24页 |
2.3 结果与讨论 | 第24-29页 |
2.3.1 抗体的配对 | 第24-25页 |
2.3.2 单抗的评价 | 第25-29页 |
2.4 小结 | 第29-30页 |
第三章 联检五种常见沙门氏菌血清型的胶体金免疫层析试纸条的制备 | 第30-47页 |
摘要 | 第30页 |
前言 | 第30-31页 |
3.1 材料与仪器 | 第31页 |
3.1.1 菌株 | 第31页 |
3.1.2 主要材料试剂 | 第31页 |
3.1.3 主要仪器设备 | 第31页 |
3.1.4 相关试剂配制 | 第31页 |
3.2 实验方法 | 第31-35页 |
3.2.1 抗原制备 | 第31页 |
3.2.2 胶体金的制备及评价 | 第31-32页 |
3.2.3 标记 pH 的优化 | 第32页 |
3.2.4 标记量的优化 | 第32-33页 |
3.2.5 T 线抗体浓度的优化 | 第33页 |
3.2.6 混合 T 线抗体浓度的优化 | 第33页 |
3.2.7 试纸条的封闭方法的优化 | 第33页 |
3.2.8 混合金标抗体的用量的优化 | 第33页 |
3.2.9 平衡检测时间的确定 | 第33-34页 |
3.2.10 体外孵育时间的优化 | 第34页 |
3.2.11 沙门氏菌胶体金免疫层析试纸条的组装 | 第34页 |
3.2.12 胶体金试纸条的评价 | 第34-35页 |
3.3 结果与讨论 | 第35-46页 |
3.3.1 胶体金的表征 | 第35页 |
3.3.2 标记 pH 对试纸条显色信号强度的影响 | 第35-36页 |
3.3.3 抗体标记量对偶联效率和试纸条显色信号强度的影响 | 第36-39页 |
3.3.4 T 线抗体浓度的确定 | 第39-40页 |
3.3.5 混合 T 线抗体浓度的确定 | 第40-41页 |
3.3.6 封闭剂确定 | 第41页 |
3.3.7 混合金标抗体用量的确定 | 第41-42页 |
3.3.8 平衡检测时间的确定 | 第42页 |
3.3.9 体外孵育时间的确定 | 第42-43页 |
3.3.10 胶体金试纸条的评价 | 第43-46页 |
3.4 讨论 | 第46-47页 |
第四章 胶体金试纸条检测食品基质中的沙门氏菌 | 第47-54页 |
4.1 材料与仪器 | 第47页 |
4.1.1 菌株 | 第47页 |
4.1.2 主要试剂 | 第47页 |
4.1.3 主要仪器设备 | 第47页 |
4.1.4 相关试剂配制 | 第47页 |
4.2 实验方法 | 第47-49页 |
4.2.1 菌株培养 | 第47-48页 |
4.2.2 食品基质增菌前处理 | 第48页 |
4.2.3 前增菌液的选择 | 第48页 |
4.2.4 选择性增菌液的选择 | 第48-49页 |
4.2.5 食品样本检测 | 第49页 |
4.3 结果与讨论 | 第49-53页 |
4.3.1 前增菌中抑制剂对细菌的影响 | 第49-51页 |
4.3.2 选择性增菌液的选择 | 第51-52页 |
4.3.3 食品基质的接种量 | 第52页 |
4.3.4 牛奶和鸡蛋基质中沙门氏菌的可检测增菌时间 | 第52-53页 |
4.4 讨论 | 第53-54页 |
第五章 结论与展望 | 第54-56页 |
5.1 结论 | 第54-55页 |
5.1.1 抗沙门氏菌外膜蛋白单克隆抗体的配对和评价 | 第54页 |
5.1.2 联检五种沙门氏菌血清型的胶体金免疫层析试纸条的制备 | 第54-55页 |
5.1.3 胶体金试纸条检测食品基质中的沙门氏菌 | 第55页 |
5.2 展望 | 第55-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
附录表 1 菌种目录 | 第63-64页 |
附录表 2 主要试剂 | 第64-65页 |
附录表 3 仪器设备 | 第65-66页 |
附录表 4 试剂配制 | 第66-68页 |
个人介绍 | 第68页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第68页 |